红棕油对蛋鸡产蛋性能、蛋品质及蛋黄着色效果的影响

董淑楠， 朱航榉，2， 周海腾， 王少康， 孙桂菊*

（1.东南大学公共卫生学院营养与食品卫生学系/环境医学工程教育部重点实验室，江苏南京 210009；2.江苏省肿瘤医院，江苏南京 210009；3.大马棕榈油技术研发（上海）有限公司，上海 201108）

蛋黄色泽是衡量蛋品质的重要指标之一，是消费者主观评价蛋品质优劣的一项指标（Fletcher，1999）。消费者普遍喜欢蛋黄颜色偏深的禽蛋（Karadas等，2006），多偏好金黄色或橙红色的蛋黄。国内外大量研究表明，蛋黄颜色与家禽饲料密切相关，其中类胡萝卜素起着关键作用（Brulc等，2013；Hammershoj等，2010；Handelman 等，1999）。类胡萝卜素不仅可以改善蛋黄颜色，还具有维持机体健康的作用，类胡萝卜素具有抗氧化、免疫调节、 抗癌等功效 （Vieira等，2016；Leoncini等，2015；Soares Nda 等，2015），同时部分类胡萝卜素是维生素A的前体，可以在体内转换成维生素A（Islam 和 Schweigert，2015）。

红棕油（RPO）由棕榈果肉经过压榨得到，因其中含有丰富的类胡萝卜素而呈红色或者橙红色，RPO大约含有500 mg/kg胡萝卜素 （主要是α-胡萝卜素和β-胡萝卜素）和800 mg/kg维生素E （α-生育三烯酚，β-生育三烯酚和δ-生育三烯酚 ） （Mba 等 ，2015；Manorama，2014；Nagendran等，2000），除此之外，RPO中还含有辅酶Q和植物甾醇 （Nagendran等，2000）。RPO主要含棕榈酸、油酸和亚油酸，饱和脂肪酸含量约为50%、单不饱和脂肪酸含量约为40%、多不饱和脂肪酸含量约为10%，其中单不饱和脂肪酸主要为油酸，多不饱和脂肪酸主要为亚油酸（马舒舒，2015）。

早在20世纪30年代和40年代就已经开始通过膳食干预来研究RPO对人群维生素A缺乏症的预 防 和治疗 （Raymond，1941；Aykroyd 等 ，1937）。但是，将RPO替代大豆油做成家禽饲粮却鲜有报道。有动物试验表明在饲粮中添加棕榈油和RPO对鸡肉的营养价值和脂肪酸的组成没有负面影响，且RPO降低了鸡血浆中的总胆固醇含量（Nyquist等，2013）。本试验在蛋鸡饲料中添加RPO，研究RPO对蛋鸡产蛋性能、蛋品质以及蛋黄着色效果的影响，评价RPO在改善蛋黄色泽方面的作用，以期为RPO在产蛋鸡饲粮中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与试剂 RPO由大马棕榈油技术研发（上海）有限公司（MPOB）提供，酸价，KOH 17.44 mg/g； 过氧化价，10.25 meq/kg； 碘价，53.7 gI2/100 g；熔点，40.7 ℃；维生素 E，2598.6 mg/kg；类胡萝卜素，1257.3 mg/kg。

总胆固醇和甘油三酯测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 试验设计及饲粮 选取产蛋率、体重相近，健康状态良好的50周龄海兰褐蛋鸡80羽，随机分为4组，每组5个重复，每个重复4羽鸡。为使各组日粮的能值相同，并使RPO的添加量分别达到试验要求，本试验采用重量替代法，在各组的日粮中，用同样重量的大豆油来替代等量的RPO，以使各组日粮的RPO添加量达到1%、2%、3%，具体添加量如下：

基础饲粮：养殖场自产饲粮 （不额外添加油脂），用于配制试验组用饲粮；

对照组（CG）：基础饲粮+3%大豆油；

1% 红棕油组（1%RPOG）：基础饲粮+2%大豆油+1%RPO；

2% 红棕油组（2%RPOG）：基础饲粮+1%大豆油+2%RPO；

3% 红棕油组（3%RPOG）：基础饲粮+0%大豆油+3%RPO。

试验期为10周，其中预试期2周，饲喂对照组饲粮。正式期8周，分别饲喂上述各组饲粮。

参照 NRC（1994）和我国《鸡饲养标准》（NY/T 33-2004）配制玉米-豆粕型粉状基础饲粮，饲粮组成及营养水平见表1。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 生产性能指标 从正式试验第1天开始，每天以重复为单位，记录产蛋总数、总蛋重、采食量。每周末定时结料、称重，记录饲粮消耗量，所有饲粮用冰箱冷藏保存。根据采集的数据，以组为单位计算平均日采食量、料蛋比、产蛋率和平均蛋重。

蛋鸡产蛋率、平均日采食量、料蛋比计算公式如下：

产蛋率/%＝统计期内总产蛋数/（总鸡数×统计期天数）×100；

采食量＝（日投料量-剩余料量）/鸡数；

料蛋比/%＝统计期内总耗料量/统计期内总蛋重×100。

1.3.2 蛋品质 在试验期第1天和第56天，每个重复取2枚蛋，每组共取10枚蛋。先将蛋洗净，擦干水分，称取蛋的总重量，然后将蛋打入EMT-5200多功能蛋品分析仪的分析盘中测量蛋黄颜色、蛋白高度、哈氏单位等蛋品质指标，然后把蛋倒入分蛋器中，弃去蛋清，将蛋黄倒入一次性培养皿内，不破坏卵黄膜，之后用镊子帮助分离蛋壳上残留的蛋清，用滤纸吸干蛋壳。分别使用分析天平称量称取蛋壳重和蛋黄重，精确至0.01g，蛋清重为蛋重减去蛋黄重和蛋壳重；蛋黄比例表示为（蛋黄重/全蛋重）×100%，即蛋黄占整个蛋重的百分比（刘璐等，2014）。蛋白比例表示为（蛋白重/全蛋重）×100%，即蛋白占整个蛋重的百分比。

1.3.3 样品中类胡萝卜素含量检测 取适量样品（蛋黄取 3 g，饲料取 3 g，RPO 取 1 g），以石油醚-丙酮（2∶l，V/V）为溶剂，室温，料液比为 1∶5（m/V），浸提时间为60 min，提取3次，合并提取液，过滤，将其定容于50 mL的容量瓶中，在450 nm波长处用紫外分光光度计测定吸光度值，以β-胡萝卜素作标准曲线，计算蛋黄中总类胡萝卜素含量。将上述蛋黄色素提取液用有机滤膜过滤，进HPLC检测。

表1 对照组饲粮组成及营养水平（风干基础）

分别称取1 mg叶黄素，用二氯甲烷溶解，分别配置成 1、3、4、6、10、20 μg/mL 和 30 μg/mL；1 mg玉米黄素，用二氯甲烷溶解，分别配置成1、2、3、4、5、10、15、20 μg/mL 和 50 μg/mL；1.08 mg β-胡萝卜素标准品，用二氯甲烷溶解，分别配置成2.16、3.24、5.4、10.8、21.6、32.4、54 μg/mL 和108 μg/mL，0.22μm有机膜过滤，HPLC检测，以浓度和峰面积做标准曲线。

分别取上述各类胡萝卜素溶液100μg/mL叶黄素 1 mL、100μg/mL玉米黄素 1 mL、600μg/mL β-胡萝卜素1 mL于棕色容量瓶中，定容至10 mL，混合均匀，0.22μm有机膜过滤，上机检测。

HPLC检测条件，色谱柱：YMCTM Carotenoid色谱柱 （250 mm×4.6 mm，5μm），柱温，20 ℃；检测波长，450 nm；流动相 A 甲醇：乙腈＝25：75；流动相B甲基叔丁基醚；流动相C水，波长450 nm，进样量20μL，流速为1 mL/min，梯度洗脱为 0～15 min：A 98% ～ 70%，B 0～ 28%，C 2%；15 ～20 min：A 70% ～18%，B 28% ～80%，C 2%；20～22 min：A 18% ，B 80% ，C 2% ；22 ～ 23 min：A 18% ～0，B 80% ～100%，C 2% ～ 0；23～ 25 min：A 0～98%，B 100% ～0，C 0～2%。

1.4 统计分析 结果以“平均值±标准差”表示。试验数据组间差异采用SPSS 19.0软件中的oneway ANOVA进行方差分析，差异显著者采用SN-K法进行多重比较，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 RPO和饲料中类胡萝卜素的含量 各组饲料和RPO中类胡萝卜素含量见表2。各RPO组饲料中的总类胡萝卜素含量明显高于对照组饲料（增长率为195% ～612%），RPO中的类胡萝卜素主要为β-胡萝卜素，含有少量的叶黄素，因此随着RPO含量的增加，各组饲料中类胡萝卜素含量也有所增加。

2.2 RPO对蛋鸡生产性能的影响 各试验组蛋鸡生产性能见表3。RPO干预前各组产蛋率、平均日采食量、料蛋比差异无统计学意义（P＞0.05）。RPO干预8周后RPO组料蛋比和采食量与对照组相比无差异（P＞0.05），但是3%RPO组蛋鸡的产蛋率较1%RPO组的产蛋率降低4.77%（P ＜ 0.05）。

2.3 RPO对蛋品质的影响 由表4可知，RPO干预前各组蛋重、蛋白高度、蛋黄颜色、哈氏单位、蛋黄比例、蛋白比例差异无统计学意义（P＞0.05）。

RPO干预8周后，蛋黄比例、蛋白比例、蛋白高度差异无统计学意义（P＞0.05），而蛋黄颜色和哈氏单位这两项指标则差异显著（P＜0.05）。其中蛋黄颜色随着饲粮中RPO比例的增加而加深，呈剂量依赖性。3%RPO组蛋黄颜色最深，比对照组蛋黄颜色增加了两个等级。哈氏单位随着饲粮中RPO的增加呈现先上升后下降的趋势，与对照组相比，1%RPO组的哈氏单位显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），而2%、3%RPO组的哈氏单位虽然高于对照组，但差异均无统计学意义（P ＞ 0.05）。

表2 RPO和各组饲料中类胡萝卜素含量μg/g yolk

表3 红棕油干预前后对蛋鸡生产性能的影响

表4 红棕油干预前后对各组蛋品质的影响

2.4 RPO对蛋黄类胡萝卜素含量的影响 由表5可知，RPO干预前各组蛋黄中叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素和总类胡罗卜素含量无差异（P>0.05）。

经过8周干预，RPO组蛋黄叶黄素和玉米黄素水平高于对照组（P<0.05），并且随着RPO含量的增加，蛋黄中叶黄素和玉米黄素含量也增加（P<0.05）（分别较对照组提高18% ～60%、23% ～84%）。与对照组相比，1%RPO组蛋黄β-胡萝卜素含量与对照组无差异 （P>0.05），2%、3%RPO组蛋黄β-胡萝卜素含量高于对照组 （P<0.05），较对照组提高1.7%～2.2%。经过8周干预，RPO组蛋黄总类胡萝卜素水平高于对照组 （P<0.05），其中随着RPO含量的增加，蛋黄中总类胡萝卜素含量也增加 （P<0.05），3%RPO组蛋黄总类胡萝卜素含量达到最大，是对照组蛋黄总类胡萝卜素含量的1.95倍。

3 讨论

3.1 RPO对蛋鸡生产性能的影响 RPO干预8周后RPO组料蛋比和采食量与对照组相比无差异（P>0.05），但是3%RPO组蛋鸡的产蛋率明显低于1%RPO组的产蛋率（P<0.05），提示与大豆油相比，短期饲喂RPO对产蛋鸡的生产性能无影响（P>0.05），但是与低剂量RPO的干预效果相比，高剂量RPO可降低蛋鸡的产蛋率（P<0.05）。这可能是因为RPO本身具有一种特殊的气味和颜色，低剂量添加在饲料中时气味和颜色改变不明显，反而增加了饲料中的类胡萝卜素和维生素E等营养素的含量，从而提高了产蛋率，当添加比例增大时会明显改变饲粮的气味和颜色，从而影响产蛋鸡对饲料的采食和消化利用，也可能是因为RPO与大豆油相比脂肪酸种类和含量不同，从而影响了蛋鸡的产蛋率。

3.2 RPO对蛋品质和蛋黄类胡萝卜素含量的影响 哈氏单位和蛋白高度是评价蛋新鲜程度的指标。本研究发现，各试验组蛋白高度、哈氏单位和蛋黄颜色与对照组相比，在数值上均呈现出增高的趋势，其中1%RPO组的哈氏单位以及1%、2%和3%RPO组的蛋黄颜色显著高于对照组（P<0.05）。哈氏单位的大小与蛋白高度呈正相关，蛋白的分泌主要在输卵管膨大部，分泌腺依次分泌内稀蛋白、浓蛋白和外稀蛋白包裹在卵黄外（卢建等，2013）。由于分泌部细胞需要摄取大量养分来供给蛋白的分泌，因此，饲粮中的油脂代谢产物很可能能够到达分泌部，说明RPO对分泌部细胞膜结构及分泌功能是有益的。

消费者普遍喜欢蛋黄颜色红亮的禽蛋（蛋黄颜色在 10 级左右）（Kijparkorn 等，2010），而规模化养殖的禽蛋蛋黄颜色等级则通常在7左右。有研究表明蛋禽本身不能合成色素，蛋黄的颜色与饲粮中的类胡萝卜素和其他色素的数量和种类有关（沈曼曼和王莹，2014；Brulc 等，2013；刘晓辉等，2009），主要是亲脂性的含氧类胡萝卜素（张巍等，2015）和核黄素（石天虹等，2010）。这些色素溶于卵黄中的脂肪小滴中，因此蛋黄的颜色主要取决于类胡萝卜素含量的多少 （赵国刚，2008）。本试验结果表明在日粮中添加RPO能显著提高蛋黄的颜色，且随着日粮中RPO添加量的增加呈显著上升趋势，3%RPO组蛋黄颜色与对照组蛋黄颜色相比增加了两个等级。进一步研究发现，RPO可以显著提高蛋黄中叶黄素、玉米黄素和总类胡萝卜素的含量（P<0.05），并且随着RPO含量的增加而增加；在饲料中分别添加2%和3%RPO可以提高蛋黄中β-胡萝卜素的水平 （P<0.05）。本研究结果提示RPO中的类胡萝卜素可以被蛋鸡有效的吸收并转化沉积到蛋黄中，改善蛋黄颜色，且RPO中的脂肪酸可以促进RPO和饲粮中的类胡萝卜素和核黄素的吸收。

表5 红棕油对蛋黄各类胡萝卜素和总类胡萝卜素含量的影响 μg/g蛋黄

4 结论

油脂是蛋鸡生长过程中的重要营养物质，在饲粮中添加油脂可以促进蛋鸡对脂溶性营养物质的吸收，并具有调节免疫机能的作用（岳洪源，2011）。从本试验结果可以得出：（1）RPO对产蛋率、料蛋比和采食量无影响，而3%RPO则会降低产蛋率；（2）1%RPO组的哈氏单位以及 1%、2%和3%RPO组的蛋黄颜色显著高于对照组；（3）RPO可以显著提高蛋黄中叶黄素、玉米黄素、β-胡萝卜素以及总类胡萝卜的含量，且饲料中添加2%的RPO较为合适。