雅培Architect i2000化学发光分析仪检测乙型肝炎病毒标志物的应用

花艳艳 李梦华 丁楠 大连市第六人民医院检验科 （辽宁 大连 116000）

乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus，HBV），又简称乙肝病毒，是一种DNA病毒，属于嗜肝性DNA病毒科[1]。据统计，到目前为止，全世界感染慢性乙肝病毒患者约为4亿左右，每年死于乙肝病毒及其并发症的患者约有100万[2,3]。临床上乙肝病毒检测标志物主要有：乙肝病毒表面抗原HBsAg，乙肝病毒表面抗原HBsAb，乙肝病毒e抗原HBeAg，乙肝病毒e抗原HBeAb以及乙肝病毒核心抗原HBcAg等[4-6]。目前，临床上主要采用传统的酶联免疫吸附试验法（ELISA法）检测乙肝病毒标志物，此法主要优点在于成本低，但是只能对乙肝病毒标志物进行定性分析，而且灵敏度低、稳定性差。相比于ELISA法，化学发光法具有确诊率高、灵敏度高、反应速度快、影响因素少以及稳定性高等优点，在临床上定量检测乙肝病毒标志物方面具有巨大的应用潜力和优势。本研究主要采用雅培Architect i2000化学发光分析仪与传统的ELISA法对患者进行乙肝病毒标志物检测，分析与对比。

1.材料与方法

1.1 样品标本

本研究所用的样品标本均来自本院2017年9月～2017年12月门诊和住院的2587例患者，其中确诊乙肝患者179例，男1476例，女1111例。参与研究的患者的年龄在10～69岁，平均40.5岁。所有参与研究的患者血样均采用经脉采血法，并通过离心分离出血清进行检测、检查。

1.2 仪器与试剂

化学分光法采用的是美国雅培公司的Architect i2000化学发光分析仪（并包含相应的配套试剂），而ELISA法则采用的是上海科华KHB-ST-360酶标仪以及Rayto雷杜RT-3900自动洗板机；本研究所用的乙肝病毒标志物ELISA法检测试剂是由潍坊三维生物工程集团有限公司提供的。

1.3 研究方法

所有参与研究的患者的血样血清平均分为两份，分别采用ELISA法和化学发光法严格按照相应试剂盒的使用说明书对所有血清进行检测，对比分析检测结果。其中，两种方法均采用双抗原夹心法。1.3.1 ELISA法。按照试剂盒说明书，以表面抗原定值血清为质控，阴性阳性各两孔。首先加入待检测血清，并加入聚苯乙烯板包被的抗体，随后继续加入辣根过氧化物，孵育30min后，洗去多余的抗体后，加入适量的显示剂，利用酶标仪读取吸光值A（Ex/Em=450nm/630nm）。阴性对照组的临界值为平均吸光度A×2.1，因此，检测结果大于临界值为阳性，小于临界值则为阴性。

1.3.2 化学发光法。将待测血样与显色剂标记过的抗原或抗体进行结合培育，其次与亲和素标记的磁微粒进一步培育，利用磁场是标志物-抗原-生物磁微粒复合体沉淀下来，并用去离子水洗涤三次后，将反应液吸入Architect i2000化学发光分析仪的流动室中，电极加压后测试特定激发光下的各种标志物的浓度。

1.4 统计学分析

本研究采用SPSS 15.0统计软件对两种检测方法的检测结果进行χ2检验。

2.结果

2.1 乙肝病毒两种检测结果的比较

表1显示了179例患者乙肝病毒检测结果的符合率，参与检测的乙肝病毒标志物有五种，分别为：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAg。对于化学分光法而言，其乙肝病毒检测结果符合率均高于90%，其中，HBsAb和HBeAb的符合率分别为95.0%以及96.1%；而对于ELISA法，其乙肝病毒五项标志物的检测符合率明显低于化学分光法，平均在81.0%～86.6%，其中HBsAg的符合率仅为81.0%。

2.2 乙肝病毒阳性检出率的比较

在对参与本次研究的2587例患者的乙肝病毒阳性检测研究后发现，化学发光法检测出阳性179例，其相应乙肝病毒阳性检出率为6.92%；而对于ELISA法而言，该法检测出阳性共148例，乙肝病毒阳性检出率则为5.72%。由此可见，化学发光法的乙肝病毒阳性检出率要略高于ELISA法。

表1. 179例患者乙肝病毒检测结果的符合率

3.讨论

化学发光法检测乙肝病毒标志物要明显优于ELISA法。

本研究结果显示：首先，采用化学发光法检测乙肝病毒各种标志物的符合率要明显高于采用ELISA法的符合率；其次，化学发光法的乙肝病毒阳性检出率也要略高于ELISA法的检出率。由此可见，化学发光法检测乙肝病毒标记的灵敏度更高、精确性更高、重复性更高、检测误差更低（化学发光法受到环境因素的影响更小）。

4.结论与展望

相比于采用传统的ELISA法检测乙肝病毒标志物，使用雅培Architect i2000化学发光分析仪检测乙肝病毒标志物的符合率更高，同时乙肝病毒阳性检测率亦更高。说明采用雅培Architect i2000化学发光分析仪可定量检测分析乙肝病毒标志物，可以检测乙肝患者病情的发展变化，具有高灵敏度、高精确度、高重复性以及低检测误差等优点。基于化学发光法检测乙肝病毒检测的巨大优势，各大医疗机构应该进一步推广该法检测乙肝病毒的应用，减少检测误差以及消除漏检等不良情况的发生。

[1] European Association for the Study of the Liver. EASI Clinical Practice Guide lines: Management of chronic hepatitis B [J]. J Hepatol,2012,57(1):167-185.

[2] 王洁,汪茂荣.两种免疫分析系统对乙型肝炎表面抗原定量检测的比较[J].中华肝脏病杂志,2013,21(3):192-195.

[3] 郭洪,张学英,郭丽娟.i2000化学发光分析仪检测乙型肝炎病毒标志物的应用[J].中华医院感染学杂志,2011,21(6):1276-1277.

[4] 李白生,刘轶群,周健.两种方法对检测乙型肝炎5项血清学指标[J].检验医学与临床,2007,4 (4):272-273.

[5] 陈海斌.化学发光免疫分析技术及其发展[J].中国医学装备,2011,8(5):56-57.

[6] 陈慧英,张锦锋,岑小鹏.ELISA检测乙型肝炎HBsAg室内质控血清的试剂和使用[J].上海医学检验杂志,2000,15(4):203-205.