血清EB病毒Rta-IgG抗体检测在鼻咽癌诊断中的应用价值研究

曾泽勇 区叶明

鼻咽癌指发生于鼻咽黏膜上皮的恶性肿瘤, 常发生于鼻咽顶后壁的顶部, 其次为侧壁, 发生于前壁及底壁者极为少见, 发病人群大多为中年人, 亦有青少年患病者。该病是我国高发恶性肿瘤之一, 发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首, 其常见的临床症状为鼻塞、涕中带血、耳闷堵感、听力下降、复视及头痛等［1-3］。鼻咽癌病变隐蔽, 易漏诊、误诊, 不易早期诊断, 以上单个指标的检测对鼻咽癌血清学诊断的敏感度和准确度均不甚理想, 因而国内外都在寻找一种有效的血清学诊断方法。EB 病毒 (epstein-barr virus, EBV)属于潜伏于机体细胞内的一种γ疱疹病毒。目前许多研究均认为EB病毒与鼻咽癌疾病的发生、发展存在密切的关系［4,5］。目前越来越多的EB病毒相关指标被用作鼻咽癌的标志物, 如病毒壳蛋白抗原-免疫球蛋白A(VCA-IgA)、EB病毒早期抗原免疫球蛋白A(EA-IgA)等对于本病的诊断具有重要意义［6-8］。近年来有研究报道［9,10］, 血清 EB 病毒 Rta-IgG 抗体检测可用于鼻咽癌诊断中, 为进一步检验其精确性, 本研究以佛山市高明区中医院收治的各期鼻咽癌患者作为观察研究对象, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取佛山市高明区中医院2016年6月～2017年5月收治的82例鼻咽癌患者作为研究组, 所有患者均经病理学检查确诊, 并排除严重疾病患者；另选同期80例健康体检者作为对照组。对照组志愿者中男58例,女 22例。年龄 23～81岁 , 平均年龄 (54.85±10.26)岁；研究组患者中男 61 例 , 女 21 例 , 年龄 22～82 岁 , 平均年龄(54.79±10.18)岁, Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期20例、Ⅳ期22例两组研究对象性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。本研究已获得医院伦理学委员会批准, 并且于试验前自愿签订知情同意书参与研究。

1.2 方法 所有研究对象均为清晨空腹化验, 抽肘静脉血5 ml, 血液样本抽取完毕立刻送往进行离心处理, 离心机中12000 r/min离心3 min得到血清。其血清Rta-IgG抗体水平检测采用ELX800酶标仪以酶联免疫吸附法(ELISA法)进行,血清Rta-IgG检测试剂盒购于同昕生物技术(北京)有限公司, 所有操作及处理均严格按照说明书以及酶联免疫吸附法指南进行。在微孔条上预包被高纯度基因重组Rta 蛋白, 与血清样品中Rta 抗体结合, 再加入HRP 标记的羊抗人IgG 与之结合, 加入TMB底物显色, 终止液终止反应。酶标仪检测吸光度并经线性回归方程计算得出EB病毒Rta-IgG抗体水平。且每份血样均进行3个平行试验并取平均值。

1.3 观察指标 统计对照组志愿者、研究组以及研究组四个时期各组患者Rta-IgG抗体水平。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清Rta-IgG抗体水平比较 研究组患者血清Rta-IgG抗体含量为(73.28±8.26)U/ml, 显著高于对照组的(1.38±0.82)U/ml, 差异具有统计学意义 (P＜0.05)。见表 1。

表1 两组血清 Rta-IgG抗体水平比较 (, U/ml)

表1 两组血清 Rta-IgG抗体水平比较 (, U/ml)

注：与对照组比较, aP＜0.05

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2.2 研究组不同时期血清Rt-IgG抗体水平比较 鼻咽癌患者血清EB病毒Rta-IgG抗体水平, Ⅰ期患者＜Ⅱ期患者＜Ⅲ期患者＜Ⅳ期患者, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 研究组不同时期血清Rta-IgG抗体水平比较 (, U/ml)

表2 研究组不同时期血清Rta-IgG抗体水平比较 (, U/ml)

注 ：与Ⅰ期比较 , aP＜0.05 ；与Ⅱ期比较 , bP＜0.05 ；与Ⅲ期比较 ,cP＜0.05

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3 讨论

世界卫生组织调查报道, 全球有80%的鼻咽癌患者在中国, 其发病率以中国的南方较高, 发病年龄由20多岁开始,逐渐上升, 45～60岁为最高峰, 男性高于女性。严重影响患者的生活质量, 威胁其生命安全［11-13］。近年来随着癌症诊断技术的飞速发展, Rta蛋白由EB病毒BRLF1基因编码, 是一种EB病毒反式激活蛋白, 一般在EB病毒裂解早期就可表达, 可促进EB病毒其他产物的表达, 这提示Rta蛋白可能具有用于鼻咽癌早期诊断的潜力［14,15］。近年来有研究也发现Rta-IgG抗体用于鼻咽癌诊的准确性较高, 特别是用于鼻咽癌筛查具有很高的特异性［16］。

本研究结果显示, 鼻窦癌患者血清中EB病毒Rt-IgG抗体水平显著高于健康志愿者, 且随着病情加重, EB病毒Rta-IgG抗体水平逐渐增加, 这与蔡永林等研究报道相一致［17］。说明EB病毒Rta-IgG抗体水平与鼻咽癌病情严重程度相关。

综上所述, EB 病毒Rta-IgG 定量检测对于鼻咽癌的诊断具有较高临床价值, 为下一步进行鼻咽癌临床治疗效果的监测奠定了基础。因此对于鼻咽癌高发地区、高发人群应该加强EB 病毒Rta-IgG抗体的检测, 做到早诊断早治疗。