不同年龄组静止型α-地中海贫血的血液学参数分析

裴元元 冉健 李高驰 魏凤香

(深圳市龙岗区妇幼保健院，广东 深圳 518172)

α-地中海贫血是由于α-珠蛋白基因的缺失型或非缺失型突变引起的，根据临床表现严重程度一般分为静止型、轻型、中间型、重型四个类型。α-地中海贫血的临床表型取决于α-珠蛋白基因缺陷的基因型，即表型的严重程度与基因的剂量密切相关。当一个α-珠蛋白基因突变时其杂合子还保留有3个α-基因(-α/αα、αTα/αα)，通常表现为静止型α-地中海贫血。-α/αα携带者通常无血液学异常表现，可以没有任何临床症状，需要通过基因分析确诊。部分αTα/αα携带者(αCSα/αα、αQSα/αα)可表现为小细胞低色素[1]。静止型α-地中海贫血的确诊，可有效指导中间型α-地贫患儿的早期诊断。本文中，我们对比分析了不同年龄组静止型α-地贫的基因型及血液表型，以期能为有效筛查静止型α-地中海贫血提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 299例基因型为-α/ αα或ααT/ αα的静止型α-地中海贫血基因携带者。成人组267例，年龄21～44岁，儿童组32例，年龄9个月至3岁。

1.2 方法

1.2.1 MCV、MCH检测 取静脉血2ml, EDTA-K2抗凝,东亚SYSMEX血细胞分析仪分析平均红细胞体积(MCV)及平均红细胞血红蛋白量(MCH)。 MCV<82fl、 MCH<27pg定义为血细胞指标阳性。

1.2.2 血红蛋白电泳分析 使用Sebia全自动毛细管电泳仪进行血红蛋白电泳，分析血红蛋白组分及其百分比。

1.2.3 地贫基因检测 采用全血基因提取试剂盒提取外周血基因组DNA，基因诊断试剂盒诊断α-地贫的3种缺失型突变(gap-PCR技术)和3种点突变(PCR结合寡核苷酸探针反向印迹杂交法)。

2 结果

2.1 基因型分析 299例静止型α-地中海贫血基因携带者中-α3.7/αα 158例、-α4.2/αα 61例、αCSα/αα 46例、αWSα/αα 24例、αQSα/αα 10例，缺失型占73.2%，具体基因型见表1。

表1 两个年龄组静止型α-地中海贫血的基因型及MCV、MCH统计

2.2 MCV、MCH分析

2.2.1 MCV、MCH单指标筛查静止型α-地中海贫血结果分析 如表2所示，单独以MCV<82fl作为地贫筛查阳性指标时，成人组会有151例基因突变携带者遗漏，筛查漏诊率为56.6%(151/267)，儿童组有2例遗漏，筛查漏诊率为6.3%(2/32)；以MCH<27pg为筛查阳性指标时，成人组会有136例遗漏，筛查漏诊率为50.9%(136/267)，儿童组有1例遗漏，筛查漏诊率为3.1%(1/32)。MCH的筛查灵敏度略高于MCV。

表2 MCV、MCH单指标筛查静止型α-地中海贫血结果分析(例)

注： MCV(-)指MCV≥82fl，MCH(-)指MCH≥27pg

2.2.2 MCV、MCH联合筛查静止型α-地中海贫血结果分析 如表3所示，MCV、MCH联合筛查静止型α-地中海贫血时，成人组267例基因突变携带者有145例MCV、MCH一项或双项检测值异常，但仍有122例MCV与MCH检测值均正常(-α3.7/αα 69例、-α4.2/αα 21例、αCSα/αα 21例、αWSα/αα 11例)，筛查漏诊率为45.7%(122/267)。儿童组32例基因突变携带者有1例-α4.2/αα无法筛出，筛查漏诊率为3.1%(1/32)。

表3 MCV、MCH联合筛查静止型α-地中海贫血结果分析(例)

注：(-) 指检测指标在正常值范围，(+) 指检测指标在正常值范围之外

2.2.3 两个年龄组静止型α-地中海贫血MCV、MCH对比分析 如表1所示，儿童组不同基因型静止型α-地中海贫血的MCV、MCH明显低于成人组，如表4所示，组间比较具有统计学意义。

表4 两个年龄组静止型α-地中海贫血MCV、MCH对比分析

3 讨论

地中海贫血是最早在分子水平上阐明了发病机制的人类遗传病之一，α-地中海贫血的分子基础是α2和α1基因的缺失或点突变，使α-珠蛋白产量下降，导致无效造血或红细胞被破坏。地中海贫血属于常染色体隐性遗传病，单个珠蛋白等位基因的突变(基因突变携带者)不会导致个体出现临床症状，只有突变纯合子才会发病[1，2]。静止型α-地中海贫血自身虽不发病，却可将突变基因传递给下一代，在地中海贫血高发的广东，为了有效指导中间型α-地中海贫血的早期诊断，大规模静止型α-地中海贫血的筛查诊断是必要的预防措施。

目前，MCV、MCH、Hb A2广泛应用于地贫筛查[3，4]，Hb A2筛查β-地中海贫血的灵敏度和特异度均很高，筛查α-地中海贫血，尤其是静止型与轻型α-地中海贫血的灵敏度和特异度较差[3,5，6]。本文研究了299例基因型为-α/ αα或ααT/ αα的静止型α-地中海贫血基因突变携带者，结果发现-α3.7/ αα与-α4.2/αα合占所有突变基因型的73.2%。将研究对象分为成人组与儿童组分析各组的血液参数发现，在成人组，MCV、MCH单指标筛查静止型α-地中海贫血的漏诊率高达50%以上，MCV、MCH联合筛查的漏诊率也有45.7%，122例MCV与MCH均阴性的患者中有25例Hb A2大于2.6%，无法通过血红蛋白电泳筛出，详细分析该25例静止型α-地中海贫血的血液学参数发现，1例红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)升高，2例平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)降低，8例血红蛋白浓度降低，12例红细胞计数降低，11例所有血细胞参数均正常，即仍有部分静止型α-地中海贫血无法通过血液学分析筛出。分析32例儿童组数据发现，仅有1例患儿无法通过MCV、MCH筛出，但该患儿的红细胞计数及血红蛋白浓度均降低。对比成人组与儿童组各突变基因型的MCV、MCH，儿童组不同基因型的MCV、MCH均明显低于成人组，且组间比较具有统计学意义，MCV、MCH筛查学龄前儿童的静止型α-地中海贫血灵敏度远高于成人。

检索文献显示，不同课题组就静止型α-地中海贫血已做过充分分析[7-9]。本研究小组将静止型α-地中海贫血按年龄分组，得出可将学龄前血参数作为筛查静止型α-地中海贫血依据的结论。鉴于儿童组现有数据量较少，我们会进一步收集该部分数据，以期为临床地中海贫血遗传咨询提供更准确的理论依据。

参考文献

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