HLA-B27、血沉、CRP诊断强直性脊柱炎的临床意义

秦曼妮，梁逸仙

（广东省东莞市第三人民医院检验科，东莞 523326）

强直性脊柱炎是由于脊柱附着点和骶髂关节的炎症引起的一种疾病，它是一种以关节和骨化强直病变为特点的慢性炎症性疾病。强制性脊柱炎早期发病非常缓慢，许多患者无法察觉，到了后期，病情发展速度加快，短时间内就会造成驼背畸形、膝关节以及髋关节等产生强直，所以，强制性脊柱炎的早期诊断非常重要[1]。强制性脊柱炎属于风湿病的范畴，但是发病机制上尚未明确，临床上认为，血沉、C反应蛋白（CRP）以及人类白细胞抗原B27（HLA-B27）对强制性脊柱炎的产生有很大的影响作用。研究表明，血沉、CRP的水平变化可以作为强制性脊柱炎病情变化的反应指标，有效降低强制性脊柱炎患者的炎性情况，缓解患者的病情，HLA-B27的阳性率变化并不能作为强制性脊柱炎的诊断指标，但是可以增加强制性脊柱炎诊断的可能性[2]。为探究血沉、CRP以及HLA-B27对强制性脊柱炎诊断的作用，本文对HLA-B27、血沉、CRP诊断强制性脊柱炎的临床意义进行研究。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年11月-2017年3月在广东省东莞市第三人民医院诊断为强制性脊柱炎的患者60例为研究对象并作为观察组，选取我院同期健康体检者60例作为对照组。其中观察组男32例，女28例；年龄20岁-64岁，平均（39.6±4.8）岁，病程3年-6年，平均（4.6±0.6）年。强制性脊柱炎组男31例，女29例；年龄18岁-66岁，平均（37.9±4.2）岁；病程2年-7年，平均（4.4±0.8）年。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），可比性。患者对本研究知情同意并签署知情同意书，本研究经我院伦理委员会批准。纳入标准：①患者晨僵、腰痛的症状超过3个月，并且通过休息并无缓解；②患者的胸廓活动范围比同年龄的健康人小（健康人的扩胸运动≥180°，患有强直性脊柱炎的扩胸运动＜160°）；③患者在前屈、后屈以及侧屈方向上具有活动受阻的症状[3]，例如：行走、向前屈身、弯腰等。排除标准：①患有肿瘤疾病者；②患有风湿性免疫系统疾病者；③患有甲状旁腺功能亢进者[4]。

1.2 方法 清晨抽取强制性脊柱炎组患者和对照组体检者空腹肘部静脉血2 mL，并将采取的静脉血置入真空管和血常规抗凝管内。

1.2.1 血沉的检测 以3,000 r/min的速度对采集的静脉血进行10 min的离心分离，分离完成后，将血清吸去，用Westergren法检测上清液（正常范围为女性0-22 mm/ h，男性0-15 mm/h）。

1.2.2 HLA-B27的检测 6 h内对患者实施行荧光抗体染色，将15 μg的荧光抗体与25 μg的抗凝全血进行彻底混合，并置于暗处室温进行30 min的孵育，随后加入2 mL的溶血素迅速混合均匀，再在暗处进行10 min的孵育，接着以速度2,000 r/min进行离心分离5 min，将血清吸去，并加入2 mL、pH 7.8的磷酸盐酸进行洗涤，HLA-B27直标单克隆抗体以及溶血素由美国Becton-Dickinson（BD）公司提供，所采用的仪器为BD公司的FCSCalibur流式细胞仪。

1.2.3 CRP的检测 各抽取强直性脊柱炎组患者和对照组体检者空腹肘部静脉血2 mL置入真空管内，进行分离后，取上清液，并用免疫浊度分析法进行检测（＜10 mg/L为正常），所采用的仪器为美国Beck-man-Coulter公司的Immage 800双光径免疫浊度分析仪，所有试剂均由美国贝克曼公司提供。

1.3 观察标准及疗效判定 比较两组血沉、CPR水平、HLA-B27阳性率、心电图异常率及X线改变率。

强制性脊柱炎患者的疗效诊断标准：疾病活动情况运用Cowling法进行检测。疾病活动情况分为3个水平，包括活动、可疑活动、静止。活动的标准：前4周患者晨僵、腰疼以及关节痛的情况加重，需要增加抗炎药的用量；可疑活动的标准：患者出现持续晨僵、腰痛的现象，需要坚持服用抗炎药；静止的标准：患者没有或出现很少的症状，不需要服用或者需要服用少量的抗炎药[5]。

1.4 统计学方法 采用SPSS 18.0对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（Mean±SD）表示，采用t检验。计数资料采用率（%）表示，采用卡方检验。采用直线回归模型对强制性脊柱炎进行单因素分析，采用多因素Logistic回归模型进行多因素分析。以以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 强制性脊柱炎单因素分析 Cowling检测中，强制性脊柱炎组活动、可疑发生率高于对照组，静止发生率低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。强制性脊柱炎组血沉、CRP水平、HLA-B27的阳性率、心电图异常率及X线改变率均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 强制性脊柱炎与各项指标多因素分析情况以及ROC曲线的检测结果 从多因素分析强制性脊柱炎与各项指标的情况来看，血沉和CRP水平对强制性脊柱炎的发生密切相关，从敏感性和特异性分析看，虽然HLA-B27的敏感度和特异性均较高，但是HLA-B27的阳性率指标并不能成为强制性脊柱炎疾病的诊断标准，由此得出，血沉和CRP可以作为强制性脊柱炎的诊断指标。见表2、3。

3 讨论

强直性脊柱炎在初期时发生于16岁-25岁的青年，尤其是男性青年较多，强直性脊柱炎的起病原因一般比较隐匿，不容易被发现，初期时一般没有任何临床表现，部分患者会出现乏力、厌食或者低热、贫血等轻微症状[6]。由于强直性脊柱炎在早期的病情较轻，大多数患者很难做到及时发现并进行治疗，故导致病情逐渐加重，使其失去了最佳的治疗时间。强制性脊柱炎中期时大多数患者的关节会发生病变[7]，首先发生病变的关节一般是骶髂，以后慢慢发展到颈椎，并且会出现持续的腰痛和僵硬感，出现的关节病变一般有骶髂关节炎、腰椎病变、胸椎病变以及颈椎病变和周围关节病变[7]，同时，也会诱发一些关节外病变现象，如心脏病变、神经系统病变以及肾和前列腺病变、耳部、肺部病变等[8]。临床上对于强制性脊柱炎的检查一般采用电子计算机断层扫描、磁共振和单光子发射计算机断层扫描以及实验室检查和X线检查等方法，通过诊断和检查一般会有腰骶关节劳损、结核性脊椎炎、肠病性关节炎以及反应性关节炎等强制性脊柱炎诊断类别[9]。现在临床上对于强制性脊柱炎的治疗常采用控制治疗方法、体疗、物理治疗和药物治疗以及手术治疗，控制治疗一般从患者的家属入手，让他们了解该病的性质和大致的病程以及干预措施，增强患者抗病的信心和耐心，并且要注意维持患者正常的姿势和活动能力等[10]；体疗是对患者采取针对性的体育治疗，保持患者的脊柱生理弯曲，并且防止骨质疏松和肌肉性萎缩；物理治疗是用热疗、矿泉温泉浴和水盆浴等进行治疗，有利于增加血液的循环[11]；药物治疗一般给予患者非甾体类抗炎药、肾上腺皮质激素等药物进行服用。本研究通过对强制性脊柱炎患者和健康者血清中血沉、CRP以及HLA-B27的检测，对HLA-B27、血沉、CRP诊断强直性脊柱炎的临床意义进行了探究。

强制性脊柱炎患者全部都存在骶髂关节炎症以及其他类型的关节炎症，由肝脏合并形成的CRP在炎性反应中直接参与了其中的反应过程，并且强制性脊柱炎患者的CRP水平较正常人群来看，明显高于健康人群的水平，特别是在强制性脊柱炎的活动期，血清中的CRP水平会出现显著升高[12]。强制性脊柱炎患者血清中CRP水平的明显升高，提示强制性脊柱炎患者的体液免疫系统功能发生了改变。CRP是存在于急性强制性脊柱炎时期的一种反应蛋白，它可以作为炎症组织损伤程度的参考指标，CRP在急性时期的生理应激作用比较明显，可以将免疫复合物进行清除，通过与补体Clq的结合可以激活补体，并且通过FCγ受体的结合介导吞噬细胞对免疫复合物以及凋亡的细胞碎片进行清除，对单核细胞表面存在的细胞因子等进行刺激，从而导致血清中的CRP水平升高[13]。同时，强制性脊柱炎患者急性炎症发生时，血清中的炎性因子明显增多，导致了血沉的上升速度明显加快[14]。血沉对于强制性脊柱炎患者的诊断虽然拥有较低的特异性，但是血清中血沉的明显升高可以间接地反映出有炎症和组织损伤的存在，并且通过相关性分析可以得出，血沉的上升速度和升高的程度与组织的损伤程度和炎症程度呈正相关，故血沉可以作为检测疾病活动情况的指标[15]。HLA-B27基因位于人类第6号染色体的短臂上，是人类分子B位点的等位基因，在临床上，人们早已经发现了JHLA-B27抗原与强制性脊柱炎的发生情况具有高度的相关性，并且大多数强制性脊柱炎患者的HLA-B27的抗原表达为阳性[15]。近年来，许多医学领域的研究者对HLA-B27抗原和强制性脊柱炎的相关性进行了研究，并表明强制性脊柱炎的发生与HLA-B27抗原的表达有着明显的相关性[17]。在本研究中，强制性脊柱炎患者HLA-B27阳性率为76.67%，而为健康人群的对照组中HLA-B27的阳性率为0%，因此，HLA-B27抗原对强直性脊柱炎的诊断和鉴别具有重要的辅助作用[18]。通过Cowling法检测以及CRP检测和HLA-B27、血沉检测得出强制性脊柱炎组患者在静止、活动、可疑活动以及血沉和CRP水平、心电图的异常率和X线片的改变率均高于健康人群（P＜0.05），因此，影响强制性脊柱炎的因素有血沉、CRP以及HLA-B27。

HLA-B27的抗原具有高度的多形性，但是，当HLA中B27抗原呈现出阳性时，只有3%左右的患者会发展为强制性脊柱炎[19]，HLA-B27抗原呈现为阳性的人群是强制性脊柱炎的易感人群，但是阳性患者并未出现发病的情况，因此在人群中并不能将HLA-B27阳性作为强制性脊柱炎的诊断标准[20]。从单因素和多因素对强制性脊柱炎的分析来看，患者的病情活动、心电图异常率以及X线片改变率对强制性脊柱炎的发生无影响作用（P＞0.05），从单因素和多因素对血沉、CRP、HLA-B27的情况分析来看，CRP水平和血沉与强制性脊柱炎的发生相关性强。综上所述，血沉、CRP的水平变化可以作为强制性脊柱炎病情情况的反应指标，与强制性脊柱炎的病情活动密切相关。尽管HLA-B27具有较高的特异性和敏感性，以增加强制性脊柱炎的诊断的可能性，但是HLA-B27的阳性率变化并不能成为强制性脊柱炎的诊断标准，在临床治疗中有效的降低强制性脊柱炎的炎症情况，对于改善患者的病情有很大帮助。

表1 两组疾病活动情况、血生化指标、心电图、X线情况比较

表2 强制性脊柱炎与各项指标多因素分析

表3 各相关指标ROC曲线