南通市通州区 猪圆环病毒2型感染流行病学调查

吴锋/江苏省南通市通州区畜牧兽医站

猪圆环病毒由国外学者Tischer在1974年首次发现，是目前已知最小的哺乳动物病毒，该病毒分为PCV1和PCV2两种血清型。PCV1在世界范围猪场中广泛存在，但对猪无致病性，不会引起临床症状，而PCV2可引起断奶仔猪多系统衰落综合征、猪繁殖障碍、猪皮炎和肾炎综合征等多种猪圆环病毒相关疾病，PCV2于2001年在我国首次分离，迄今为止仍呈散发及地方性流行，对国内养猪业造成了巨大的经济损失。

一、材料和方法

1.病料采集。2016年10月至2018年3月，在南通市通州区东社、十总、兴仁、石港、刘桥、平潮6个乡镇的10个中小型猪场采集疑似发病和病死猪的肝、脾、肺、淋巴结、血液等病料62份，冷冻运输至实验室，剪取小块组织加入1 mL PBS溶液后充分研磨，反复冻融3次后，冻存于-80℃冰箱中备用。

2.病毒核酸提取。按照TaKaRa MiniBEST Viral DNA Extraction Kit操作说明，从处理好的研磨组织及血液中提取病毒DNA，DNA直接作为模板进行PCV2的PCR检测。

3. PCR检测。以上述提取的DNA作为模板，利用针对PCV2 ORF2的特异性引物（表1）进行PCR鉴定，反应条件为：94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸45s，共30个循环，4℃保温。反应结束后取10μL样品进行琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像仪中观察结果。

表1 PCV2的检测引物

二、结果与分析

1.临床症状观察。在南通市通州区6个乡镇共10个疑似发病的猪场采集病料，其中有8个猪场出现疑似PCV2感染症状，包括母猪流产、断奶仔猪多系统衰落综合征（PMWS）、喘气等。

2.PCR鉴定。将采集病料提取DNA后，利用PCR鉴定PCV2感染情况，结果显示（图1），阳性对照能够扩增出预期大小（373bp）片段，阴性对照无目的条带，62份待检样品中有41份为PCV2检测阳性（表2）。

图1 PCV2的PCR检测结果

3.流行病学调查结果统计与分析。对疑似发病的10个猪场中采集的62份病料进行PCR检测，检测结果见表2，PCV2阳性率为66.1%，说明该地区中小型猪场的PCV2感染率较高。

表2

三、讨论

PMWS自1991年在加拿大首次报道以来，陆续在世界范围内发生，PCV2是引起该病的主要病原，中国于2001年首次分离到该病毒，此后不断蔓延，迄今已成为国内养猪业的最重要病原之一。本研究中，疑似出现PCV2感染的病猪临床症状表现为典型的PMWS（包括食欲下降，消瘦，腹泻，腹股沟淋巴结肿大），呼吸症状（喘气，咳嗽，呼吸困难），流产等，与此前报导的PCV2的临床症状基本符合，随后通过PCR鉴定进一步验证了该症状病因为PCV2感染。

PCV2主要感染猪的免疫系统，引起免疫抑制，从而继发其他病原的感染，对养猪业造成巨大危害，本研究结果显示，该地区PCV2感染率较高，有继发其他病原的风险，加强猪圆环病毒病的监测和防控，对该地区养猪业的健康发展有着重要意义。

参考文献（略）