支气管肺泡灌洗液及血清中肿瘤标志物在肺癌诊断中的临床应用

杨昌恒 庹必英 廖江荣

肺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一，病死率在各类肿瘤中居首位[1]。我国社会人口老龄化加剧，加之吸烟、大气污染等因素的影响，以及因肺癌早期症状不明显，患者就诊晚，往往错过最佳诊断及治疗时机，致使肺癌的发病率及病死率均呈上升趋势。提高肺癌生存期的关键是早期诊断，肿瘤标志物检测是实现肺癌早期诊断的重要途径[2-3]。目前已对肺癌患者支气管肺泡灌洗液癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)、细胞角蛋19片段CYFRA21-1、神经特异性烯醇化酶(neurospecific enolase,NSE)等临床经典肿瘤标志物进行研究，认为检测敏感性均高于血清学检测并在临床上广泛应用，对肺癌具有辅助诊断作用[4-5]。本文分析比较了支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)与血清中热休克蛋白(HSP90α)、几丁质酶3样蛋白1(CH I3L1)、CEA三种肿瘤标志物，现报道如下。

对象与方法

一、研究对象

选择2016年5月至2017年9月在我院呼吸疾病治疗中心住院患者84例，其中，观察组为经组织病理诊断肺癌42例，男性28例，女性14例，年龄45～76岁，包括鳞癌24例， 腺磷癌4，腺癌9例，小细胞癌5例。对照组为同期住院的肺部良性疾病患者42例，男性24例，女性18例，年龄41～79岁，包括肺结核8例、尘肺6例、支气管扩张5例、慢性阻塞性肺疾病20例，社区获得性肺炎3例。

二、研究方法

支气管肺泡灌洗液收集：术前交代患者检查目的、注意事项并签署纤维支气管镜检查同意书，于内镜室以2%利多卡因5 ml采用高流量氧气雾化吸入进行局部麻醉，两组患者均予以OLYMPUS BF-1TQ290电子支气管镜经鼻插入，常规检查左右支气管，并根据患者胸部CT显示的病变部位，将纤维支气管镜远端楔于病变所在的段支气管开口处，弥漫病变则冲洗右中叶或左舌叶，注入37摄氏度温生理盐水，20 ml/次，灌洗2次，以13 kp负压尽可能吸引尽灌洗液，收集约30 ml BALF，送本院中心实验室无菌纱布过滤后4 ℃下以离心半径8 cm，1 200 r/min离心10 min，取上清液5 ml检测。血清标本：清晨取患者空腹静脉血4 ml，测定血清CEA。

按照上海润裕生物科技有限公司提供的试剂盒说明书步骤进行操作，采用酶联免疫分析法分别检测两组患者BALF及血清中热休克蛋白(HSP90α)、几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)。CEA检测试剂盒原装进口，由上海贝克曼库尔特商贸有限公司提供,并严格遵照说明书进行检测。

三、统计学方法

结 果

BALF中三种肿瘤标志物HSP90α、CH I3L1、CEA含量，观察组显著高于对照组，组间比较有统计学差异(P<0.01)，见表1。

表1 两组患者BALF中三种肿瘤标志物的比较

两组患者血清中三种肿瘤标志物HSP90α、CHI3L1、CEA含量比较无统计学意义(P>0.01)，见表2。

表2 两组患者血清中三种肿瘤标志物的比较

讨 论

目前，电子纤维支气管镜已成为诊断中央型肺癌的主要工具[6]。周围型肺癌经皮肺穿刺可获得理想病理组织，但由于患者自身存在肺大泡、慢性阻塞性肺疾病以及肿块临近肺门而受到技术限制。因而进行肿瘤标志物的检测是实现肺癌早期诊断，提高生存率的重要途径[7]。

肿瘤标志物是肿瘤细胞在发生、发展过程种中分泌、产生的一些化学活性物质，而且可通过肿瘤细胞分泌、释放于体液中，其实质反映了肿瘤的自身存在[8]。研究认为，BALF中肿瘤标志物出现早、浓度高，是因为肺癌细胞分泌及代谢物首先进入支气管肺泡，后进入血循坏的缘故[9]。因此检测BALF中肿瘤标志物含量可以辅助肺癌的诊断[10]。林其昌等[11]认为采用BALF技术是从原发灶获取标本，其诊断效能必然高于血清标本；检测BALF中CEA、NSE、CYFRA21-1、磷状细胞癌相关抗原(squamous cell carcinoma antigen, SCC-Ag)对肺癌的诊断优于血清[12]；Ghosh等[13]对90例患者BALF及血清肿瘤标志物进行对照研究，也证实了肺癌患者BALF中的CA-125、CA-153、CA-199水平高于血清。然而，联合检测肺癌患者BALF中HSP90α、CHI3L、CEA这三种肿瘤标志物对肺癌诊断价值的研究较少。

清华大学罗永章研究组在国际上首次发布热休克蛋白90α为一个全新的肺癌标志物，HSP90α是热休克蛋白中的一种，其对细胞突变具有重要缓冲作用，具有在肿瘤细胞中高表达且与体内致癌物质结合的特点，从而导致体内大量积聚致癌物质，为肿瘤发生、发展提供基础。Libreros等[14]研究表明，CHI3L1是一种由巨噬细胞、软骨及某些肿瘤细胞分泌的糖蛋白，其主要参与炎症及组织重塑。Yan等[15]实验表明小鼠肺癌BALF及血清中CHI3L1含量显著高于正常组小鼠，可作为检测肺癌的标志物。CEA是一种胚胎性蛋白，属于非特异性肿瘤相关抗原，存在于多种癌组织中，其实质是腺癌标志物，对肺癌的诊断价值早为临床应用。本研究结果显示，肺癌患者BALF中HSP90a、CHI3L1、CEA浓度显著高于肺部良性病变患者，而两组患者血清标本检测结果差异无统计学意义，进一步佐证了BALF标本肿瘤标志物检测比血清标本更为敏感。研究发现CEA在肺癌组和肺部良性病变组血清标本升高水平无统计学差异，与凌丽[16]的研究结果不一致，笔者考虑可能与肺癌分期、检测试剂盒及方法等有关系，但结果也进一步表明CEA特异性、敏感性不高，不能作为肺癌诊断及筛查的指标。

综上所述，肿瘤标志物尽管不是诊断肺癌的金标准，但检测BALF中肿瘤标志物HSP90a、CHI3L1、CEA的敏感性优于检测血清标本，联合检测有助于提高肺癌诊断率，对基层医院医生有重要参考价值，不失为一种有价值的、值得临床医生借鉴的补充诊断手段。

参 考 文 献

1 钱桂生. 肺癌不同病理类型发病率的变化情况及其原因[J/CD]. 中华肺部疾病杂志(电子版), 2011, 4(1): 1-5.

2 Buettner R, Heydt C. Biom arker analysis from a pathologist′s view . Founding the rationale for personalised treatm ent of lungcancer[J]. Bundesgesundheitsblatt Gesundheitsforschung G esundheitsschutz, 2013, 56(11): 1502-1508.

3 黄玉华, 陈彤, 刘丽华. 对肺癌及非肺癌患者进行支气管肺泡灌洗液、胸水、血清的癌胚抗原联合测定结果的观察[J]. 标记免疫分析与临床, 1997, 4(2): 99-101.

4 Dragomir A, Moldoveanu E, Mihaltan F. Update regarding the role of biom arkers in early diagnosis of non-small cell bronchopulm onary cancer[J]. Pneumologia, 2011, 60(1): 7,9-13.

5 李旸凯, 魏晟, 李晓蓉, 等. 术前外周血CYFRA21-1水平对非小细胞肺癌手术患者预后的影响[J]. 解放军医学杂志, 2014, 39(5): 406-410.

6 Gao L, Asmitanand T, Ren H, et al. Fiber-optic bronchoscope and detection of lung cancer: a five year study[J]. Neoplasma, 2012, 59(2): 201-206.

7 唐良法, 江莲, 吴晓东, 等. 支气管肺泡灌洗液癌胚抗原检测对周围型肺癌的诊断价值[J]. 临床肺科杂志, 2009, 14(7): 924-925.

8 Grunnet M , Sorensen JB. Carcinoem bryonic antigen (CEA) as tumor marker in lung cancer[J]. Lung Cancer, 2012, 76(2): 138- 143.

9 陈锐, 胡华成, 胡筠珠, 等. 支气管肺泡灌洗液中3种肿瘤标志物检测的临床价值[J]. 苏州大学学报(医学版), 2003, 23(3): 336-338.

10 钟定, 董临江, 刘喜林, 等. 哮喘、慢支和过敏性肺炎的支气管肺泡灌洗液细胞学分析[J]. 广西医科大学学报, 1998, 15(4): 1-3.

11 林其昌, 林晓, 陈公平, 等. 支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物联合检测诊断肺癌的研究[J]. 中国内镜杂志, 1999, 5(4): 3-5.

12 Li J, Chen P, Mao C M, et al. Evaluation of diagnostic value of four tumor markers in bronchoalveolar lavage fluid of peripheral lung cancer[J]. Asia Pac J Clin Oncol, 2014, 10(2): 141-148.

13 Ghosh I, Bhattacharjee D, Das A K, et al. Diagnostic Role of Tumour Markers CEA, CA15-3, CA19-9 and CA125 in Lung Cancer[J]. Indian J Clin Biochem, 2013, 28(1): 24-29.

14 Libreros S, Garcia-Areas R, Iragavarapu-Charyulu V. CHI3L1 plays a role in cancer through enhanced production of proinflam m atory/pro-tum origenic and angiogenic factors[J]. Im munol Res, 2013, 57(1/3): 99-105.

15 Yan C, Ding X, Wu L, et al. Stat3 downstream gene product chitinase 3-like 1 is a potential biomarker of inflammation-induced lung cancer in multiple mouse lung tumor models and humans[J]. PLoS One, 2013, 8(4): e61984.

16 凌丽. 血清及支气管肺泡灌洗液肿瘤标志物测定对肺癌的诊断意义[J]. 临床和实验医学杂志, 2009, 8(8): 13-14.