宝心宁胶囊对小鼠改善睡眠作用研究

李善姬，宋春梅，葛红娟，张洋婷，刘 敏，梁承武

(吉林医药学院，吉林 吉林 132013)

失眠症属于睡眠障碍的范畴，主要表现为入睡困难或早醒，常伴有睡眠不深与多梦。随着社会经济的发展，由于失眠、抑郁或焦虑等疾病的发生，可严重影响人们的正常生活、工作和学习，并能加重或诱发其他心脑血管方面的疾病，增加社会和家庭的负担，因此开发具有防治失眠症或能改善睡眠质量的新药具有重要意义。针对失眠的药物治疗在改善睡眠的同时容易影响正常生理睡眠，以及清醒后存在药物延续作用。此外，药物治疗失眠症常引起药物依赖、耐受等不良反应，因此该类药物多按照“按需用药”和“间断性用药”的原则使用。而中医药治疗失眠，因其不良反应小以及依赖性轻，具有一定优势[1-2]。

宝心宁胶囊为拟研制开发的具有滋阴养血、宁心安神、安神镇静作用，用于失眠症的中药复方新药，由酸枣仁、琥珀、珍珠母、黄芩、栀子和冰片组成[3]，具有镇静安神，清热泻火之效，适用于治疗心火扰动、熄风定眩以及神志不安所致的眩晕和失眠症[4-7]。为探索其疗效机理，本研究探讨宝心宁胶囊对小鼠睡眠的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

清洁级昆明小鼠，雌雄各半，体重(20±2)g。动物合格证号：SCXK-(吉)2011-0004，购于长春市亿斯实验动物技术有限责任公司。

宝心宁胶囊，规格：0.3 g/粒，批号：20170201，由长春中医药大学植物化学研究中心提供。地西泮片，规格：2.5 mg/片，批号：1611014，天津力生制药股份有限公司产品。戊巴比妥钠，规格：500 mg/瓶，批号：WXBB6772V，美国Sigma公司产品。

多功能小鼠自主活动记录仪，型号：YLS-1A，山东省社会科学院设备站产品；大小鼠转棒仪，型号：DXP-2，中国医学科学院药物研究所产品。

1.2 宝心宁胶囊对戊巴比妥钠阈下剂量小鼠睡眠率的影响

50只昆明小鼠适应性饲养3 d后，按体重随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组,阳性对照组(地西泮片10 mg/kg)组,宝心宁胶囊高、中、低(1800、900、450 mg/kg)给药剂量组。给药组灌胃不同浓度的宝心宁混悬液，1次/d，20 mL/kg，连续给药1周，对照组给予等容量蒸馏水灌胃。实验期间每2天称量体重1次，正常摄食饮水。通过预实验确定戊巴比妥钠阈下催眠剂量80%～90%小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥钠最大阈下剂量为32 mg/kg。选择接近药物达峰浓度的平均时间，即给动物灌胃超纯水1 h后，腹腔注射戊巴比妥钠，记录15 min内入睡动物数(翻正反射消失达1 min以上者)，进行协同睡眠测定。比较对照组与不同剂量给药实验组入睡动物数之间的差异。组间显著性统计处理方法采用χ2检验。

1.3 宝心宁胶囊对戊巴比妥钠阈上剂量小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响

将50只昆明小鼠适应性饲养3 d后，分组及给药同“1.2”。

选择戊巴比妥钠剂量。给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠，30 min内小鼠翻正反射消失达到1 min以上者，说明其进入睡眠状态。试验前通过预试验确定使小鼠完全入睡，但又不使睡眠时间过长(≤10 min)的戊巴比妥钠的剂量为44 mg/kg。末次给药1 h按44 mg/kg剂量给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠溶液。记录戊巴比妥钠注射时间、小鼠入睡时间及睡眠结束时间，入睡时间与注射时间差计为睡眠潜伏期，睡眠结束时间与入睡时间差计为睡眠时间。给药组与对照组交替进行试验，观察被试药物和戊巴比妥钠联用对小鼠睡眠潜伏期及睡眠时间的作用。结果以平均数加减标准差表示，统计学处理方法采用组间t检验。

2 结 果

在戊巴比妥钠阈下剂量,空白对照组,阳性对照组组,宝心宁胶囊高、中、低小鼠睡眠动物数分别为0、10、8、7、5只。与对照组比较，宝心宁胶囊高、中两个剂量均有提高睡眠率的作用(P<0.01和P<0.05)，均与戊巴比妥钠产生协同作用。

与对照组比较，宝心宁胶囊3个给药剂量组均能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间，明显加快小鼠入睡时间(P<0.01和P<0.05)，结果见表1。

表 1 宝心宁胶囊对小鼠睡眠发生率的影响(n=10,min)

与空白对照组比较：*P<0.05，**P<0.01

3 讨 论

头痛发作时患者多伴有烦躁、失眠、焦虑、紧张等中枢神经系统兴奋的症状。此时，将病人安置在环境柔和安静的房间里，并给予适量的镇静催眠药物，使病人保持适度的睡眠，即可有效缓解其急性期症状。因此，在研究抗偏头痛药物中方剂的镇静催眠作用是不可缺少的。戊巴比妥钠是临床已知的常用中枢镇静药物，本实验选用此药物作为已知药物，观察被测药物即宝心宁胶囊与戊巴比妥钠是否有协同作用。即用药后动物是否出现闭目、低头、俯卧、自发活动受抑制等表现；用药后是否具有对抗中枢神经兴奋作用，增强中枢神经抑制药的催眠作用[8-9]。

本实验中，通过预实验确定80%～90%小鼠翻正反射不消失的戊巴比妥钠最大阈下剂量为32 mg/kg。对照组小鼠注射戊巴比妥钠后仅以闭目、低头、俯卧、自发活动受抑制等表现为主，未出现翻正反射消失。且在注射药物30 min后均恢复正常。高、中、低剂量组小鼠均出现了闭目、低头、俯卧、自发活动受抑制的表现，其中高剂量组小鼠有8只翻正反射消失，中剂量组有7只翻正反射消失，低剂量组有5只翻正反射消失。与对照组比较P<0.01和P<0.05，给予宝心宁胶囊后，宝心宁胶囊高、中两个剂量均有提高睡眠率的作用，均与戊巴比妥钠产生协同作用。

本研究通过观察宝心宁胶囊对阈上剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠时间、睡眠潜伏期的影响，评价宝心宁胶囊对小鼠的催眠作用，并与地西泮进行了对照。结果表明，宝心宁胶囊3个给药剂量均能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间，明显加快小鼠入睡时间，提示宝心宁胶囊对戊巴比妥钠有协同的催眠作用，具有良好的镇静、催眠作用。

以酸枣仁、琥珀、珍珠母、黄芩、栀子和冰片诸多药物配伍的宝心宁胶囊，拟研制开发为具有滋阴养血、宁心安神、安神镇静作用新药,适用于治疗心火扰动以及神志不安所致的眩晕和失眠症。实验表明：宝心宁胶囊可明显提高睡眠率的作用，延长阈上剂量戊巴比妥钠小鼠的睡眠时间，明显加快小鼠入睡时间。显示宝心宁胶囊具有改善小鼠睡眠作用。

参考文献：

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[2] 肖成荣，马增春，李海静，等.PCPA失眠大鼠模型的制作及其机制[J].毒理学杂志,2007，21(4)：326.

[3] 程晓英,王苗苗,赵明会.高效液相色谱法测定宝心宁片中栀子苷的含量[J].世界最新医学信息文摘,2016,16(A4):218-219.

[4] 王旭东，王亚丽，戴体俊，等.地西泮对小鼠自主活动和学习记忆功能的影响[J].中国临床药理学与治疗学，2008,13(4)：374-377.

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