软枣猕猴桃生根培养研究

孟怡君

(丹东市青山保护局，辽宁 丹东 118000)

软枣猕猴桃(Actinidiaarguta)为猕猴桃科猕猴桃属多年生落叶藤本植物，其营养丰富，成熟果实中的多糖、VC、黄酮及微量元素等含量均远高于中华猕猴桃，是东北山区优良的经济野果[1]。近年来，经过不断人工驯化和栽培，辽宁东部地区筛选出一系列软枣猕猴桃优良品种，其风味独特、口感佳、营养丰富、食(药)用价值极高[2]。目前，软枣猕猴桃的传统繁育方式主要为扦插和嫁接。由于软枣猕猴桃存在一些野生习性，因此存在繁苗速度相对较慢、有些优良品种母株性状难以保持且植株易带菌及苗木成活率低的问题。开展软枣猕猴桃组培工厂化育苗不仅可以缩短繁苗周期，降低育苗成本，提高苗木成活率，减少植株带菌，而且还可以保持母株优良性状，解决品种退化的问题。在组培过程中，组培苗生根的优劣直接影响苗木移栽后的成活率，因此，本文就软枣猕猴桃的生根培养基及激素选择进行了研究，旨在为今后软枣猕猴桃良种推广及应用提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料取自丹东市宽甸软枣猕猴桃种植园，剪取2～3年生幼嫩枝条，带回实验室水培催芽20 d，取萌发的幼嫩茎段为外植体进行诱导培养及增殖培养。诱导培养基为MS+1.0 mgL-16-BA+0.2 mgL-1NAA；增殖培养基为MS+1.5 mgL-16-BA+0.5 mgL-1NAA。

1.2 生根培养基的筛选

1.2.1 基本培养基的选择 用继代培养所得的组培苗进行生根培养，将 4.0 cm 左右的健壮苗分别转接到不同无机盐浓度(MS、1/2MS、1/3MS、1/4MS)的生根培养基中，进行生根培养。每种处理 30 个，重复 3 次，30 d 观察生根情况。

1.2.2 激素的选择 确定最佳的无机盐浓度基本生根培养后，向该培养基中分别加入不同浓度的 IBA(0.2、0.4、0.6 mgL-1)、NAA(0.2、0.4、0.6 mgL-1)进行生根培养，以不添加生长调节剂的基本培养基为对照，每种处理 30 个，重复 3 次，30 d 观察组培苗的生根及生长情况，统计平均根长，平均生根数及生根率[3]。培养环境条件：培养温度为25±2 ℃，空气相对湿度50%～60%，光照时间14 hd-1，光强为2 000～3 000 lx。

1.2.3 炼苗驯化 将生根后的组培苗移到温室里进行炼苗，遮阴，温度不超过28 ℃，湿度控制在70%～80% ，基质为珍珠岩∶草炭土∶细河沙=1∶1∶1，使用前用多菌灵对基质进行消毒[4]。

2 结果与分析

2.1 基本培养基对组培苗生根的影响

将健壮待生根的组培苗分别接种到 MS、1/2MS、1/3MS、1/4MS 的生根培养基中，生根情况见表1。由表1可知，在接入 MS 培养基中生根率较低，为66.26%，根纤细。当接入 1/3MS和 1/4MS 培养基中，由于基本培养基中无机盐的浓度较低，营养成分不足，根纤细，且颜色为黄褐色，1/4MS培养基中部分有愈伤组织出现。当基本培养基为1/2MS 时，生根率最高达到78.76%，平均根数不是最高，但平均根长最长。

表1 不同基本培养基对生根培养的影响

2.2 不同激素浓度对生根的影响

为使组培苗生根健壮，根系发达，又进一步添加了植物外源激素对软枣猕猴桃组培苗进行生根培养。以筛选出的 1/2MS 为基本培养基，分别添加不同浓度的 NAA 和 IBA，培养30 d后统计生根情况，见表2。由表 2可知，添加IBA激素的生根情况总体要好于NAA，使用NAA时， 0.4 mgL-1浓度时生根率较好，但随着 NAA 浓度的增加，平均生根数降低，并在茎基部与根之间会出现愈伤组织，见图1。使用IBA生根时，平均生根数随激素浓度的增加而增加， 0.4 mgL-1IBA 的生根率和平均根长均达到最高，根粗壮，组培苗长势较好，因此，综合考虑，最适合软枣猕猴桃生根培养基为1/2MS+0.4 mgL-1IBA。

表2 不同浓度IBA和NAA对生根培养的影响

图1 NAA处理下的生根情况

图2 IBA处理下的生根情况

2.3 炼苗

本试验以消毒杀菌后的细河沙为炼苗基质，移栽后用塑料薄膜覆盖，并保持湿度在70%左右，温度保持在20～26 ℃，待40～50 d后，组培苗的毛细根系长7～10 cm，转移至配好基质的营养钵中继续生长，温室内保持湿度60%～80%，苗木移栽成活率可以达到80%。

3 结论与讨论

对软枣猕猴桃组培中生根培养情况进行了研究，筛选出最佳生根培养基为1/2MS+0.4 mgL-1IBA，移栽后成活率可以达到80%。无机盐浓度以及激素种类和浓度影响组培苗的生根[5]。研究表明，1/2MS培养基生根率和根的生长状态比其他无机盐浓度效果要好，这与曹明颜等研究的研究结果一致[6]。在1/3MS和1/4MS生根培养基中，由于无机盐浓度较低，因此营养成分不足，会造成根系长势弱，并伴有愈伤组织出现。

添加不同浓度的植物激素NAA 和 IBA 应用效果表明，在单独添加NAA 的培养基中，组培苗的生根状态比添加IBA长势稍弱，根系短、易断，因此不适合在软枣猕猴桃生根培养中单独使用；当单独使用IBA 时，生根较好，组培苗长势健壮。使用NAA和IBA的培养基中，随着 NAA和IBA 浓度的增加，根系生长质量呈下降趋势，这可能是由于当生长素水平过高时，根径切口处容易产生大量的愈伤组织有关[7]。对于NAA和IBA组合使用对生根培养的影响，有待于今后进一步研究。

参考文献：

[1] 祝儒刚,孙艳頔,陈罡,等.软枣猕猴桃与中华猕猴桃功能成分比较研究[J].辽宁大学学报:自然科学版,2107,44(1):59-64

[2] 汪建亚,河野耕藏.猕猴桃组织培养及繁殖能力的研究[J].林业科学研究,1998(2):12-16

[3] 邓践.软枣猕猴桃“龙成2号”组培扩繁技术研究[J].辽宁林业科技,2017(2):38-40

[4] 谢志兵,鲁旭东.猕猴桃组织培养中适宜激素组合的筛选[J].北方果树,2003(3):7-8

[5] 刘延吉,郝桂杰,姜岩岩,等.不同品种野生软枣猕猴桃最佳组培方法的研究[J].北方园艺,2012(17):124-126

[6] 曹明颜.大丽花离体快繁和再生体系的建立[D].保定：河北农业大学,2012

[7] 李桂君,宋嘉隆,吴捷.葛枣猕猴桃组培繁殖的研究[C]//中国生物产业大会2010海峡两岸重大生物技术产业化论坛会刊,2010:216-217