古城区七河镇家畜血吸虫病监测及现状分析

丽江市古城区七河镇农业综合服务中心 674102

和俊芳 李芒种 和云涛 和育文 云南省丽江市古城区七河镇畜牧兽医站 674102

七河镇地处古城区南部，距古城22km，南与鹤庆县交界，共有11个村民委员会，总人口为21426人、5079户，耕地面积18929亩，耕牛3123头。1954年确定为血吸虫病流行区，11个村民委员会中有5个行政村流行血吸虫病，历史累计钉螺面积4895亩，累计查出病牛694头，是古城区血吸虫病的重流行区。

1 家畜（牛）检测的范围

七河镇血吸虫病流行的行政村包括五峰行政村、三义行政村、七河行政村、新民行政村和共和行政村。

2 病原学诊断（粪便毛蚴孵化法）

（1）材料准备。pH为6.8～7.2无水虫和无化学物质污染（包括氯气）的澄清水，否则需作如下处理：有氯气的自来水应在盛器中存放8h以上。河水、池水、井水、雨水等混有水虫的水加温至60℃，冷却后再用。或在50L水中加含30%有效氯的漂白粉350mg，搅匀，放置20h，待氯气逸尽；也可在放漂白粉后加入硫代硫酸钠0.2～0.4g脱氯0.5h后再用。对浑浊的水，于每50L水中加明矾3～5g，充分搅拌，待水澄清后用。

器材、试剂。竹筷、40～80目的铜筛滤杯、260目的尼龙筛兜、500mL量杯、粪桶、放大镜、显微镜、吸管、载玻片、盖玻片、取暖炉、水温计、盆、水缸、水桶、剪刀、闹钟、天平、300～500L长颈平底烧瓶或 200～250mL三角烧瓶、脱脂棉。

送粪卡。包括村名、组名、饲养员或畜主姓名、畜别、畜名或畜号、性别、年龄、有无孕、采粪日期。

孵育室 （箱）。室温低于20℃时需要有设备保持20～25℃的环境条件，如有温箱或有取暖设备的房间。

（2）操作方法。采粪和送检。采粪季节宜于春秋两季，其次是夏季，不宜于冬季。采粪最好于清晨从家畜直肠中采取，或新排出的粪便。采粪量为牛、马属200g，猪 100g，羊和犬粪（农家）40g，每份粪样需附上填好的送粪卡，于采粪当天送到检验室。

①洗粪和孵化。将每头家畜的粪便分成3份，每份粪量牛、马50g，猪 20g，羊、犬 10g，然后根据实际情况选用下列一种方法进一步操作。

②尼龙兜淘洗孵化法。粪便在40目铜筛和量杯中用清水淘洗，细粪渣存于500mL量杯中，待沉淀后去上清液，沉渣倒入尼龙兜用水淘洗，把尼龙兜中的粪渣装入三角烧瓶或长颈平底烧瓶中加25℃清水，为了便于观察毛蚴，在瓶颈下1/2处加一块2～3cm厚的脱脂棉，再加清水至瓶口。

③塑料杯顶管法。置粪于铜筛量杯中加水充分淘洗，弃去粪筛量杯中的上层水，倒去2/3，加25℃清水，盖上中间有孔的塑料盖再加满25℃清水，再将盛满水的试管口塞一块2～3cm厚的脱脂棉，倒插入塑料盖孔中。

④孵育。将上述两种方法装好的三角烧瓶、长颈烧瓶或塑料杯放于20～25℃的箱（室）中，在一定的光照（日光或灯光）条件下进行孵育。从孵育开始到1、3、5h后各观察一次，尾蚴多数在水面下2mm范围内呈直线运动。发现血吸虫毛蚴即判定为阳性。血吸虫毛蚴肉眼观察为针尖大小、灰白色、梭形、折光强和水中其他小虫不同之处是在近水面作水平或斜向直线运动。当用肉眼观察难与水中的其他小虫相区别时，可用滴管将毛蚴吸出，置显微镜下可见毛蚴前部宽，前段中间有个顶突，两侧对称，后渐窄，周身有纤毛则可判为血吸虫毛蚴。在一个样品中有1～5个毛蚴为+，6～10个毛蚴为++，11～20个毛蚴为+++，21个毛蚴以上为++++。以判断、统计血吸虫病感染的强度。

3 家畜血吸虫病血清学诊断（间接血凝试验）

（1）材料准备。器材。V型微孔有机玻璃血凝板（孔底角 90°），25μl定量移液器、滴管、可插针头的滴管或1～2mL注射器、12号针头；生理盐水、蒸馏水；诊断液和阴、阳性血清，按说明书处理和保藏。

（2）操作方法。用滴管滴4滴生理盐水于血凝板左边第1孔内，用同一滴管加入被检血清1滴，使血清成5倍稀释。用带12号针头滴管或移液管在左边第2、3孔中各加生理盐水1滴（25μl）。用移液器将第1孔血清混匀，混匀方法是反复吸吹3次，然后吸25μl已混匀液加入右边邻孔中，此孔血清成1∶10稀释。用移液器混匀第2孔血清，吸取25μl加入第3孔中，此时该孔血清成1∶20稀释。用移液器混匀第3孔血清，吸取25μl丢弃。每份被检血清和阳、阴性血清按同样方法用3个孔，也可不用阴性血清而设生理盐水对照孔，此时另取2个孔各加25μl生理盐水作空白对照。用带12号针头的滴管或移液管加入1∶10、1∶20血清稀释孔及空白对照孔各1滴诊断液，使诊断液和血清混匀，置20～37℃条件下 1～2h，等空白或阴性血清对照孔中血球全部沉于孔底中央，呈一圆形红点，且阳性血清两孔中血球没有全部沉入孔底中央，即无圆形红点或仅有很小的圆形红点即可判定结果。

（3）判定标准。红血球全部下沉到孔底中央，形成紧密红色圆点，周缘整齐为阴性（-）；红血球少量沉于孔底中央，形成一较阴性小的红色圆点，周围有少量凝集红血球为弱阳性（+）；红血球约半数沉于孔底中央，形成一更小红色圆点，周围有一层淡红色凝集红血球为阳性（++）；红血球均匀地分散于孔底，形成一淡红色薄层为强阳性（+++）。

（4）结果判定。以血清10倍和20倍稀释孔出现凝集现象时被检血清判为阳性。如阴性或生理盐水对照孔2h后红细胞沉淀图像不标准，说明生理盐水质量不合标准或血凝板孔未洗净，需检查原因重新操作。

4 检测结果

5年来对古城区七河镇5个血吸虫病流行行政村的家畜血吸虫病监测工作以村为单位，整村推进，100%检疫的策略进行，共采集600头耕牛血进行血检，均未发现阳性。共采集6000头耕牛进行粪检，均未发现阳性病牛。

表1 家畜防治及监测情况

5 讨论

七河镇于大理洲鹤庆县耕地交错分布，交通便利，双边经济贸易互为密切，畜牧交易频繁，七河镇5个血吸虫病流行的行政村都有钉螺残存点的存在，将使七河镇面临着血吸虫病疫情反弹的潜在威胁。2008年七河镇达到血吸虫病传播阻断的标准，虽然传播源被切断，但是由于受防治技术水平的制约，客观上存在的包括人畜和野生动物中少量传染源和残存钉螺，可能一时难于查出，它们还会逐渐发展和蔓延，导致疫情回升。在周边地区血吸虫病尚未完全控制和消灭的情况下，病人病畜等外来传染源和外来钉螺又输入到已经消灭血吸虫病地区的可能性，虽然七河镇已达到血吸虫病传播阻断的标准，还必须提高警惕，进行长时期的监测和巩固工作。否则，血吸虫病在一定范围内有可能将不可避免地再次发生。

6 存在的问题

（1）经费投入不足。要建立动物防疫经费投入机制，动物防疫、监测和治疗等经费还没有列入各级财政预算，特别是受政府主管领导对这项工作重视程度的影响，七河镇家畜血吸虫监测查治工作时断时续。

（2）血防力量薄弱，血吸虫病查治技术有待进一步提高。我镇的动物防疫力量特别薄弱，而其他重大动物疫病防治形势又十分严峻，牵制了大量人力、物力。同时因机构改革等原因，各地人员变动频繁，血防专业队伍基本上是线断、网破、人散，现有血防人员的血吸虫病查治技术亟待进一步提高。

7 建议

（1）加强领导。进一步巩固和完善政府统一领导、部门协同配合、群众积极参与的血防工作机制，做到领导到位、责任到位、投入到位、工作到位。

（2）积极开展血吸虫病传播控制达标风险评估。做好家畜血防资料、野粪与家畜感染率调查达标风险评估工作的具体实施、技术指导、业务培训、质量控制和资料汇总分析。

（3）加大技术培训，提高防控水平。当前农业血防工作任务艰巨，强化机构队伍建设，充实基层血防力量，开展理论学习和现场操作相结合的培训，提高农业血防专干查治技术水平，规范操作程序，提高实际操作能力，切实做好家畜血吸虫病查治工作。

（4）要大力推行家畜舍饲圈养。通过改造畜圈、种草养畜或者鼓励发展圈养基地等措施，逐步改变疫区家畜放牧的饲养方式，杜绝患病家畜对有螺环境的污染。

[1]全国血吸虫病监测点家畜病情监测及查病技术.

[2]丽江市古城区血吸虫病防治史志.