补硒对牧区育成母羊抗氧化性能的影响

孙晓蒙，孙国君*，张文举，陈 刚，孙 浩

(1.石河子大学 动物科技学院, 新疆 石河子 832000；2.第四师76团，新疆 昭苏 835600)

硒是谷胱甘肽过氧化物酶系(GSH-Px)的活性中心，GSH-Px不仅可以清除脂质过氧化物，还能减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的氧化，从而保护膜结构与功能的完整性。铜、锌是超氧化物歧化酶(SOD)系统的重要组成成分，超氧化物歧化酶是生物体内的重要抗氧化酶之一。因而机体内硒、铜、锌水平影响着动物的抗氧化性能。

邵凯等[1]对中国北方放牧绵羊硒的营养状况调查表明，放牧绵羊均存在硒供给不足的现象，在夏季和秋季表现最为明显。新疆伊犁牧区为缺硒严重地区，夏牧场放牧绵羊血液中硒元素含量低于正常值73.9%[2]。不同品种绵羊血清铜、锌含量及抗氧化酶活力不同[3-4]，不同补硒方法补饲效果不一。本试验旨在通过对放牧育成母羊补硒，探讨其对绵羊血清微量元素硒、铜、锌含量及抗氧化性能的影响，以期为昭苏牧区放牧绵羊生产提供科学的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

试验于2016年9月25日至10月25日，在新疆生产建设兵团第四师七十六团优质细毛羊繁育基地秋季牧场进行。牧场位于新疆伊犁昭苏盆地西缘，平均海拔1 800 m。秋季牧场为山地草甸类植被，主要成分为禾本科牧草和豆科牧草。其中禾本科牧草主要包括鸭茅、圆柱披碱草、鹅观草、假样牧草、无芒雀麦、早熟禾等；豆科牧草包括野豌豆、牧草属豌豆等；其它有紫花鸢尾、蓬子菜、委陵菜、草原老鹳草等。

1.2 方 法

1.2.1 试验动物及饲养管理 采用单因子试验设计。选取体质健康、年龄(7～8月龄)及体重(36.43±1.90) kg相近的新疆细毛羊育成母羊40只，随机分为试验组和对照组，每组20只。试验组育成母羊一次性注射亚硒酸钠溶液(0.05 mg/kg)，对照组不做处理，试验期30 d。育成母羊全天放牧饲养，早上8：00出牧，晚上8：00归牧。

1.2.2 样品采集及处理 育成母羊在试验前和补硒后30 d，清晨空腹于颈静脉采血。3 000 r/min离心10 min，分离血清保存于-20 ℃冰箱中。

1.2.3 指标测定方法 血清微量元素硒含量采用氢化物-发生原子荧光法测定，测定仪器为北京海光AFS-230型双道原子荧光光度计；血清微量元素铜、锌含量采用ICP-AES法测定，测定仪器为美国热电iCAP6000电感耦合等离子体发射光谱仪。

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(CuIn-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量采用试剂盒法测定，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，测定仪器为Thermo酶标仪(型号Multiskan FC)。

1.3 数据处理

数据采用SPSS 17软件进行One-Way ANOVA 方差分析，并用 Duncan 法进行多重比较，以P<0.05 为差异显著。

2 结果与分析

2.1 补硒对育成母羊血清硒、铜、锌含量的影响

由表1可见，试验前，试验组与对照组育成母羊血清中硒、铜、锌含量差异不显著(P>0.05)。注射亚硒酸钠30 d后，试验组育成母羊与对照组相比，血清硒含量明显提高，差异极显著(P<0.01)；血清铜、锌含量无显著差异(P>0.05)。

表1 补硒对育成母羊血清硒、铜、锌含量的影响Table 1 Effects of selenium supplementation on serum Se,Cu and Zn contents in growing ewes

注：同一指标同列数据肩标为不同小写字母表示差异显著(P<0.05)；不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)；小写字母相同或没有者表示差异不显著(P>0.05)。下同。

Note: For the same index, values with different lowercase superscripts show significant difference (P<0.05), different capital superscripts show extreme difference (P<0.01); values with same or no superscripts show insignificant difference(P>0.05). The same below．

2.2 补硒对育成母羊血清中抗氧化指标的影响

由表2可知，试验前，试验组与对照组育成母羊血清中谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶、铜锌超氧化物歧化酶活性活性及丙二醛含量差异不显著(P>0.05)。注射亚硒酸钠30 d后，试验组育成母羊与对照组相比，血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著提高(P<0.01)；总超氧化物歧化酶及铜锌超氧化物歧化酶活性试验组高于对照组育成母羊(P<0.05)；丙二醛含量试验组低于对照组育成母羊，差异极显著(P<0.01)。

表2 补硒对育成母羊抗氧化性能的影响Table 2 Effects of selenium supplementation on antioxidant status in growing ewes

3 讨 论

一般认为，随饲料或添加剂进入体内的硒可迅速被反刍动物吸收进入血液。王燕燕等[5]报道，给肉羊肌肉注射亚硒酸钠后，硒水平当天就有所上升，第二天便可达到显著水平，且体内硒也可保持较长时间，50 d内无需补充。本试验表明，注射亚硒酸钠30 d后，血清硒浓度增加并显著高于对照组。研究表明，给绵羊注射硒对血液铜、锌含量无显著影响，硒与铜、锌之间没有颉颃作用[6-7]，本试验结果与其一致。但在动物饲料中添加硒发现，硒与铜、锌，铜与锌之间存在颉颃关系[8]。这是由于补硒方法不同所致，硒、铜、锌三者之间的颉颃关系发生在消化道内的吸收阶段，而注射硒避免了三者间的相互影响。据资料报道，放牧羊血清中硒、铜、锌含量正常值分别为0.06～0.2 μg/mL、0.7～1.3 μg/mL和0.8～1.2 μg/mL[9]，本次试验新疆细毛羊育成母羊血清锌含量在正常值范围，而血清硒、铜含量处于正常值下限，所以应考虑硒、铜的补充。

GSH-Px、SOD是机体抗过氧化能力的重要指标。当动物硒缺乏时会导致机体中GSH-Px活性减弱，致使组织内产生的超氧阴离子(O2-)和H2O2不能及时清除，从而导致脂质过氧化增强，机体活性氧自由基水平和MDA含量显著升高。给羔羊补硒GSH-Px、SOD活性增强、MDA含量显著下降[10-11]。本试验也表明，给育成母羊补硒显著提高了GSH-Px、T-SOD和CuZn-SOD的活力，MDA含量显著降低。

T-SOD可反映机体抗氧化酶系统和非酶系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢的状态，血清CuZn-SOD活性受机体所吸收铜水平的影响；MDA是自由基引发的脂质过氧化作用的最终分解产物，其含量可间接反映机体的脂质过氧化水平。本试验表明，补硒虽然没有影响血清中铜、锌含量，但CuZn-SOD活力显著提高。申小云等[12]研究发现，GSH-Px活力与CuZn-SOD活力呈显著正相关，GSH-Px和CuZn-SOD活力与MDA含量呈显著负相关。导致这种现象的原因，张捷等[13]认为，由于机体内抗氧化和氧化处于动态平衡中，当机体内GSH-Px活力增强时，血清CuZn-SOD 和T-SOD得到节省所致。

4 结 论

给育成母羊注射亚硒酸钠(0.05 mg/kg)，可提高血清中硒浓度，使育成母羊机体内的抗氧化能力得到显著改善，但对血清铜、锌浓度无显著影响。在新疆昭苏牧区，对秋季放牧绵羊需要补充微量元素硒和铜。

参考文献:

[1] 邵凯，徐桂梅，荣威恒，等．中国北方放牧绵羊硒的营养状况和季节变化[J]．中国畜牧杂志，1997，33(1)：4-6．

[2] 杨菊清，雒秋江，杨开伦，等．新疆伊犁夏牧场铁,铜,锰,锌,硒营养生态环境的研究(Ⅱ)[J]．中国畜牧兽医，2015，42(9)：2 048-2 057．

[3] 王开，吴树清，杜山．多赛特羊与蒙古羊微量元素、超氧化物岐化酶和氧自由基的比较[J]．畜牧与兽医，2010，42(1)：70-73．

[4] 希尼尼根．德美肉羊和蒙古羊种间抗病性的研究——种间抗病性与硒、锌、铜含量及主要抗氧化酶活性关系研究[D]．呼和浩特：内蒙古农业大学，2001．

[5] 王燕燕，吴森，陈福财，等．补硒对肉羊血硒水平、产肉性能和肉品质的影响[J]．家畜生态学报，2013，34(6)：21-25．

[6] 张捷，吴树清，杜山．外源硒对绵羊孕期体内硒、铜、锌的影响[J]．中国畜牧兽医，2009，36(5)：36-39．

[7] KOJOURI G A, SHIRAZI A. Serum concentrations of Cu,Zn,Fe,Mo and Co in newborn lambs following systemic administration of Vitamin E and Selenium to the pregnant ewes[J]. Small Ruminant Research, 2007, 70(2): 136-139.

[8] 王宗元．动物矿物质营养代谢与疾病[M]．上海：上海科学技术出版社，1995．

[9] 钟金凤．青海海西、海南州不同季节矿物元素的盈缺分析[D]．兰州：甘肃农业大学，2005．

[10] KUMAR N, GARG A K, DASS R S, et al. Selenium supplementation influences growth performance,antioxidant status and immune response in lambs[J]. Animal Feed Science&Technology, 2009, 153(1): 77-87.

[11] SETHY K, DASS R S, GARG A K. Effect of vitamin E and Selenium yeast supplementation on growth and antioxidant status in male goat kids[J]. Indian Journal of Animal Sciences, 2014, 84(11):1 236-1 240.

[12] 申小云，杨培林，陈灼，等．锗硒对高原牦牛抗氧化功能系统的影响[J]．甘肃农业大学学报，2002，37(4)：437-441．

[13] 张捷，吴树清，杜山．外源硒对绵羊孕期体内硒、铜、锌及相关抗氧化酶的影响[J]．黑龙江畜牧兽医，2009(6)：48-51．