鸡白痢沙门氏菌的净化效果监测

文│李泽宇 杨靖（新疆农业职业技术学院）

沙门氏菌病是一种多种动物共患的传染病，其病原是沙门氏杆菌。根据病原特点，它可以分为三种不同的疾病，即禽伤寒、地方流行性禽副伤寒和鸡白痢。近年来，鸡白痢沙门氏菌流行广泛，给养禽业造成了严重的影响和较大的经济损失。为了解新疆维吾尔自治区规模化肉种鸡场鸡白痢沙门氏菌的感染情况，分6批从4栋鸡舍采集血清2400份，进行鸡白痢沙门氏菌抗体检测，并对鸡场采取了净化措施。现将监测及净化情况报告如下。

一、材料与方法

北京中海动物保健科技公司生产的鸡白痢平板凝集抗原、标准阳性血清，实验室提供微量移液器（eppendorf公司），灭菌高压锅，离心机等实验所需仪器设备。

二、 实验样品

1.血清样品采集。分六批采集新疆维吾尔自治区昌吉市某规模化父母代肉种鸡场A、B、C、D4栋鸡舍血清检测样品共2400份，每栋鸡舍均每次均采集100份血清，六批采集时间分别为：14周龄、18周龄、22周龄、26周龄、30周龄和34周龄。

2.血清样品采集的方法及样品储存。从鸡翅静脉采血，血液采集后用低速常温离心机提取血清即样品，即送实验室检测或置于-20℃冰箱储存备用。

3.可疑沙门氏菌病鸡病料的采集。根据现场剖检病变及结合血清学检测结果，采集可疑的沙门氏菌病鸡病料，包括心血、肝脏、脾脏等，置于-80℃冰箱储存备用。

三、实验方法与判定

1.血清样品处理。样品：从冰箱取出待检血清。

对照：用北京中海动物保健科技公司生产的鸡白痢平板凝集标准阳性血清及阴性血清。

2.试验方法步骤。

（1）滴加抗原。取一块洁净的玻璃板划出方格，或用平板凝集反应板，在板上编号，将鸡白痢标准抗原充分混匀，用移液器或滴管吸取鸡白痢标准抗原，垂直滴1滴（约0.05毫升）于平板各格上。

（2）滴加血清。在第一格抗原上滴加鸡白痢标准阳性血清1滴，在第二格抗原上滴加阴性血清1滴，其余各格为样品检测格（每只鸡一格），用移液器吸取血液1滴（约0.05毫升）滴加在抗原滴上。

（3）混匀。用灭菌牙签迅速将血清与抗原搅拌混匀，并散开至直径约为2厘米的薄层后，轻轻晃动玻板，观测5分钟，判定结果并记录。

3.结果判定。需同时符合在阳性对照血清液体出现100%凝集和阴性对照血清液体完全无凝集现象的前提下，判定结果为有效。鸡白痢标准抗原与待检血清混匀后，于1分钟内出现很多大块的凝集颗粒，而且底液清亮的判为强阳性反应，记录为“#”；在1～3分钟内出现很多大小不等的凝集颗粒，而且底液略有混浊的判为中强度阳性反应，记录为“++～+++”；在3～4分钟后，出现少量细微颗粒，底液较混浊的，判为弱阳性反应，记录为“+”；在4分钟内眼未见凝集现象发生或在4分钟以后出现不明显的凝集现象的判为阴性反应，记录为“-”。

四、数据处理与统计分析

用EXCEL软件进行原始数据处理，用SPSS 11.5对试验数据进行t检验。

五、沙门氏菌的分离、培养及鉴定

将无菌采集的病料（肝脏和心血）接种于沙门氏菌选择培养基中，进行沙门氏菌的分离、然后采用形态学、生理生化特性鉴定的方法，对分离的沙门氏菌进行鉴定。

六、净化措施

1.淘汰阳性鸡只。根据检测结果，对所检测的A、B、C、D4栋鸡舍中，血清平板凝集检测结果为阳性的鸡只严格淘汰。同时，按照“种公鸡进行全检，种母鸡按1%左右的比例进行抽检”的原则，对鸡场其他鸡舍也进行了抽检，及时了解鸡场整体鸡群白痢沙门氏菌的感染情况，坚决淘汰阳性鸡只。

2.及时淘汰病死鸡。在淘汰阳性鸡只的同时，加强对鸡群的观察，密切监视鸡群状态，对有临床症状的病鸡及已死亡鸡只及时淘汰，并进行无害化处理。

3.加强饲养管理。采用全价饲料喂养，确保鸡只营养均衡。及时清除粪便，并对粪便做无害化处理。严格执行养鸡场的卫生管理制度，鸡场每天用1∶500的二氯异氰尿酸钠消毒2次，鸡场大门口消毒池也用该消毒液对出入车辆进行消毒。加强鸡场人员管理，严格控制人员出入，设有人员出入专门通道，对出入鸡场人员采用紫外线进行全身消毒，同时，在人员出入消毒池内放置1∶200二氯异氰尿酸钠消毒，确保消毒效果。

4.敏感药物进行防治。药敏试验发现，对该鸡场的鸡白痢沙门氏菌比较敏感的药物分别为：头孢噻呋、氟派酸、恩诺沙星、庆大霉素、卡那霉素等。根据国家及自治区关于鸡白痢净化规程，对鸡群选用恩诺沙星、氟派酸、头孢噻呋等轮换用药进行治疗。

七、结果与分析

1.第一次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表1可以看出：14周龄400份血清中，结果阳性总数为149份，总阳性率为37.25%，其中，强阳性53份，强阳性率13.25%；弱阳性96份，弱阳性率24.00%。

2.第二次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表2可以看出：18周龄400份血清中，结果阳性总数为116份，总阳性率为29.00%，其中，强阳性39份，强阳性率9.75%；弱阳性77份，弱阳性率19.25%。

3.第三次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表3可以看出：22周龄400份血清中，结果阳性总数为89份，总阳性率为22.25%，其中，强阳性34份，强阳性率8.5%；弱阳性55份，弱阳性率13.75%。

4.第四次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表4可以看出：26周龄400份血清中，结果阳性总数为72份，总阳性率为18.00%，其中，强阳性19份，强阳性率4.75%；弱阳性53份，弱阳性率13.25%。

5.第五次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表5可以看出：30周龄400份血清中，结果阳性总数为33份，总阳性率为8.25%，其中，强阳性7份，强阳性率1.75%；弱阳性26份，弱阳性率6.50%。

表1 昌吉市某规模化肉种鸡场第一次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

表2 昌吉市某规模化肉种鸡场第二次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

表3 昌吉市某规模化肉种鸡场第三次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

6.第六次鸡白痢血清抗体阳性率分析。从表6可以看出：34周龄400份血清中，结果阳性总数为17份，总阳性率为4.25%，其中，强阳性1份，强阳性率0.25%；弱阳性16份，弱阳性率4.00%。

表4 昌吉市某规模化肉种鸡场第四次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

表5 昌吉市某规模化肉种鸡场第五次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

表6 昌吉市某规模化肉种鸡场第六次鸡白痢血清抗体阳性率汇总表

八、沙门氏菌分离培养及鉴定结果

1.沙门氏菌形态学鉴定结果。按照细菌分离培养方法，从病鸡的肝脏、心血中分离到沙门氏菌，用革兰氏染色后，在显微镜油镜下观察，可以看到革兰氏红色阴性杆菌，两端钝圆，形态较小，无荚膜、无芽孢，完全符合沙门氏菌的形态学特征。

2.沙门氏菌的培养特性、生理生化及培养特性鉴定结果。培养特性：将按照细菌培养方法分离到的细菌，接种在普通营养琼脂培养基上，在37℃的恒温培养箱中生长培养24小时后，形成圆形、中等大小、无色半透明、表面光滑、边缘整齐的菌落；接种在麦康凯琼脂培养基上，在37℃的恒温培养箱中生长培养24小时后，生长出无色菌落；接种在SS.培养基上，在37℃的恒温培养箱中生长培养24小时后，生长出的菌落是圆形、表面光滑湿润，无色透明或半透明、边缘整齐，菌落中心呈黑褐色；接种在三糖铁琼脂斜面上，可以看到斜面为红色，底部变黑并产气。

生理生化特性：分离的细菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨醇产气；不能使乳糖、蔗糖和侧金盏花醇发酵；不产吲哚，V-P反应为阴性；不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨；枸橼酸盐试验呈阴性。

九、分析与讨论

1.结果分析。从结果分析可知，对昌吉市某规模化肉种鸡场4个圈舍不同日龄的鸡群分六批进行检查，每次各检测400份血清。第一次是对14周龄鸡群进行血清学检测，结果阳性总数为149份，总阳性率为37.25%，其中，强阳性53份，强阳性率13.25%；弱阳性96份，弱阳性率24.00%。针对感染情况，采取淘汰阳性鸡只，淘汰病死鸡，采用头孢噻呋等敏感性强的药物进行治疗，加强消毒与通风等措施，鸡白痢阳性率明显下降。20周后，阳性率由37.25%下降到4.25%，下降了33个百分点。其中，强阳性1份，强阳性率0.25%；弱阳性16份，弱阳性率4.00%。

2.讨论。考虑到昌吉市养禽业的实际情况及本地养禽业的发展，结合国家及自治区关于鸡白痢的相关规定，在有效监测的基础上，采取淘汰阳性鸡只、药物治疗、加强饲养管理等综合方法净化肉种鸡场鸡白痢，取得了较好的效果。今后，在取得已有成绩的基础上，进一步加强肉种鸡场鸡白痢的净化工作，选择净化的种源，严格从信誉度高的祖代鸡场引进种鸡；加强日常监测，坚决淘汰感染鸡群；加强种蛋及孵化管理，严防鸡白痢沙门氏菌感染，为客户提供优质鸡苗。