马铃薯皮、马铃薯渣、块茎中α-茄碱含量的测定

王运雷，张 辉

（吉林农业科技学院动物科技学院，吉林 吉林 132109）

马铃薯糖苷生物碱存在于马铃薯的茎叶、皮、块茎中，国内外的研究表明其对神经系统、消化系统、生殖系统都存在毒性的同时也存在着药用价值［1］。 其对癌细胞有抑制作用［2-5］，抗真菌、病毒等病原微生物［6-8］，作为疫苗的免疫佐剂能够使细胞的免疫反应增强，能够降低胆固醇、低密度脂蛋白，还有消炎、活血、镇痛的作用［9-10］。该文对马铃薯皮、马铃薯渣、马铃薯块茎中α-茄碱的含量进行了测定，以期为马铃薯淀粉渣等马铃薯副产品作为饲料的应用提供了试验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

α-茄碱，为上海源叶生物科技有限公司生产；马铃薯，产地为吉林。

1.2 试验仪器

图1 α-茄碱的标准曲线

台式高速冷冻离心机，型号为SORVALL MICRO 21R，生产厂家为德国Thermo；紫外分光光度计，型号为L8，生产厂家为上海仪电分析仪器有限公司；磁力搅拌器，型号为99-3，生产厂家为金坛市华城开元实验仪器厂；旋转蒸发仪，型号为Value-G3，生产厂家为德国Heidolph；超净工作台，型号为ACB-4A1，生产厂家为艺思高科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 乙醇—乙酸法提取α-茄碱：①分别称量马铃薯皮、马铃薯渣、马铃薯块茎各20 g，加入100 mL的乙醇（体积分数95%）和30 mL的乙酸，用磁力搅拌器搅拌15 min，之后过滤［11］。②将滤液放进索氏脂肪提取器的称脂瓶，用滤纸包住滤渣，用线缠住，放进索氏脂肪抽提器的抽提管里，在温度为55～65℃条件下进行水浴抽提16 h后，冷却、过滤，之后把剩下的乙醇倒进蒸发皿里，把乙醇挥发掉［11］。 ③取 30 mL 5%的 H2SO4把残渣溶解，然后过滤，收集滤液，再用浓氨水来调节pH值至10.0～10.5 左右，冷却，在冰箱里过夜［11］。 ④4 ℃下，5 000 r/min离心，之后去掉上清液，用1%的氨水去洗涤，再进行离心，再洗涤，直至洗涤液澄清，再离心，所得沉淀则是 α-茄碱的粗提品［11］。1.3.2 α-茄碱含量的测定

1.3.2.1 α-茄碱标准曲线：精确称取5 mg α-茄碱的标准品，用1%的H2SO4溶解，移入50 mL的容量瓶里边，随后加1%的H2SO4溶液至刻度，摇匀，制备α-茄碱标准溶液。

分别量取 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 标准溶液，用体积分数为1%的H2SO4稀释到2 mL，在冰浴里慢慢加入5 mL的H2SO4放置1 min，同样在冰浴中滴加2.5 mL质量分数为1%的甲醛，放置90 min后，于波长为530 nm下测定各浓度标准液的吸光度。

以α-茄碱含量作为横坐标，吸光度作为纵坐标，绘制α-茄碱的标准曲线。α-茄碱的标准曲线为Y=0.7957X+0.0111，R2=0.9366。详细情况见图1。

1.3.2.2 样品的测定：把α-茄碱粗提品用1%的H2SO4溶解，然后定容到10 mL。称量2 mL的溶解液，然后按照制作标准曲线的操作步骤进行操作，在520 nm波长处测定吸光度，计算α-茄碱的含量［12］。

α-茄碱含量的计算公式：

X=ρ×V×50/m

X：100 g样品中含有 α-茄碱的量（mg/100 g）；ρ：测定结果相应的标准浓度（mg/mL）；V：样品提取之后定容体积（mL）；m：样品量（g）。

1.3.3 加标法测定α-茄碱回收率：取已测定了α-茄碱含量的样品，加入一定质量的α-茄碱标准品，用乙醇—乙酸法提取，按样品测定方法进行测定，计算其回收率。

α-茄碱回收率的计算公式：

Y=（m2-m3）/m1×100%

Y：α-茄碱的回收率（%）；m1：加入 α-茄碱标准品的量（g）；m2：加标试样的测定值（g）；m3：试样的测定值（g）

2 结果与讨论

由表1可知，马铃薯的不同部位所含有的α-茄碱的量不同，马铃薯皮比马铃薯块茎中的α-茄碱含量高，α-茄碱含量依次为马铃薯皮＞马铃薯渣＞马铃薯块茎（肉）。

表1 马铃薯皮、渣、块茎中α-茄碱含量 mg/kg

由表2可知，加标法测定的回收率平均值为92.33%，表明用乙醇—乙酸法提取、测定α-茄碱含量的结果真实、可靠。

目前关于马铃薯中α-茄碱的提取方法一般采用乙醇—乙酸法，含量的测定采用的比色法，所用的仪器设备和操作都比较简单，而且结果真实可靠，是普遍采用的方法。

3 小结

该试验提取马铃薯α-茄碱所用的乙醇—乙酸法，简便、快速、操作简单，检测结果准确可靠。α-茄碱含量依次为马铃薯皮＞马铃薯渣＞马铃薯块茎（肉），总平均回收率为92.33%。

表2 马铃薯皮、渣、块茎中α-茄碱回收率

［1］平华，马智宏，李杨.不同发芽天数及芽周不同深度马铃薯中 α-茄碱含量变化规律［J］.食品科技，2017，42（1）：55-59.

［2］李志雄，梁蔚波，唐晖，等.龙葵碱对前列腺癌LNCaP及 Du145细胞系的作用及机制 ［J］.广东医学，2013，34（8）：1153-1157.

［3］章俊，施国伟.龙葵碱对前列腺癌细胞系PC-3的体外抑制作用［J］.中华男科学杂志，2011，17（3）：284-287.

［4］黄东彬，管静.龙葵合剂治疗中晚期非小细胞肺癌54例临床观察［J］.内蒙古中医药，2013（16）：21-22.

［5］陈来，李姗姗，金德忠，等.中药龙葵提取物澳洲茄碱对肺癌细胞抑制作用 ［J］.时珍国医国药，2015，26（2）：333-334.

［6］SON Y O， KIM J， LIM J C ，et al.2003.Ripe fruit of Solanum nigrum L.inhibits cell growth and induces apoptosis in MCF-7 cells ［J］.Food Chem Toxicol，2003，41（10）：1421-1428.

［7］JI Y B，GAO S Y，JI C F，et al.Induction of apoptosis in HepG2 cells by solanine and Bcl-2 protein ［J］.J Ethnopharmacol，2008，115（2）：194-202.

［8］GAO L F， WEN L J， YU H，et al.Knockdown of Stat3 expression using RNAi inhibits growth of laryngeal tumors in vivo ［J］.Acta Pharmacol Sin，2006 ，27 （3）：347-352.

［9］FRIEDMAN M， LEEK R， KIM H J， etal.Anticarcinogenic effects of glycoalkaloids from potatoes against human cervical， liver， lymphoma， and stomach cancer cells ［J］.J Agric Food Chem，2005，53 （15）：6162-6169.

［10］SMITH D B， RODDICK J G， JONES J L．Synergism between the potato glycoalkaloids α -chaconine and α -solanine in inhibition of snail feeding ［J］.Phytochemistry，2001，57（2）：229-234.

［11］郑秋锋.饲料中龙葵素的测定方法和阈量研究［D］.杭州：浙江大学，2003.

［12］江成英，吴耘红，王拓一.固态发酵马铃薯渣生产饲料过程中龙葵素含量变化的研究［J］.粮食与饲料工业，2010（12）：54-55，64.