2015—2017年上海规模猪场和生猪屠宰场猪群中猪细小病毒病的病原学监测

孙泉云，夏炉明，鞠厚斌，杨德全，朱九超

（上海市动物疫病预防控制中心，上海 长宁 201103）

猪细小病毒（Porcine parvovirus,PPV）是引起猪繁殖障碍的重要病原之一，妊娠母猪感染PPV后发生流产，并产出死胎、木乃伊胎及病弱仔猪。本病主要通过消化道和呼吸道途径传播（口鼻接触），也可以通过生殖道传播（配种、人工授精等），并可经母猪胎盘垂直传播给胎儿。自1966年发现第一例猪细小病毒病病例以来，该病广泛存在于世界各地并在大多数规模猪场呈散发或地方性流行，严重影响着养猪业的发展。为了解上海地区规模猪场和生猪屠宰场猪群的细小病毒感染情况，我们于2015—2017年进行了针对性的PPV检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 来自 2015—2017年上海市 12个规模猪场1 259份种猪扁桃体样品，以及3个生猪屠宰场1 879份上市肉猪的颌下淋巴结、扁桃体样品。

1.1.2 试剂来源 猪细小病毒（PPV）荧光 PCR 检测试剂盒购自广州维伯鑫生物有限公司，核酸抽提试剂购自德国MN公司。

1.2 试验方法

将待检组织样品剪碎、研磨，PBS匀浆，5 400 r/min离心5 min，取上清液进行核酸提取，按试剂盒说明书进行荧光PCR试验。

2 试验结果

病原学检测结果显示，2015—2017年规模猪场1 259份种猪扁桃体样品中检出PPV阳性110份，阳性率 8.74%，阳性率范围 2.97%～19.27%，以 2017年检出率为最高；2015—2017年生猪屠宰场1 879份上市肉猪颌下淋巴结、扁桃体样品中检出PPV阳性671份，阳性率35.71%，阳性率范围21.11%～61.71%，以2017年检出率为最高，具体结果见表1、表2。

表1 规模猪场样品PPV检测结果汇总

表2 屠宰场样品PPV检测结果汇总

3 小结与讨论

（1）猪细小病毒主要感染初产母猪，引起流产、产死胎等繁殖障碍，但母猪本身无明显临诊症状，因而本病常被猪场所忽视。经对上海规模猪场种猪和生猪屠宰场上市肉猪的PPV检测发现，存在较高的阳性率，说明感染带毒的普遍性，值得关注和警惕。孙泉云等[1]采用PCR和RT-PCR技术，对上海及其周边地区的30个猪场和人工授精站的生产公猪精液样品355份进行了猪细小病毒（PPV）的检测，结果检出75份PPV阳性，阳性率为21.1%。国外也有相似的报道，Attila等[2]为了证实新鉴定的猪细小病毒在匈牙利的发生与流行情况，从匈牙利不同类型的猪场采集粪便、血清、器官组织、流产胎儿和精液等样品，采用PCR试验进行猪细小病毒病的病原学检测，结果表明匈牙利存在多型猪细小病毒，其中PPV1阳性率为0.5%，PPV2阳性率为 6.4%，PPV3 阳性率为 9.7%，PPV4 阳性率为 6.4%。

（2）细小病毒可通过啮齿类动物机械性传播，蚊子是否可作为传播媒介尚未确认，但已经证实PPV在不同年龄段猪群中可循环传播，导致带毒率较高，虽然未进行基因测序，但因为目前猪场普遍使用PPV灭活疫苗免疫，不存在疫苗散毒问题，因此猪群感染的应是流行毒株。吴海超等[3]也发现了不同年龄段猪群的PPV感染问题，从一早、中期生产状况差的肥育猪场收集猪血清214份，采用PCR检测猪PPV，选取1份阳性血清接种猪睾丸细胞（ST）进行PPV分离、部分生物学特性研究。结果表明在15、16、17、18、22 周龄猪血清中均检测到 PPV，检测阳性率分别为10%、40%、20%、15.4%、9%，而从 2～14及24周龄的猪血清中没有检测到PPV。从血清中分离的PPV在ST细胞上传到第5代能够出现较稳定的细胞病变（CPE），病毒血凝效价为28，说明PPV在采样猪场的保育后期和肥育前、中期猪血清中具有较高的阳性率。

（3）猪细小病毒病的预防以免疫接种为主要手段，建议1～3胎母猪实施一年两次跟胎免疫灭活疫苗，确保生产母猪在一个生产周期内维持坚挺的抗体水平，抵抗野毒侵袭。

（4）根据多年的采样经验和不同组织器官的病毒检出率，种猪活体采样选择扁桃体，生猪屠宰场猪组织样品优先选择扁桃体和颌下淋巴结，适宜于检测PPV，说明上述样品是PPV侵入、寄居和复制的场所。

[1]孙泉云，周锦萍，张维谊，等.种公猪精液中与繁殖障碍有关的 6 种病毒的检测[J].动物医学进展，2007，28（11）：30-33.

[2]Attila Csagola,Marta Lorincz,Daniel Cadar,et al.Detection,prevalence and analysis of emerging porcine parvovirus infections[J].Archives of Virology,2012,157(6)：1003-1010.

[3]吴海超，胡呈才，刘崇灵，等.育肥猪血清中猪细小病毒16WS株的分离与鉴定 [J].湖南农业大学学报（自然科学版），2014，40（5）：525-529.