甜菜碱对酒精性肝损伤大鼠高同型半胱氨酸血症和肝脂质过氧化的影响

海秀玲 姜怡邓（通讯作者） 张效敏 白晓林

（1宁夏医科大学总医院 宁夏 银川 750004）

（2宁夏医科大学 宁夏 银川 750004）

（3宁夏回族自治区人民医院 宁夏 银川 750000）

随着近年来人们物质生活水平的提高，人们的生活方式和饮食习惯发生了较大程度的改变，人均摄入酒精量日益增加，过量的酒精摄入可以导致消化系统、神经系统、循环系统等出现病变，其中肝脏作为代谢酒精的主要器官，其的损伤最为严重，在加之高脂饮食的影响，导致酒精性肝损伤的发病率呈现逐年上升的趋势[1]。蛋氨酸循环障碍导致高同型半胱氨酸血症的发生可能是酒精性脂肪肝炎发病的主要机制之一[2]。甜菜碱又名三甲基甘氨酸，是广泛分布于动物、植物、微生物体内的季铵型水溶性生物碱，是人体内唯一可替代叶酸的的甲基供体，参与蛋氨酸循环和卵磷脂合成。本文采用随机平行对照的方法，以SD大鼠为研究对象，探究甜菜碱对酒精性肝损伤大鼠高同型半胱氨酸血症和肝脂质过氧化的影响，具体如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取30只SPF级雄性大鼠作为分析对象。大鼠的体重在139～171g之间，平均体重为（150±9）g，由本市的动物实验中心提供。所用药品：盐酸甜菜碱，纯度为99%，购自浙江菊花集团进出口有限公司；注射用腺苷蛋氨酸（SAM），购自德国基诺药厂，规格为每支500mg，又名思美泰；各项指标检测试剂购自本市生物研究所。所有大鼠的自身条件和各个大鼠之间的比较条件均符合本次研究进行的要求。

1.2 方法

将30只大鼠正常喂养一周后按照随机数表的方法随机分为3组，分别为模型组、甜菜碱组和SAM组，每组10只。每天给予三组大鼠酒精和0.5ml的鱼油灌胃，酒精剂量的给予以大鼠的体重为准。初始期为每千克7g酒精，随后每周递增每千克0.2g，酒精和鱼油的供给共持续8周。与此同时给予本院自制的饲料，成分为普通饲料、猪油和全脂奶粉，比例为8∶1∶1，将适量的硫酸亚铁加入每公斤饲料中。在造模后的第四周，甜菜碱组按照大鼠体重的标准给予每千克300mg的甜菜碱水剂灌胃；SAM组给予每千克100mg的SAM腹腔注射，模型组不给予任何治疗，治疗时长为4周。在第8周处死全部大鼠，造模结束[3]。在造模结束后采集大鼠的血液和肝组织标本，对血浆总同型半胱氨酸（tHcy）浓度、血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白（Alb）、白/球蛋白比值（A/G）、肝匀浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及还原性谷胱甘肽（GSH）指标进行检测，同时对大鼠的肝脏进行病理组织学检测。

1.3 观察指标

观察记录造模结束、经检查后三组大鼠的tHcy、ALT、AST、Alb、A/G、MDA、SOD、GSH指标和肝脏病理组织学的检验结果。

1.4 统计学分析

本次研究所得数据均采用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析，计数资料用χ2检验，计量资料用t检验，以P＜0.05为有统计学意义。

2.结果

本次研究中共采用研究大鼠30只，30只大鼠在研究期间均表现正常，无意外情况发生或死亡状况出现。

2.1 大鼠的血浆tHcy水平测定和肝匀浆MDA、SOD、GSH含量测定结果

模型组大鼠血浆tHcy水平显著高于甜菜碱组（P＜0.05），但与SAM组相比无显著差异（P＞0.05）；与模型组相比，甜菜碱组和SAM的MDA含量明显降低（P＜0.05），甜菜碱组显著增加了SOD的活性（P＜0.05），GSH含量虽然有提高的趋势，但是差异无统计学意义（P＞0.05）。SAM组的GSH含量显著提高（P＜0.05），但对于SOD活性的提高无显著差异（P＞0.05），具体数据见表1。

表1 三组大鼠的各项指标检测结果数据对比

2.2 大鼠的肝功能各项指标检测结果

与模型组相比较，甜菜碱组和SAM组的ALT、AST水平显著降低（P＜0.05）；甜菜碱组和SAM组之间的ALT、AST水平相较无显著差异（P＞0.05），具体数据见表2。

表2 三组大鼠的肝功能各项指标检测结果数据对比

2.3 大鼠肝组织病理组织学检测结果

模型组存在肝小叶结构，肝细胞索排列紊乱，肝细胞呈现明显肿胀的迹象，胞浆疏松，呈现颗粒状变化，出现不同程度的弥漫性肝细胞脂肪变性，脂变肝细胞的体积增大，胞浆内可见大小不一、数量不等的脂肪空泡，胞核处于周边位置。肝组织内存在小叶内炎症，在少部分组织内可以见到汇管区炎症，没有见到肝细胞点、片状坏死。甜菜碱组和SAM组脂肪变性肝细胞较模型组明显减少，有少量脂肪空泡出现，小叶内和汇管区的炎症明显减轻。

3.讨论

近年来我国的经济迅速发展，人们物质生活水平的提高带来了生活方式和饮食习惯的改变。据相关调查显示，近年来我国的人均酒精摄入量呈现逐年上升的趋势。长期饮酒或饮酒过度会对肝造成损伤，但是酒精性肝损伤的发病机制至今还不明了，相关研究表明，甲硫氨酸代谢障碍可导致的血浆高同型半胱氨酸血症可能与其发病机制有关。人体饮酒过后，酒精子在体内首先被转化为乙醛，然后被转化为乙酸。乙醇主要在人体的肝细胞中代谢，在代谢的过程中会引起某些代谢酶的变化，从而促进脂肪酸的合成，最终引起甘油三酯在肝细胞内聚集[4]。甜菜碱广泛存在于人体内，它可以来源于如甜菜、小麦等的食物，也可以由人体内的胆碱逐渐发生氧化而生成。甜菜碱主要作为渗透压调节剂和甲基供体产生生物学作用，有维持细胞内渗透压、防止蛋白质变性和通过蛋氨酸循环参与蛋白质、脂肪代谢的功能。本文的研究中以平行对照的方式，比较甜菜碱和腺苷蛋氨酸（SAM）作为甲基供体在改善甲硫氨酸循环和肝脂质过氧化方面的作用。在改善甲硫氨酸循环障碍方面，甜菜碱组与模型组比较，血浆tHcy水平显著降低（P＜0.05），说明甜菜碱对HHcy有很明显的改善作用，同时对肝过量释放tHcy有显著的抑制作用。其参与BHMT的合成，在tHcy向甲硫氨酸的转化中起到很强的催化作用，是甲硫氨酸循环的重要途径之一，可以有效防止tHcy出现堆积[5]。同时甲硫氨酸循环的正常进行可以有效维持血液中S-腺苷蛋氨酸（SAM）的浓度，从而代替SAM在人体肝脏和其他疾病中的治疗作用。另一方面，甜菜碱通过增强SOD活性，抑制脂质过氧化反应，减少自由基的损伤，对肝细胞有很好的保护作用。从本文的研究结果可知，甜菜碱可以通过治疗高同型半胱氨酸血症、改善肝脂质过氧化来防治酒精肝损伤；同时甜菜碱的作用效果显著好于腺苷蛋氨酸，对人体有更好的相容性，通过种种作用机制直接或间接作用于发病体，有很好的效果。

综上所述，甜菜碱对酒精性肝损伤大鼠高同型半胱氨酸血症和肝脂质过氧化有非常好的治疗作用与积极影响，值得进行深入研究。

[1]田旭东，孙平，李彦龙，等.甜菜碱对酒精性肝病大鼠肝细胞色素P4502E1基因和蛋白表达的影响[J].西部中医药，2014(7):8-12.

[2]赵雪珂，程明亮.茅台酒对大鼠肝组织中CYP2E1基因及蛋白质表达的影响[J].贵阳医学院学报，2013，38(6):573-577.

[3]张春，寿玺，李志强，等.CYP2E1在HBV转基因小鼠急性肝损伤时的表达及意义[J].新疆医科大学学报，2016，39(10):1272-1276.

[4]魏琴.PD-1/PD-L1和ICOS/ICOSL共刺激分子在HBV转基因小鼠急性肝损伤中的动态变化研究[D].新疆医科大学，2014.

[5]孟子愉，尹芝南.GammadeltaT细胞在HBsAg转基因小鼠急性肝损伤中的作用[C]//全国免疫学学术大会.2015.