蒙药漏芦花总木脂素的含量测定

苏日塔拉图 王晓琴 韩国庆 刘丽颖

(1.内蒙古民族大学附属医院临床蒙药剂部，内蒙古 通辽 028007；2.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110)

蒙药漏芦药材来源于菊科植物祁州漏芦Rhaponticum unifLorum (L.)DC.的干燥花序，又名野兰、鬼油麻、狼头花等，广泛分布在中国东北、西北、华中等地区，生于山坡丘陵地、松林下或桦木林下、海拔390 ～ 2700米，头状花序单生茎顶，花序梗粗壮[1]。主治黏疫，肠刺痛，炭疽，白喉，麻疹，毒热，心热，讧热，炽热，血热，伤热[2-3]。《蒙医药选编》记载：“漏芦花清疫热，毒热，心热”。

课题组前期的研究表明漏芦花主要的次生代谢产物为黄酮类和木脂素类化合物，其中，以泥胡木脂素B为代表的木脂素类化合物含量很高[4]。目前对蒙药漏芦花的研究主要集中在黄酮含量的测定等方面，对其总木脂素含量测定未见报道，本文建立了漏芦花序的总木脂素含量测定方法，以期为蒙药漏芦花的进一步研究和开发利用提供参考依据。

1 材料与仪器

9批漏芦花药材分别采集于内蒙古地区和购买于药材公司和医院；泥胡木脂素B对照品为实验室自制，经1H-NMR和13C-NMR鉴定结构，HPLC面积归一化法纯度≥98%。所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；UV1000双光束紫外可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)；超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司)。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备:精密称取干燥至恒重的泥胡木脂素B对照品5.1 mg，用60%乙醇溶解，定容于25 mL容量瓶，得浓度为0.204 mg·mL-1泥胡木脂素B对照品溶液。

2.2 供试品溶液的制备: 取漏芦花粉末约0.1g，精密称定，置于150 mL具塞锥形瓶中，精密加入60 %乙醇溶液20 mL，称重，用超声(功率100W)提取30 min，再次称重，用60%乙醇补足失重，过滤。精密吸取续滤液1 mL至25 mL容量瓶中，定容，摇匀待用。

2.3 最大吸收波长确定:分别精密量取对照品溶液和供试品溶液1mL，置于25 mL容量瓶中，定容至刻度，充分摇匀，以随行试剂做空白对照，在200 ～ 400 nm波长范围内进行全波长扫描，结果二者均在340 nm波长处呈现最大吸收，且空白对照无干扰，结果见图1。

2.4 标准曲线的绘制: 分别精密量取对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置于25mL容量瓶，定容摇匀。分别得泥胡木脂素B浓度为11.6、17.4、23.2、29、34.8、40.6 μg·mL-1的对照品溶液，于340 nm波长处测定各吸光度，得线性回归方程：Y = 0.02307X+0.00007(r = 0.9993)。表明泥胡木脂素B在11.6 ～ 40.6 μg·mL-1范围内与吸光度呈良好线性关系。

2.5 重复性试验 : 按2.2项下方法平行制备6份供试品溶液，在340 nm处测定吸光度。结果表明总木脂素含量的RSD为0.62%，表明方法重复性良好。

2.6 精密度试验: 按2.2项下的方法制备供试品溶液，在340 nm处连续测定吸光度6次，结果总木脂素含量的RSD为0.41%，表明仪器的精密度良好。

2.7 稳定性试验: 按2.2项下的方法制备供试品溶液，在340 nm处于0、1、2、4、6、8 h测定吸光度，结果总木脂素含量的RSD为0.48%，结果表明样品溶液在8 h内稳定性良好。

2.8 加样回收率试验：取已知含量的同一药材粉末6份，各约0.05 g，精密称定。分别按药材粉末已知总木脂素含量的80%、100%、120%3个水平精密加入泥胡木脂素B对照品，按2.2项下的方法制备供试品溶液，按2.3项下的方法在340 nm处测吸光度，计算含量及回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果

3 含量测定

取9批漏芦花药材粉末，按2.2项下的方法制备供试品溶液，在340 nm处测定吸光度，平行测定3次，取平均值。结果见表2。

表2 含量测定结果

4 讨论

4.1 对最佳提取溶剂进行考察，取漏芦花粉末0.1g，精密称定5份，置具塞锥形瓶中，分别精密加入20 mL 50%、60%、70%、80%、90%乙醇，按2.2项下的供试品溶液制备方法，在340 nm处测定吸光度,结果60%乙醇对总木脂素的提取率最大，确定最佳提取溶剂为60%乙醇溶液。

4.2 本研究建立了紫外分光光度法测定蒙药漏芦花中总木脂素含量的方法，并对野外采集实验室阴干的药材样品以及收集于药材市场和蒙中医院的药材样品进行了检测。9批漏芦花样品中总木脂素含量在83.75 ～103.36 mg/g。本方法快捷、准确，可望为漏芦花药材的质量评价和有效控制提供科学依据。

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M]. 北京:科学出版社,1990,78(1):184.

[2]中国医学百科全书编辑委员会,中国医学百科全书.蒙医学[M]. 上海:上海科学技术出版社,1992:211.

[3]中华人民共和国卫生部药典委员会. 中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册 [S].1998:54.

[4]杜月,王晓琴,包保全,等. 祁州漏芦花化学成分研究[J]. 中草药, 2016,47(16):2817-2821.