凤冈锌硒茶对肥胖大鼠的清脂效果

李文梅，俞捷，胡斌丽，罗娅，杨静，杨雪松，许洁

(遵义医学院公共卫生学院，贵州遵义563099)

肥胖症是环境与遗传因素共同作用下机体能量摄入超过消耗，以脂肪方式储存的一种营养代谢障碍性疾病，其特征在于身体中脂肪过度积聚和储存，脂肪细胞数量和(或)尺寸的增加[1]。近年人类日常饮食结构中脂肪稍高于日常摄入量，供能比高于适宜摄入量上限50%，伴随生活方式改变，肥胖症发病率呈快速上升趋势[2],已成为威胁全球人群的内分泌代谢性疾病，可促进多种慢性疾病的发生发展，是导致心脑血管疾病、Ⅱ型糖尿病和恶性疾病的危险因素[3,4]。治疗肥胖的主要方式是药物治疗和手术治疗，药物治疗可导致严重的精神病学问题，虽手术治疗的效果优于药物治疗[4]，但费用昂贵[5]，不易大范围实行。贵州凤冈土地富含锌硒、所产凤冈锌硒茶有机锌、硒含量为40～100 mg/kg、0.25～3.50 mg/kg。茶树有极强富集锌硒的能力，新叶中锌、硒含量与土壤中含量呈正相关，比老叶分别高2.3～4.0倍和1.2～3.0倍[6]，茶叶因其硒含量高于其他农作物成为食物链植物环节及补硒途径的高硒资源。有研究显示，茶有减肥作用，微量元素锌、硒与肥胖有密切关系。儿童尿液锌含量与BMI呈负相关，肥胖儿童低于正常儿童[7]。2016年4月～2017年6月,本文根据人群日常饮茶习惯对大鼠进行长期灌胃，探讨凤冈锌硒茶是否有减肥作用，为预防肥胖提供科研证据。

1 材料与方法

1.1 材料 成年健康SD雄性大鼠30只，体质量(180±15)g，购自第三军医大学大坪实验动物中心[合格证号：SCXK(渝)2012-0005]。适应性喂养1周后按照8 g/100 g投喂高脂高糖干饲料自由摄食和饮水，其饲料成分为70%基础饲料、10%猪油、12%白糖、8%鸡蛋；其主要营养成分供能比例为脂肪12.05%、碳水化合物66.14%、蛋白质10.33%，总热量21.64 kJ/g。实验动物饲养于贵州遵义医学院公共卫生学院动物房，饲养温度(20±2)℃，相对湿度(60±5)%，通风良好，明暗周期12 h。凤冈锌硒茶和普通绿茶分别由贵州凤岗县万壶缘锌硒茶业有限公司、贵州味道茶业有限公司提供；电热恒温水浴箱(北京市永光明医疗仪器厂)；101-2型电热干燥箱(上海路达实验仪器有限公司)；SZ-93双蒸水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)；AL-104电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；全自动生化分析仪(贝克库尔曼特)。

1.2 模型制备及分组 剪碎称量好的适量茶叶，放入3倍量沸腾双蒸水(避免用矿泉水或自来水引入无机离子)，煎煮10 min，连续3次，合并茶水煎剂，减压浓缩至浓度为0.2 g/mL，2 000 r/min常温离心10 min，取上清液过0.22 μm微孔滤膜，-20 ℃冷藏备用。30只SD大鼠随机分为3组，即对照组、普茶组、锌硒茶组各10只。高脂饲料饲养6周后每日下午4时对大鼠进行双蒸水、普通绿茶、锌硒茶灌胃，灌胃体积均为5 mL/(kg·d)，茶暴露剂量均为0.24 g/(kg·d)。

1.3 观察指标及其检测方法 ①体质量、脂肪质量和脂肪系数:灌胃至26周,禁食12 h后空腹进行称重并麻醉，取睾丸和附睾旁脂肪放置在天平称湿重，计算脂肪系数(脂肪系数=脂肪质量/体质量×100%)。②血脂:剖杀大鼠取腹主动脉全血以3 000 r/min、10 min离心后取上清液血清用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。③脂肪组织病理学观察:取适量脂肪组织放于10%多聚甲醛溶液中固定、石蜡包埋、切片、乙醇梯度脱水、苏木精-伊红(HE)染色，200倍光学显微镜下观察脂肪组织病理变化。④脂肪组织镜下细胞计数:应用盲法由不同实验者200倍镜下采用五点取样法随机照相、再由其他实验者运用Photo Shop软件根据细胞计数原则(数上不数下，数左不数右)进行细胞计数，计算平均每个视野下细胞个数。

2 结果

2.1 各组体质量、脂肪质量、脂肪系数比较 灌胃至26周，对照组、普茶组、锌硒茶组体质量分别为(392.30±61.94)、(318.10±45.01)、(298.70±51.63)g；脂肪质量分别为(1.98±0.29)、(1.54±0.23)、(1.13±0.26)g；脂肪系数分别为0.51%±0.04%、0.49%±0.06%、0.34%±0.13%。各组大鼠体质量、脂肪质量、脂肪系数比较：锌硒茶组<普茶组<对照组(P均<0.05)。

2.2 各组血脂比较 对照组、普茶组、锌硒茶组TC分别为(1.99±0.52)、(1.47±0.34)、(1.44±0.29)mmol/L；LDL-C分别为(0.86±0.27)、(0.44±0.19)、(0.38±0.10)mmol/L，TG分别为(0.85±0.35)、(0.61±0.29)、(0.59±0.17)mmol/L，各组TG、LDL-C比较：锌硒茶组<普茶组<对照组(P均<0.05)；而尽管TC水平在各组间差异无统计学意义(P=0.196)，仍表现出锌硒茶组<普茶组<对照组的变化趋势。对照组HDL-C[(1.10±0.32)mmol/L]高于普茶组[(0.77±0.17)mmol/L]及锌硒茶组[(0.86±0.27)mmol/L](P均<0.05)。

2.3 各组脂肪组织病理学变化 脂肪组织镜下观察到对照组脂肪细胞体积大于其他两组，锌硒茶组细胞排列较整齐,细胞面积小于对照组，略小于普茶组。见图1。

图1 脂肪组织病理学表现(×200)

2.4 各组脂肪组织镜下细胞计数比较 平均视野细胞数：锌硒茶组[(85.40±31.12)个/视野]>普茶组[(61.84±23.31)个/视野]>对照组[(55.54±15.69)个/视野](P均<0.05)。

3 讨论

有研究提出，快速饮食与体质量升高呈正相关[8]，目前对肥胖的有效治疗采用生活方式干预、药物和手术治疗[9]。目前减肥方式主要通过运动和节食，而运动需时较长不易坚持，节食对胃肠功能不利。已有研究显示，茶具有减肥功效，通过饮茶减肥或预防肥胖引起人们关注。国外研究认为，单纯性肥胖血锌含量缺乏[10]，门诊糖尿病患者血硒有76%低于正常参考值范围，糖尿病患者补硒后，降低了其血中的脂质过氧化物[11]。参照中国居民膳食微量营养素平均需要量，人群中男性和女性锌摄入不足比例分别为69.2%和29.2%，硒摄入不足的比例分别为49.6%和65.4%。

贵州凤冈锌硒茶先后43次荣获国家级和国际茶博会金牌、获农业部农产品地理标志产品登记。全区土壤锌最高含量为245.7 mg/kg，平均含量为116.0 mg/kg，超过了我国茶园土壤锌的平均含量。有研究显示，新鲜嫩芽中锌硒含量与土壤呈正比，均比老叶高，凤冈锌硒茶以新鲜嫩芽为原材料，检测发现其含锌、硒量高[12]，为富含锌硒产品。茶中因含有儿茶素和咖啡因增加能量代谢导致体质量下降利于减肥和维持体质量[13]，儿茶素类化合物具有较强的抗氧化特性，普通绿茶儿茶素含量一般在10%～20%，而凤冈锌硒茶高达20.08%，可作为维持或增强能量消耗和增加脂肪氧化的工具，另外茶多酚[13]、没食子儿茶素、没食子酸酯、咖啡因混合物也有微小降血脂作用。在本实验中，普茶组、锌硒茶组均有减肥效果，可能就是基于以上几个因素。在本研究中还发现，茶叶有减肥效果的同时，凤冈锌硒茶的减肥效果要优于普通绿茶。其原因考虑如下：富硒绿茶的氧化活性远高于普通绿茶，锌可调节食欲，有脂质抗氧化作用；绿茶通过减少食物摄入，中断脂质乳化和吸收，抑制脂肪形成和脂质合成以及通过发热、脂肪氧化和粪便脂质排泄增加能量消耗，在脂肪代谢中起重要作用[14]。本试验发现饮用茶水制剂可减肥、有清脂的效果，主要表现为体质量降低、调节脂代谢、脂肪细胞体积变小；锌硒茶组上述效果优于普茶组。

综上认为，凤冈锌硒茶的减肥效果优于普通绿茶，其可能与凤冈锌硒茶中富含抗氧化能力强的锌、硒元素有关。

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