刘东霞 李富伟 北京科为博生物科技有限公司 100081
郑瑞峰 王玉田 潘兴亮 北京市畜牧总站 100029
屎肠球菌是农业部允许使用的微生物饲料添加剂,由于其具有许多优点,因此在乳仔猪饲料中广泛应用。首先,屎肠球菌属于兼性厌氧菌,抗逆性相对较强;其次屎肠球菌在动物肠道可以正常定植,且生长代谢快、粘附能力强,肠道有益菌群中屎肠球菌占8%~16%;最后,屎肠球菌可产生益生抑菌物质,增强机体免疫力。屎肠球菌在体内发酵糖类,产生大量的乙酸和乳酸,使肠道内的pH和氧化还原电位值Eh下降[1]。相对而言,粪肠球菌抑菌范围较窄,屎肠球菌抑菌范围较宽,除了对致病型肠球菌还对李斯特菌属、梭状芽孢菌属及丙酸杆菌属都具有抑制作用。但屎肠球菌的耐热性较差,在饲料加工过程中低温制粒及二次制粒中存活率较低。
本试验以北京科为博研究所自主研发的耐热型屎肠球菌产品为研究对象,通过在乳仔猪饲粮中添加,探讨其对乳仔猪生产性能和腹泻率的影响。
(1)试验材料。试验用耐热型屎肠球菌由北京科为博研究院研制并提供,有效活菌数为123×108CFU/g。
(2)试验动物与设计。试验采用单因子设计,选取80 头(30±2)日龄,平均体重为(8.17±0.05)kg 的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,按体重、性别和胎次基本一致原则分为2个处理组,每组4个重复,每个重复10头仔猪(公、母各半),每个重复为1栏。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.05%的屎肠球菌。试验期40天。两组仔猪日粮组成和营养水均相同,参照 NRC(2012)设计基础日粮(表 1)。
表1 日粮组成及营养水平(%,基础日粮)
(3)饲养管理。试验前充分冲洗和严格消毒猪圈。试验期间每天喂料5次,以食槽略剩料为原则。试验仔猪在漏缝地面上饲养,自由采食、自由饮水。圈舍自然通风,定期打扫,常规接种免疫,试验期为40天。
(4)指标测定及方法。①生产性能。试验全程以重复(栏)为单位记录采食量,分别于试验第1天和第41天早上08∶00点对空腹仔猪称重,计算每头仔猪的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。具体计算方法如下:平均日增重(ADG,kg/天)=栏总增重/(栏仔猪数×试验天数);平均日采食量(ADFI,kg/天)=栏饲粮总消耗量/(栏仔猪数×试验天数);料重比(F/G)=ADFI/ADG。
②腹泻率。试验期间每天09∶00观察仔猪粪便,并做好记录。腹泻率(DR,%)={(每栏仔猪腹泻头数×腹泻天数)/(每栏仔猪总数×试验天数)}×100%。
③血液生化指标。试验第41天09∶00,每个组每个重复选1头接近平均体重的仔猪,前腔静脉采血15mL,分装成2管,常温下静置30分钟,3500r/分钟、4℃离心10分钟,分别制备血清及血浆,取上清分装于EP管中,-20℃保存,IgA、IgG、IgM含量的测定采用南京建成生物研究所的试剂盒。
(5)数据处理与分析。采用SPSS 19.0软件进行显著性方差分析,用LSD法进行多重比较。
(1)屎肠球菌对断奶仔猪生长性能的影响。由表2可知,试验组日增重显著高于对照组(P<0.05),试验组日增重比对照组高了6.78%;两组日采食量和料重比均无显著差异(P>0.05)。
表2 屎肠球菌对断奶仔猪生长性能的影响
(2)屎肠球菌对断奶仔猪腹泻率的影响。由表3可知,试验组腹泻率、大肠杆菌均显著低于对照组(P<0.05),试验组乳酸杆菌显著高于对照组(P<0.05)。
表3 屎肠球菌对断奶仔猪腹泻率的影响
(3)屎肠球菌对断奶仔猪免疫功能的影响。由表4可知,对照组和试验组差异不显著(P>0.05),但试验组有提高断奶仔猪免疫力的趋势。
表4 屎肠球菌对断奶仔猪免疫功能的影响
(1)屎肠球菌替代抗生素对断奶仔猪生长性能的影响。仔猪早期断奶极易引发机体肠道菌群失调,产生腹泻和生长停滞等断奶应激综合症,影响经济效益[2]。屎肠球菌可在仔猪肠道内定植,一方面有助于对饲粮中营养物质的消化吸收和利用;另一方面,屎肠球菌进入肠道内能与致病菌竞争,抑制有害菌的繁殖,调整胃肠道菌群平衡[3]。吴忠良[4]报道,在仔猪出生早期饲喂乳酸杆菌有明显的促生长效果,但随着时间的推移这种效果逐渐降低,断奶后第1周饲喂乳酸杆菌对生长速度已无显著影响。本试验结果显示,日粮中添加屎肠球菌可提高仔猪的生产性能,而且日增重显著高于对照组。这与刘虎传等[5]所研究的在仔猪饲粮中添加含有屎肠球菌的益生菌制剂可以增加仔猪ADG,降低F/G的结果是一致的。
(2)屎肠球菌对断奶仔猪腹泻率的影响。仔猪早期断奶易引起优势菌群更替,专性厌氧菌减少,兼性厌氧菌中大肠杆菌增加,而肠毒性大肠杆菌是导致仔猪腹泻的一个重要原因。肠毒性大肠杆菌的增殖,导致pH值和氧化还原电势迅速上升,肠毒性大肠杆菌大量繁殖的同时产生毒素,毒素刺激肠细胞,致使肠细胞分泌机能亢进,肠蠕动增强而产生腹泻,病理变化主要在小肠[6]。添加乳酸菌类微生态制剂可以有效地促进有益菌的增殖,减少有害细菌的数量,从而保持肠道菌群平衡[7]。侯成立等[8]研究表明,断奶仔猪饲粮中添加植物乳杆菌制剂能够显著增加粪中乳酸杆菌活菌数,并显著降低大肠杆菌数量。Zhang等[9]研究表明,通过饲喂鼠李糖乳杆菌可以显著降低仔猪粪便中大肠杆菌数量,显著增加乳酸杆菌和双歧杆菌数量。本试验结果表明:用发酵饲料替代抗生素后,断奶仔猪腹泻发生率显著低于对照组,而且用10%发酵饲料全部替代抗生素组效果最好。
(3)屎肠球菌对断奶仔猪免疫指标的影响。血清中IgA、IgG、IgM水平可有效反映机体的免疫机能[10,11]。免疫球蛋白分为不同的种类,其中IgA可以阻止病原体吸附到黏膜表面,从而抵挡微生物的侵袭;IgM是B细胞最早产生的免疫球蛋白分子,是初次免疫应答的主要抗体;IgG是体液免疫应答产生的主要抗体,在抗细菌、抗病毒等防御机制中起着重要作用。王永等[12]研究表明,在仔猪日粮中添加0.05%的屎肠球菌,可提高断奶仔猪抗应激及免疫能力。本试验研究结果是,添加0.05%屎肠球菌,有提高断奶仔猪免疫蛋白含量的作用,但差异不显著(P>0.05)。
本试验条件下,在基础日粮中添加0.05%屎肠球菌,其日增重均显著高于对照组,腹泻率和大肠杆菌数显著低于对照组(p<0.05),乳酸杆菌显著高于对照组(p<0.05),IgA、IgG 和 IgM 含量差异不显著(p>0.05),但试验组含量有高于对照组的趋势。
参考文献:
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[3]王婷婷,綦文涛,易建明,等.微胶囊化屎肠球菌及其特性研究[J].中国畜牧杂志 2009,45(21):52-55.
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[9]ZHANG L,XU Y Q,LIU H Y,et al.Evaluation ofLactobacillus rhamnosus GG using an Escherichia coli K88 model of piglet diarrhoea:effects on diarrhoea incidence,faecal microflora and immune responses [J].Veterinary Microbiology,2010,141:142-148.
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[12]王永,杨维仁,张桂国.饲粮中添加屎肠球菌对断奶仔猪生长性能、肠道菌群和免疫功能的影响 [J].动物营养学报,25(5):1069-1076.