金葛感冒颗粒质量标准研究

广西花红股份有限公司，广西 柳州 545007

金葛感冒颗粒为正研发中的中药制剂，处方由金银花、葛根、黄芩、板蓝根、野菊花、鬼针草、甘草等多味中药组成，具有清热解毒、疏风平肝的功效。用于感冒发热、头痛、咳嗽。为了更好的控制金葛感冒颗粒的产品质量，笔者对处方中各味药材进行了薄层定性鉴别研究，建立起对金银花、葛根、黄芩等3味药材的薄层色谱鉴别方法，取得了满意的结果。现报道如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 XC-100超声波清洗机(西安康明超声波设备仪器有限公司)；ZF1三用紫外分析仪(南京科尔仪器设备有限公司)

1.2 试药 金银花药材(批号：201502003)、葛根药材(批号：201501007)、黄芩药材(批号：201410002)、板蓝根药材(批号：201410008)、野菊花药材(批号：201501003)、鬼针草药材(批号：201501009)、甘草药材(批号：201411005)，所用药材均由广西柳州医药股份有限公司提供，经广西花红股份有限公司工程师张鹏检验合格后使用。金葛感冒颗粒及阴性样品均为自制。绿原酸(批号：110753—2130212)、葛根素(批号：752-200108)、黄芩苷(批号：715-200111)，对照组均购置于中国药品生物制品检定所。所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 金银花的薄层鉴别 取本品10 g，研细，加甲醇30 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20 mL，弃去乙醚液， 水液加乙酸乙酯提取2次， 每次25 mL， 合并乙酸乙酯，蒸干，残渣加甲醇1 mL 使溶解，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，为对照品溶液。按处方比例取除金银花外的药材适量，按制备工艺制成缺金银花样品，再按供试液制法制成缺金银花阴性对照溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述3种溶液各1～2 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上， 显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。结果如图1所示。

2.2 葛根的薄层鉴别 取本品5 g，加甲醇20 mL，加热回流30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，滤过，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取葛根素对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。按处方比例取除葛根外的药材适量，按制备工艺制成缺葛根样品，再按供试液制法制成缺葛根阴性对照溶液。参照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述3种种溶液各5 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(6∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。结果如图2所示。

2.3 黄芩的薄层鉴别 取本品2 g，研细，加乙醇10 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。按处方比例取除黄芩外的药材适量，按制备工艺制成缺黄芩样品，再按供试液制法制成缺黄芩阴性对照溶液。参照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述3种溶液各10 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果如图3所示。

3 讨论

金银花中主要含有绿原酸类(包括绿原酸和异绿原酸)、黄酮类、三萜皂苷类、环烯醚萜类、挥发油等化合物等成分[2]。现代药理研究表明[3]，金银花中的绿原酸具有抗菌、抗病毒等多种药理作用，故笔者选择其作为金银花的指标成分进行薄层鉴别研究。通过参考文献[4]及实验摸索，笔者采用了甲醇超声提取、依次用乙醚、乙酸乙酯萃取的供试液制备方法，在聚酰胺薄膜上，以醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯( 365 nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性无干扰。

葛根中异黄酮类化合物是葛根的主要有效活性成分，包括苷和苷元，包括葛根素、3-羟基葛根素、3-甲氧基葛根素、葛根素-木糖苷、大豆苷元、大豆苷、芒柄花素、染料木苷、染料木素等[5]。葛根素的药理作用主要为[6]：对脏器组织的保护、抗缺血再灌注损伤、改善血液流变学指标、调控骨代谢、抑制钙超载、降眼压、雌激素样作用等。被认为是葛根中的主要活性成分，故笔者选择其作为葛根的指标成分进行薄层鉴别研究。通过参考文献[7]及实验摸索，笔者采用甲醇回流提取、水饱和的正丁醇萃取的方法制备供试品溶液。在同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(6∶4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无干扰。

黄芩中主要成分为黄酮及其苷类，包括黄芩苷、汉黄芩甙、汉黄芩素、黄芩素、黄芩新素-I、黄芩新素-Ⅱ、白杨黄素、千层纸黄素-A等。黄芩苷[8]具有抗炎、降压、镇静、清除自由基、抗心律失常等作用，被认为是黄芩中的主要活性成分，故笔者选择其作为黄芩的指标成分进行薄层鉴别研究。通过参考文献[9]及实验摸索，笔者采用乙醇超声提取的方法来制备供试品溶液，在同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5:3:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

曾尝试对处方中板蓝根、野菊花、鬼针草、甘草等药材建立起相应的薄层鉴别方法。但实验发现，部分药材薄层色谱带与相应对照药材色谱带对比，无对应色谱斑点或存在阴性有干扰等现象，故目前尚无法建立起相应的薄层鉴别方法，有待再今后的研究工作中进一步完善。

综上，分别针对金银花、葛根、黄芩建立起薄层色谱鉴别方法，阴性无干扰，方法操作简便，做作为该制剂的质量控制方法。

参考文献

[1]中国药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：中国医药科技出版社，2010：205-206.

[2]周建玉. 金银花中化学成分分析研究进展[J]. 天津药学，2009，21(5)：60-62.

[3]吴卫华，康桢,欧阳冬生，等. 绿原酸的药理学研究进展[J]. 天然产物研究与开发，2006，18(4)：691-694.

[4]王晖，袁海铭,陈梅荣. 羚羊感冒片薄层鉴别研究[J]. 江西中医药，2008，39(2)：45-46.

[5]刘永录，赵引娣. 葛根保健作用的化学及药理学基础研究近况[J]. 河北中医，2008，30(4)：435-437.

[6]白东义，佟春玲. 葛根素的药理作用及其临床应用研究进展[J]. 江苏中医药，2009，41(3)：76-78.

[7]黄顺旺，曹明成. 参苏感冒胶囊的质量标准研究[J]. 中国实验方剂学杂志，2008，14(3)：13-14.

[8]王立娟，赵园园. 中药黄芩的研究概况[J]. 中国科技信息，2009，15：226，228.

[9]文敏，李雪. 黄芩苷药理作用研究新进展[J]. 沈阳药科大学学报，2008，25(2)：158-162.

[10]温勇，王德杭，陈瑞云，等. 小柴胡汤的质量标准研究[J].中药新药与临床药理，2009，20(6)：562-566.