布鲁氏菌病假阳性血清的制备方法

余绍荣 侯明省 冯德正 张书光

（1.陇川县动物疫病预防控制中心，云南德宏 678700；2.梁河县动物疫病预防控制中心，云南德宏 678700；3.德宏州动物疫病预防控制中心，云南德 678400）

布鲁氏菌病（又称布鲁菌病，简称布病）是由布鲁氏菌感染引起的一种人畜共患疾病。患病的羊、牛等疫畜是布病的主要传染源，布鲁氏菌可以通过破损的皮肤黏膜、消化道和呼吸道等途径传播。急性期病例以发热、乏力、多汗、肌肉、关节疼痛和肝、脾、淋巴结肿大为主要表现。慢性期病例多表现为关节损害等。布病是我国《传染病防治法》规定的乙类传染病。

传染源：羊在国内为主要传染源，其次为牛和猪。传染途径：牧民接羔为主要传染途径，兽医为病畜接生也极易感染。此外，剥牛羊皮、剪打羊毛、挤乳、切病毒肉、屠宰病畜、儿童玩羊等均可受染，病菌从接触处的破损皮肤进入人体。实验室工作人员常可由皮肤、黏膜感染细菌。进食染菌的生乳、乳制品和未煮沸病畜肉类时，病菌可自消化道进入体内。此外，病菌也可通过呼吸道黏膜、眼结膜和性器官黏膜而发生感染。易感人群：人群对布鲁菌普遍易感。2010年12月间，某大学动物医学学院使用了不具检疫合格证明、未经现场检疫的实验山羊，导致从2011年3月14日至5月间，27名学生和1名教师相继确诊感染布病。因此很有必要制备出对人体无感染能力的布鲁氏菌病假阳性血清，用于实验比对、教学示范和基层培训。

1 材料与方法

1.1 材料

布病阴性牛羊血清，真空采血管（普通生化管、抗凝管），布病虎红平板凝集试验抗原，布病试管凝集试验抗原。

1.2 使用抗凝管采取布病阴性牛羊血液

使用抗凝管采血（布病阴性牛10头，羊5只），分离血清后编号为B1-B10，C1-C5。

1.3 虎红平板凝集试验

将分离到的阴性血清使用虎红平板凝集试验进行检测，记录检测结果。

2 实验结果

B1～B10和C1～C5号血清和布病抗原混合后3min内均出现凝集（见表1、表2）：

表1 虎红平板凝集试验结果（牛）

表2 虎红平板凝集试验结果（羊）

3 讨论

在一次采样过程中由于疏忽未带普通生化管，而只准备了抗凝管，由于抗凝管也可以分离出血清就使用抗凝管进行采血，在随后的虎红平板凝集试验检测中发现全部都是阳性，重新用普通管采血后进行复检，结果全部阴性，因此判定为假阳性。鉴于布鲁氏菌病是人畜共患病，开展这个实验具有高危险性，经过反复思考，这个小错误恰好可以被我们利用。因此我们对这种现象反复进行实验，实验结果表明，实验采集健康牛羊的抗凝血均检测到布鲁氏菌病抗体，为布鲁氏菌病假阳性。这种血清来源广泛并且可以大量制备，用于实验比对、教学示范和基层培训中，既可以起到示范作用，又能保障参与人员的安全。