李昊
摘要:猪赤霉烯酮中毒是由于食入过多霉变玉米而引起,是一种对动物和人具有较大危害的霉菌毒素中毒,主要是引起繁殖障碍、免疫抑制,诱发肿瘤,影响生长发育等,尽管具有较低的死亡率,但依旧会损害养猪业的经济效益。现介绍玉米赤霉烯酮的理化性质,以及猪中毒后的临床症状、实验室检查、防治措施。
关键词:猪;赤霉烯酮中毒;理化性质;临床症状;剖检变化;实验室检测;药物治疗;饲料管理
中图分类号:S858. 28
文献标识码:B
文章编号:2095-9737(2018)05-0096-01
1 赤霉烯酮的理化性质
赤霉烯酮也叫做F- 2毒素,共有12个化学衍生物。赤霉烯酮是由镰孢菌属真菌生成的一种非类固醇类真菌毒素,具有雌激素作用,同体内雌二醇受体之间存在特殊的亲和力。赤霉烯酮无法在水、四氧化碳和二硫化碳中溶解,可在碱性溶液、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿以及苯等中溶解。赤霉烯酮溶解在甲醇溶液后,照射254 nm短紫外光会发出明亮的绿蓝色荧光。赤霉烯酮具有内酯结构,因此在碱性条件下能够打开酯键,而在碱性浓度降低时酯键就会恢复。
2 临床症状及剖检变化
临床上猪发生赤霉烯酮中毒可呈现两种类型,即急性中毒和慢性中毒。猪发生急性中毒时,主要表现出兴奋不安,全身肌肉振颤,步态蹒跚,往往会突然倒地死亡。另外,伴有黏膜发绀,体温基本没有明显改变,神情呆立,排出水样稀粪,呈灰褐色,其中混杂肠黏液,并散发恶臭味,经常排尿,尿液呈淡黄色。此外,病猪外生殖器发生肿胀,精神沉郁,食欲不振,发生腹泻,并伴有腹痛。慢性中毒时,主要会给母猪造成较大危害,造成其外生殖器充血、肿大,容易发生延期流产和产出死胎,有时还会产木乃伊胎。另外,患病母猪中大约有50%会发生卵巢囊肿,容易出现经常发情和假发情的现象;育成母猪的乳房明显肿大,自行泌乳,且会引发乳房炎,导致受胎率降低。此外,公猪发生中毒后会导致包皮积液,食欲减退,生长发育不良,且严重掉膘。
剖检急性死亡的病猪,发现胸、腹腔大量出血,浆膜表面存在淤血斑,肩胛下区和大腿前的皮下肌肉发生出血,肠道也发生出血,肝脏出现针尖状或者瘀斑状的出血,心内外膜也都存在明显出血。剖检慢性死亡的病猪,主要是胸腹腔积液,肝脏发生硬变,肝脂肪发生变性,肝细胞内出现颗粒状的透明样变性,肾脏变得苍白,发生肿大,肠道出血,有时结肠浆膜发生胶样浸润,淋巴结发生水肿、充血。
3 实验室检测
毒素提取。取20 g猪场玉米粉料,添加适量清水制成30%的混悬液,放入120 mL二氯甲烷于索氏提取器中处理16 h,在达到高浓度色素时将二氯甲烷转移到蒸发器中不断进行浓缩,直到变成糖浆状黏稠,但注意不可彻底蒸干。接着将其转移到分液漏斗中,然后使用石油醚进行冲洗,再添加50 mL乙腈充分振荡,使其完全混合,静置待其分层,在底部的乙腈层中就含有赤霉烯酮,而上部石油醚层中含有大多数色素。如果发生乳化或者转化现象,可加入少量的石油醚进行矫正。分取乙腈层后,再在上部的石油醚层中加入25 mL乙腈继续提取赤霉烯酮,混合乙腈提取物,之后转移到小锥形管(注意带有刻度)中,接着添加二氯甲烷或者氯仿,直至达到4 mL,用于进行下一步实验。
薄层层析。取厚度为0. 25 mm的硅胶G薄层板,放在100℃条件下进行1h活化,接着在薄层板上滴加50 μL之前制备的提取物,再使用95:5氯仿 乙醇作为展开剂,待展开后放在紫外灯下进行检查,详细记录Rf值,之后同标准品进行对照,再详细记录结果。
检测结果。通过紫外线灯检查能够看到蓝绿色的荧光点,其相应Rf值为0.5,放在长波(450 nm)紫外线灯下照射会促使荧光强度增大;在薄层板上分离后的纯化物,喷洒50%硫酸钾醇溶液进行处理,可使样点马上变成淡绿色,接着又快速变成黄色。这些情况都是赤霉烯酮的特有现象,由此可说明玉米样品中存在赤霉烯酮。另外,通過与标准品进行比较,即可进一步计算玉米样品中所含的赤霉烯酮量。
4 防治措施
药物治疗。病猪要先立即停止饲喂霉变玉米,改成饲喂品质优良的玉米,并供给充足的糖盐水,同时增加饲喂一些青绿多汁饲料。如果病猪症状严重,可静脉注射由200~500 mL 10%葡萄糖注射液、5~10 mL维生素B1、10~20 mL维生素C组成的混合溶液,每天1次,连用5天。通过以上措施,经过10天就能够减轻病情,经过2周即可痊愈。
严格检查饲料原料。污染的谷实类作物中通常都含有赤霉烯酮,如玉米、小麦、大麦等,因此要求严控饲料原料关。例如,要仔细检查玉米是否发生霉变,通过感官检查可见新鲜玉米有整齐籽粒,没有发酵、结块,不存在虫体,没有残留农药,散发新鲜玉米气味,没有霉味、酸败味、异味。我国规定玉米等谷物及其制品,如玉米面(渣、片)、小麦粉等,每千克所含的赤霉烯酮在60 mg以下。
加强饲料管理。任何喂猪的饲料或者所用的原材料,必须储存在阴凉、通风的地方,防止温度过高和受潮。如果玉米发生严重霉变,明显变绿,建议进行报废处理。也可添加其他有机酸类及其盐类,如苯甲酸、山梨酸、乙酸以及其盐类,现在通常使用复合酸用于抑制霉菌。