厩舍粪便污染致雷州山羊颈部化脓创诊疗

涂轲

摘 要 目的：探索氯化钠溶液与粉末治疗化脓创的效果；筛选致病菌敏感的抗生素，为化脓创的有效治疗提供依据。方法：用厩舍粪便污染山羊颈部两侧人造创口，化脓后一侧用氯化钠粉剂、另一侧用10%氯化钠溶液治疗；同时，取脓汁进行细菌的分离培养、鉴定及药敏试验。结果：本实验厩舍粪便污染导致化脓的致病菌是革兰氏阴性短杆菌，该菌对头孢类药物敏感；氯化钠粉和10%氯化钠溶液对治疗化脓创都有确切可靠的治疗效果。

关键词 化脓创；氯化钠；山羊

1 实验材料

1.1 实验动物

山羊1只，体重20公斤。由广东海洋大学农学院动物遗传实验室繁养。饲以饲草及玉米粉。实验期间自由摄食、饮水。

2 实验方法

2.1 人造化脓创

收集污染源：从山羊的厩舍随机选取五个点取适量粪便置于洗净的托盘中，混匀。

致感染化脓创：用1：1000浓度的新洁尔灭溶液对手术器械进行浸泡消毒。将山羊保定好，在左侧颈部下三分之一处将毛剪净，用酒精棉球消毒术部后，用一次性注射器抽取0.5%普鲁卡因作局部浸润麻醉。待麻醉起效后，沿血管走向用手术刀在两侧术部分别作长约3cm割破皮肤的伤口，然后用手术刀柄将伤口下的皮肤与肌肉组织分离。将准备好的污染源粪便填塞到伤口内。右侧颈部以同样方法处理。

2.2 化脓菌的培养分离鉴定

2.2.1 培养基的配制

肉汤琼脂培养基：根据琼脂培养基配制方法，称取肉汤营养琼脂34.5g，置于大烧杯内，加入蒸馏水1000ml，加热溶解后，以三角瓶分装，牛皮纸封口。

肉汤培养基：称取肉汤培养基19.5g，加入蒸馏水至1000ml，加热溶解后，以大试管分装，肉汤量不超过试管容量的三分之二，加盖试管塞。

2.2.2 灭菌

将实验所需器械及配制完成的培养基用牛皮紙包扎好后，置于高压蒸汽灭菌锅中，在121℃下灭菌30min。

超净工作台紫外线照射30min，打开抽风设备，保持无菌环境。

3 分离培养鉴定

去除伤口上及周围的污染物，用去除针头的一次性注射器分别从对照组和治疗组两个伤口内抽取无被外界污染的脓液，盖上针头，做好标记。

取出肉汤琼脂培养基放于超净工作台，冷却到约50℃时倒平板，晾凉至平板凝固。每个平板培养基厚度控制在2-3mm。平板凝固后倒置备用。

无菌条件下将样品注入平板中，用涂布器涂满平板，做好标记后置于恒温培养箱中37℃，24h培养后，观察菌落形态及生长情况。挑取单个可疑菌落于新琼脂平板中划线培养，做好标记后在恒温培养箱中37℃下经过24h后，挑取单个菌落进行抹片，作革兰氏染色，在油镜下鉴别细菌形态。

挑取单个菌落接种至肉汤培养基中。每个可疑菌落接种一个肉汤培养基。于37℃恒温培养箱中培养24h。

3 制作好的菌液置于4℃冰箱中保存。

3.1 药敏实验（纸片法）

在超净工作台中无菌条件下用移液枪吸取0.1ml菌液至营养琼脂平板上，用涂布器涂布均匀后，一个平板分散贴上4-5片不同药物的药敏片，一种细菌使用18种药物。置于37℃恒温培养箱中感作20-24h。测量抑菌圈直径，结果按抑菌圈直径大小和各抗菌药的NCCLS标准，评定为高度敏感、中度敏感或耐药。

3.2 临床诊断

每两天对实验动物的体温、脉搏、呼吸进行一次测量，以监测动物机体变化情况。判断化脓创创腔深度、化脓严重程度和化脓创的愈合程度。根据诊断结果进行治疗方法调整。

4 结果

4.1 污染致化脓创的结果

对照组与实验组的伤口均在第二天出现少量稀薄水样白色脓汁，第三天出现量较多浆糊状浑浊脓汁并开始出现红、肿现象，第四天出多量浓稠黄色脓汁并伴有恶臭气味，伤口比第三天肿得更大。

4.2 化脓菌的培养鉴定

镜检肉汤琼脂培养基和肉汤培养基中的细菌可以判断对照组与实验组的致化脓菌均为革兰氏阴性菌。

4.3 药敏试验结果

在药敏试验的十八种药物中，致山羊化脓创的主要细菌对四种药物高度敏感，六种药物不敏感。从大多药物抑菌圈大小相近可看出对照组与治疗组的致病菌应为同一种菌，这与同一污染源的条件相符。致山羊化脓创的致病菌对头孢拉定、头孢唑林、头孢克肟、头孢氨苄这四种头孢高度敏感，对复方新诺明、诺氟沙星、克林霉素、林可霉素、阿米卡星、克拉霉素这六种药物不敏。

4.4 临床诊断的结果

在致化脓创之后，山羊体温呼吸心率的均呈上升趋势，第六天后开始平稳下降。山羊的三个常规生理指标在致化脓创后均有上升高于正常值。

4.5 化脓创治疗结果

在致化脓创第四天时抽取了伤口脓汁作化脓菌的培养分离鉴定后开始对山羊的创口进行治疗。以左侧作治疗组右侧为对照组。由于对照组的伤口创腔较深，需在创腔底部作一个反切口。第五、六天（治疗第二、三天）治疗组与对照组均有乳白色浓稠脓汁，但量比治疗前要少，实验组的伤口可见一层干燥的薄痂，第七天实验组的脓汁颜色变浅，第八天实验组为稀薄半透明白色脓汁，干痂变厚，对照组有少量黄白色浑浊脓汁并也出现了干痂，两侧伤口均已消肿，第九天治疗组与对照组均无明显脓汁（见附录图5、6），开始转入肉芽创处理。

5 讨论

新鲜污染创被厩舍粪便后出现明显的化脓创病症，说明家畜创伤没有得到及时正确的处理治疗很容易发展为感染化脓创。山羊在化脓创期间，体温、呼吸、心率均超出正常值，伤口出现典型的炎症症状：红、肿、热、痛。

化脓菌的种类有很多，本实验中的治疗组与对照组的化脓菌的培养分离鉴定结果均为革兰氏阴性菌。由于实验条件限制，没能再进一步研究该菌为具体的哪种菌，若有条件完善试验，应鉴定出化脓菌，这样对临床治疗可以提供更好依据 。由于抗生素的滥用及其他原因，现在细菌的耐药性日益严重，实验中的十八药物中，化脓菌只对其中头孢拉定、头孢唑林、头孢克肟、头孢氨苄四种药物的药敏试验为高度敏感，对复方新诺明、诺氟沙星、克林霉素、林可霉素、阿米卡星、克拉霉素这六种药物为不敏，所以，在临床治疗化脓创的全身感染使用抗生素时，应先做药敏试验，再根据药敏试验结果用药，这样才能得到理想的治疗效果。

由于操作、实验条件等原因，治疗组跟对照组的伤口大小不完全相等，每天清洗伤口会对伤口进行一定刺激，这都对治疗效果的对比可能存在着影响。本实验只对比了氯化钠粉与10%氯化钠溶液的治疗效果，但没有考虑氯化钠粉的剂量与氯化钠溶液的浓度。

参考文献：

[1]李乡城. 四川部分地区山羊皮下脓肿的细菌学分析[D]. 四川农业大学，2016