妊娠晚期宫颈沙眼衣原体及其不同基因型感染与胎膜早破相关性研究

肖超群 潘淑敏 李仲均 黄素然

1南方医科大学南方医院妇产科（广州 510515）；2东莞市人民医院妇产科（广东东莞 523000）

沙眼衣原体（chlamydia trachomatis，Ct）感染是世界范围内最常见的一种性传播疾病，不仅导致女性输卵管源性不孕［1］、异位妊娠、盆腔炎等生殖健康疾病，也会导致胎膜早破等妊娠并发症。大量文献表明，胎膜早破与沙眼衣原体感染有关［2-4］。目前根据主要外膜蛋白免疫表位的变异可以将Ct分成15种基因型：A、B、C型引起沙眼；D、E、F、G、H、I、J、K型主要引起泌尿生殖道感染；L1-L3与性病淋巴肉芽肿相关［5］。不同基因型的沙眼衣原体毒力和致病性不同，对药物的敏感性也不相同。目前国内有关妊娠期Ct感染的分型研究主要集中在妊娠早期，未见妊娠晚期研究报道；也未见Ct感染不同基因型与胎膜早破的相关性研究。本研究分析了4 835例妊娠晚期孕妇宫颈Ct、Ct基因型检测结果及分娩资料，总结了妊娠晚期孕妇沙眼衣原体感染及其基因类型与胎膜早破发生的关系，现报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象研究纳入2015年1月至2017年7月南方医科大学南方医院及东莞市人民医院妇产科门诊行宫颈分泌物沙眼衣原体及其分型检查的全部符合入组条件单胎孕妇4 835例。宫颈沙眼衣原体检查适应证：宫颈脓性分泌物、阴道清洁度Ⅱ-Ⅲ度、因输卵管不通行IVF、有Ct感染史或孕早期确诊Ct感染、慢性盆腔炎病史、孕妇要求行该项检查等。入组条件：单胎、孕周为28～41周、无宫颈手术史、无中孕自发流产及2次以上早产史、无其他胎膜早破高危因素。Ct阳性者均未行药物治疗。

1.2 研究方法按孕周不同将孕妇分为28～33+6周组（A组）、34～36+6周组（B组）、37～41周组（C组），三组中Ct阳性孕妇分别设为A1、B1、C1组，为研究组；三组中Ct阴性孕妇设为A2、B2、C2组，为对照组。统计宫颈沙眼衣原体的感染率和感染基因类型，分别比较各研究组和对照组胎膜早破的发生率和发生时间及不同Ct基因型胎膜早破的发生率。

1.3 Ct检测及ompl基因型检测方法常规消毒外阴，窥阴器暴露宫颈，无菌棉球擦净阴道壁与宫颈外口，无菌棉拭子插入宫颈1～1.5 cm处旋转2周并停留30 s，标本采集后24 h内送实验室进行检查。提取Ct基因组DNA为模板，巢式PCR扩增Ct ompl基因VD1⁃VD3并测序分型，方法参照文献［6］。

1.4 统计学方法采用SPSS 17.0软件处理，计量资料以表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较4 835例孕妇按孕周分组，A组1 154例（23.87%），B组1 696例（35.08%），C组1 985例（41.05%）。Ct阳性总例数277例（阳性率为5.73%），不同孕周Ct阳性率比较差异无统计学意义，各研究组和对照组平均年龄和平均孕周无统计学差异。各组中Ct阳性率、平均年龄、孕周见表1。

2.2 不同孕周的研究组中Ct感染基因型A1、B1、C1组中均检出D、E、F、G、H、I、J、K基因型，未见其他基因型。A1组中表达较多的基因型顺序为E、F、D、J，4种基因型合计占85.07%；B1和C1组中表达较多的基因型顺序均为E、D、F、J，分别占84.69%和占89.29%，表明在孕晚期不同孕周中Ct感染的基因型表达主要为E、D、F、J型，E型表达最多，I型表达最少。孕晚期E、D、F、J型的总表达率分别为E型38.27%（106/277）、D型18.05%（50/277）、F型 17.69%（49/277）、J型 12.64%（35/277）。另外多重感染有11例，分别为E+J型2例、D+E型2例、D+F型1例、E+F型1例、D+J+K型1例、E+F+J型1例、D+K型1例、F+I型1例、H+J型1例。各基因型在不同孕周表达差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表1 4 835例研究对象分组及各组内年龄、孕周比较Tab.1 Riterion of grouping and comparison of ages and gestational weeks among groups ±s

表1 4 835例研究对象分组及各组内年龄、孕周比较Tab.1 Riterion of grouping and comparison of ages and gestational weeks among groups ±s

分组28～33+6周组（A组）例数［例（%）］67（5.81）1 087（94.19）34～36+6周组（B组）98（5.78）1 598（94.22）37～41周组（C组）研究组（A1）对照组（A2）P值研究组（B1）对照组（B2）P值研究组（C1）对照组（C2）P值112（5.64）1 873（94.36）年龄（岁）28.12±2.34 28.31±2.46＞0.05 27.82±2.56 28.41±2.66＞0.05 27.36±1.78 28.12±2.29＞0.05孕周（周）30.32±1.68 30.16±1.24＞0.05 35.21±1.54 35.19±1.46＞0.05 39.23±1.89 38.65±2.12＞0.05

表2 不同孕周研究组中Ct基因型表达情况Tab.2 Ct genotypes expression in study group during different gestational weeks 例（%）

2.3 不同孕周研究组和对照组中胎膜早破的发生率及发生时间比较见表3。28～33+6周组（A组）中，研究组胎膜早破率为67.16%，与对照组（8.37%）相比差异有显著统计学意义（P＜0.01）。研究组胎膜早破时间平均为（33.61±3.46）周，多为早产胎膜早破；对照组胎膜早破平均（38.43±2.61）周，多为足月胎膜早破，两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。

34～36+6周组（B组）中，研究组胎膜早破率为44.90%，对照组为7.57%，研究组明显高于对照组（P＜0.01）。研究组也较多早产胎膜早破，破水时间平均为（36.39±2.12）周；对照组均为足月胎膜早破，平均（39.13±2.26）周，两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。

37～41周组（C组）中研究组和对照组胎膜早破率分别为23.21%和7.05%，两者相比差异有统计学意义（P＜0.01）。两组胎膜早破时间比较差异无统计学意义。

比较A、B、C三组中胎膜早破发生率和发生孕周：检出Ct感染的时间越早，胎膜早破发生率越高，平均胎膜早破时间越早，三者相比差异有统计学意义（P＜0.05）。无Ct感染者胎膜早破时间多在足月，发生率均在较低水平，三组相比无明显差异。

表3 不同孕周研究组和对照组中胎膜早破的发生率及发生时间比较Tab.3 Comparison of PROM rate and its outbreak time between study groups and control groups during different gestational weeks ±s

表3 不同孕周研究组和对照组中胎膜早破的发生率及发生时间比较Tab.3 Comparison of PROM rate and its outbreak time between study groups and control groups during different gestational weeks ±s

项目A1 A2 P值B1 B2 P值C1 C2 P值总例数67 1 087 98 1 598 112 1 873胎膜早破例数［例（%）］45（67.16）91（8.37）＜0.01 44（44.90）121（7.57）＜0.01 26（23.21）132（7.05）＜0.01胎膜早破时间（周）33.61±3.46 38.43±2.61＜0.05 36.39±2.12 39.13±2.26＜0.05 38.62±1.94 39.18±1.37＞0.05

2.4 不同Ct感染基因型胎膜早破的发生情况胎膜早破发生率最高的Ct基因型为E型（19.81%），其次为 F（16.33%）、K（14.29%）、D（12.0%）、J（8.57%）、G（1.33%），H和I型未见胎膜早破。见表4。

表4 Ct不同基因型胎膜早破的发生情况Tab.4 PROM rate of different Ct genotypes 例

3 讨论

大多数女性感染沙眼衣原体并无明显症状，由于缺少及时的诊断和有效治疗，沙眼衣原体感染可导致多种妇科疾病和不良产科并发症。国外报道孕期女性沙眼衣原体感染率与非孕期女性相似，约为0.7%～17.0%，但不同人种和地域差异较大［7］。美国孕妇感染率为5.5%［8］，巴西为11.0%［8］，澳大利亚为 3.2%［9］，肯尼亚为 14.5%［10］。我国有关孕期沙眼衣原体感染的研究多集中在孕早期，发病率报道不一，多小于10%。本研究结果显示孕晚期Ct感染率为5.73%，与所报道的孕早期Ct感染率比较无明显增加。

女性沙眼衣原体感染分型各研究中报道不一。DHAWAN等［11］对477例不孕妇女行Ct检测和分型，发现主要感染基因型为E型（46.7%）、D型（32.0%）、F型（21.3%）。YAMAZAKI等［12］发现女性宫颈样本中Ct型主要为D（30.0%）、B（2.5%）、E（7.5%）、F（12.5%）、G（0.5%）、I（12.5%），J（5.0%），K（10%）。目前未见孕晚期沙眼衣原体感染基因型分型研究。本研究发现，孕晚期感染的沙眼衣原体主要基因型为 E（38.27%）、D（18.05%）、F（17.69%）、J（12.64%），并且在晚孕早期、晚孕中期及足月期主要基因型均为E、D、F、J，其他基因型，多重感染较少。说明该几种基因型的沙眼衣原体可能与孕晚期沙眼衣原体感染相关并发症有重要关系。

胎膜早破和早产是妊娠常见并发症，与生殖道感染有重要关系。国内外很多研究在胎膜早破患者宫颈分泌物中找到Ct感染证据，说明Ct感染与胎膜早破有关。ROURS等［13］利用不同方法检测早产胎盘胎膜中的沙眼衣原体，PCR法发现25%的感染率，组织病理学检查则发现40%的感染率；Ct阳性者，54%发生早产，Ct阴性者仅36%发生早产，说明Ct感染是早产的危险因素。本研究结果显示，在晚孕早期、晚孕中期和足月期，沙眼衣原体感染者胎膜早破发生率均远远高于同期无感染者，且发现感染孕周越小，胎膜早破发生越早、发生率越高，说明Ct感染与胎膜早破相关。对妊娠期妇女进行宫颈Ct早期检查、早期干预，对减少孕期胎膜早破和早产的发生具有重要意义。本研究还显示，易导致胎膜早破的Ct基因型依次为E、F、K、D、J、G，且E、F、K、D导致较高的胎膜早破率，说明大多数Ct基因型均可导致胎膜早破，H和I型虽未见胎膜早破，是否与样本量不足有关尚需探讨。如能针对沙眼衣原体不同基因型应用相应敏感药物或可增加治疗效果，减少并发症发生。

由于本研究未能对入组孕妇胎膜早破后进行Ct病原学检查，故不能说明该胎膜早破就是由Ct引起，也可能由其他感染因素导致。进行沙眼衣原体感染孕妇破膜后病原学验证是本研究进一步的工作。

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