北京动物园爬行动物肠道寄生虫的普查

卢 岩， 孙亚美， 王 昕， 张成林

(1.圈养野生动物技术北京市重点实验室，北京 西城 100044；2.北京动物园，北京 西城 100044)

寄生虫病是危害爬行动物的一类常见疾病，野生和圈养的爬行动物受到各式各样的体内和体外寄生虫的感染。 大量的寄生虫感染对爬行动物的正常生存与繁殖影响极大，一方面是造成圈养爬行动物生病和死亡的直接原因，另一方面寄生虫感染降低了爬行动物机体的抵抗力，使其对其他疾病易感，从而发病，甚至死亡。 针对这种情况我们于2007 年对园内两栖爬行馆内的爬行动物开展了寄生虫普查工作。 通过对比直接涂片法与肠胃寄生虫检测试剂盒法对爬行动物肠道寄生虫的阳性检出率，来为临床粪检化验提供参考。 通过对比寄生虫图谱，确定寄生虫种类，有助于临床的合理用药。

1 材料与方法

1.1 仪器与器械 采样需要的容器(粪便盒)，常规实验室粪检所用的仪器物品(显微镜、载玻片、盖玻片等)，无菌生理盐水，一次性灭菌试管和吸管，Ovatec Plus System 胃肠寄生虫检测试剂盒(96-0562)(由美国Synbiotics 公司生产，上海必优生物科技有限公司经销)。

1.2 粪便采集 用粪便盒采集动物排出的新鲜粪便，登记编号后送往实验室。

1.3 受检动物 我园两栖爬行馆饲养的部分爬行动物，取自各个笼舍，共21 种，25 只。

1.4 方法

1.4.1 直接涂片法(方法1) 收集爬行动物的新鲜粪便，取少量粪便用无菌生理盐水稀释于灭菌试管中，混匀后涂片镜检，先用低倍镜检出虫体或虫卵，再在高倍镜下确定虫体或虫卵，并计数。

1.4.2 肠胃寄生虫检测试剂盒法(方法2) 严格按照使用说明书进行操作。

1.5 数据分析 阳性检出率是用检测到粪便中含寄生虫虫体或虫卵的爬行动物只数，除以受检爬行动物的总只数，以百分数表示。

2 结果

2.1 受检动物种类与数量 受检动物总共21 种25 只，来自各个笼舍饲养点。 其中蜥蜴类11 种15只：斗篷蜥1 只，古巴变色树蜥2 只，伊犁沙虎1 只，环颈蜥1 只，金黄双领蜥1 只，避役1 只，美洲蜥2只，西非拟蜥1 只，蓝舌蜥2 只，双脊冠蜥2 只，玉米蜥1 只；蛇类5 种5 条：水律蛇1 条，棕黑锦蛇1 条，黑眉锦蛇1 条，眼镜蛇1 条，黑尾蟒1 条；龟类5 种5只：印度星龟1 只，三棱龟1 只，扁平陆龟1 只，凹甲陆龟1 只，靴脚陆龟1 只。

2.2 两种方法检查情况对比 采用方法一得出的阳性检出率为68%，采用方法二得出的阳性检出率为84%。 由于寄生虫有很高的传染性，同一饲养笼舍的动物极易患同种寄生虫病，因此检验结果说明我园大多数的爬行动物都感染寄生虫，寄生虫对爬行动物的影响应引起我们的关注。

方法二无论在低倍镜下还是在高倍镜下，视野中粪渣几乎没有，比方法一的视野要清楚，检出率高，更便于分析。

2.3 受检动物感染寄生虫的情况 见表1。

如表1 所示：(1)蜥蜴类：11 种15 只中，有线虫卵的粪样阳性检出率为80%(12/15)；(2)蛇类：5种5 条中，有线虫卵的粪样阳性检出率为80%(4/5)，有鼠鳞虱卵的粪样阳性检出率为20%(1/5)；(3)龟类：5 种5 只中，有线虫卵的粪样阳性检出率为80%(4/5)，有滴虫的粪样阳性检出率为60%(3/5)，有吸虫卵的粪样阳性检出率为20%(1/5)，有球虫卵的粪样阳性检出率为40%(2/5)，有结肠小袋虫的粪样阳性检出率为20%(1/5)。

2.4 受检动物的感染类型及感染程度

2.4.1 单一感染 由表1 所示，在受检动物中，蜥蜴类和蛇类都是单一感染。 有16 只爬行动物的粪样里仅看到线虫虫卵或成虫，有1 只爬行动物的粪样里仅看到鼠鳞虱卵。 其中虫卵数量最多，感染最严重的是双脊冠蜥，一个视野中最多可见30 个虫卵；其次是伊犁沙虎，一个视野中最多可见8 个虫卵；其他爬行动物的粪样，一个视野中最多可见3 个虫卵。

表1 受检动物粪样感染寄生虫的情况

2.4.2 混合感染 由表1 所示，在受检动物中，除了在凹甲陆龟的粪样中未发现寄生虫卵外，其他的龟类均是混合感染。 感染寄生虫种类最多的是扁平陆龟，其粪样中发现3 种寄生虫卵(线虫卵、吸虫卵、球虫卵)及1 种原虫(滴虫)；其次是靴脚陆龟，其粪样中发现1 种寄生虫卵及2 种原虫；其余龟类粪样中均发现2 种寄生虫或卵。

3 爬行动物常用驱虫药和剂量

试用情况见表2。

4 讨论

4.1 直接涂片法方法简单，但每个样品应检多片才能提高检出率，容易漏检。 肠胃寄生虫检测试剂盒粪便漂浮检测系统，是简单且准确的临床识别肠胃寄生虫的方法，原因是该试剂盒使用的是硫酸锌漂浮液介质和专利的检测装置设计。 硫酸锌漂浮液介质比重为1.18 ～1.2，能漂浮所有的肠胃寄生虫。 专利设计增加了过滤面积，可以收集漂浮更多的寄生虫卵和囊胞；独特的储液槽设计，即使装满溢出也不会污染到实验室，特别是可以避免有人兽共患病的危险；正压缩柱式过滤器，不会泄漏，附按扣设计的盖子可紧紧封住，方便废弃物处理。

表2 爬行动物常用驱虫药及剂量

4.2 使用肠胃寄生虫检测试剂盒检查，发现显微镜下视野清晰，杂质少，检出率高，克服了比重较大硫代硫酸钠漂浮液(比重为1.22)显微镜视野中杂质较多[4]的缺点。 试验证实：肠胃寄生虫检测试剂盒法对大多数虫卵检出率明显优于直接涂片法，但对滴虫检测率差于直接涂片法，可能由于滴虫在硫酸锌溶液中是游动的，沾到盖玻片上的几率低，如果怀疑有滴虫感染，可以结合直接涂片法进行检测。

4.3 普查的结果说明我园爬行动物的寄生虫感染阳性率是比较高的，虽然一些动物未表现出明显临床症状，但也应引起我们足够重视，依据已确诊的寄生虫种类来制订出对临床工作有指导意义的驱虫计划。 就像一些较高级的脊椎动物那样，爬行动物在表现出病症之前，身上的寄生虫已生活了相当长一段时间，当容易受感染的因素损害寄主并使明显的感染进一步发展时，就可能会表现出临床症状。 有些寄生虫感染会不知不觉地加重，并在过了相当长一段时间后表现出来。 如果在这种情况下最终诊断出这种疾病时，宿主常常已无法治疗了。

4.4 不能仅仅因为确诊感染了寄生虫，就认定此爬行动物需要治疗。 如果治疗，必须考虑寄生虫的生活史，除了对症治疗之外，根据寄生虫的感染途径及生活环境进行干扰。 例如受艾美耳球虫感染的动物，其兽舍可以应用3%次氯酸钠溶液消毒。 粪检查出有鼠鳞虱卵的动物，对其饲料要进行筛选，这种虫卵是寄生于啮齿类动物的体外寄生虫的卵，蟒蛇在吞噬这类食物时就有可能感染。

4.5 寄生于爬行动物的某些原虫、蠕虫及体外寄生虫，也可感染于人。 饲养人员及兽医在接触患病动物时，要注意做好自身防护，预防人兽共患病的发生。