病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果观察

和月生

在病理检查的过程中, 临床的诊断结果会受到组织染色质量的影响, 而诊断的结果会对临床治疗方案产生影响, 从而对临床治疗的有效率以及安全性造成影响［1］。作为临床疾病诊断的“金标准”, 病理诊断因具有较高的准确率而成为临床常用的疾病诊断方式。病理诊断的准确性除了与病理医师的诊断水平有关之外, 对病理组织切片的处理效果和染色效果也会对病理诊断的准确率造成一定的影响, 如果操作人员的技术掌握程度较低, 且对病理组织切片处理不当, 则会严重影响到病理诊断的准确程度［2］。在对病理组织进行制片处理的过程中, 染色处理是关键环节, 染色质量的高低会影响到病理诊断结果的准确性。目前病理诊断存在标本固定时间不规范、试剂浓度不合理、组织脱水不足等诸多弊端,导致制片质量较差, 增加诊断难度, 影响病理诊断的准确性,因此, 改进染色技术显得尤为重要。本文就HE染色技术在临床病理诊断中的应用价值展开研究, 现将具体的研究内容分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院病理科2016年5月～2017年5月60张宫颈组织的石蜡切片作为研究对象, 其中30张为HE染色改进前的石蜡切片, 30张为HE染色改进后的石蜡切片,HE染色处理均在相关操作标准下严格进行。

1.2 方法

1.2.1 HE染色方法 采用人工染色方法, 要求技术人员在取材的过程中保证严格按照相关标准进行操作。要求技术人员在小标本制片的过程中尽量缩短标本的脱水时间和固定时间。技术人员按照宫颈组织切片染色SOP文件进行染色,采用二甲苯脱蜡3缸, 5 min/缸。过无水乙醇2缸, 5 min/缸,95%乙醇1缸3 min, 90%乙醇1缸3 min、85%乙醇1缸1 min,随后再用蒸馏水洗3 min。用苏木精染色3～5 min后, 采用浓度为1%的盐酸酒精分化5～10 s, 用蒸馏水清洗2 min, 再用稀氨水反蓝。技术人员应注意对细胞核染色深度进行观察,根据颜色深浅, 进行再次分化或再染色操作。用醇溶性伊红液染色10～20 s, 可根据情况适当调整染色时间, 再梯度酒精脱水, 85%乙醇1缸10 s, 90%乙醇1缸20 s, 95%乙醇1缸30 min, 无水乙醇2缸, 3 min/缸, 随后用二苯甲透明3缸,3 min/缸, 中性树胶封片, 并粘贴标签。

1.2.2 HE染色技术改进方法 针对不同大小的宫颈组织标本的特点分别进行相应脱水、固定以及染色等操作, 染色时确保细胞核变成蓝色。细胞间质的颜色为粉红或桃红, 红血球为橘红色, 弹力纤维为亮粉红色, 嗜酸性颗粒为鲜红色,蛋白性液体为粉红色, 胶原纤维为淡粉红色。为了降低组织脱落的发生率, 对宫颈组织进行烤片处理, 完成后将烤片的温度降低到与室温相同的水平, 再对宫颈组织进行染色处理。在染色的过程中苏木精多次被稀释, pH(氢离子浓度)发生改变, 因此, 在染色架经水沥干20 s后放入苏木精缸中, 再滴入2滴冰醋酸, 使酸碱中和, 使染色具有一致性。

1.3 观察指标 比较HE染色技术改进前和HE染色技术改进后染色标准率。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

HE染色技术改进前染色标准率为73.33%, HE染色技术改进后染色标准率为93.33%, HE染色技术改进前后染色标准率比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 HE染色技术改进前和改进后染色标准率比较［n(%)］

3 讨论

染色质量对临床病理检查的诊断结果有很大的影响, 可对疾病治疗的方案产生影响, 进而影响患者的治疗效果。而取材操作、时间等和组织HE染色的质量有很大的关系, 因此,进行组织染色时, 技术人员应在相关操作标准的指导下进行染色操作［3］。由于HE染色操作是在物理和化学共同作用下进行的工作, 组织细胞的取材、脱水、固定以及切片的质量等多种因素均会对HE染色的结果造成影响, 因此技术人员应加强对HE染色涉及到的相关理化学知识的重视, 对不同大小的标本进行针对性处理, 根据标本的大小和厚薄制定合理的固定以及脱水时间［4,5］。本研究中的宫颈组织内部有大量的细微小孔, 染料渗透后和组织牢固结合, 染料被组织吸收, 逐渐溶解和扩散。

切片组织的结构较为复杂, 技术人员在使用染色剂后,应在较短的时间内使染色剂和组织充分结合, 从而确保各组织都能彻底染色。病理细胞存在酸性分子, 而酸性分子会与染色剂中的阳离子结合, 从而形成固定分子；而病理细胞中含有的碱性分子可以与染色剂中的阴离子结合, 会使固定作用得以强化, 从而保持细胞活性平稳, 并维持组织结构,将其与活体组织之间存在的误差降低, 从而提高检查的准确性［6,7］。本次研究结果显示, 改进病理技术HE染色后, 染色标准率显著高于技术改进前(93.33% VS 73.33%), 差异具有统计学意义 (P＜0.05)。

综上所述, 病理技术中的HE染色技术在病理诊断中的意义重大, 技术人员应不断提高和改进HE染色的操作技术,根据组织类型进行相对应的固定、脱水、切片、染色等操作,从而提高切片质量, 提高染色标准率, 进而促进病理诊断准确性的提升, 最终保证临床治疗效果。

［1］ 马峰, 刘仲祥.病理技术HE染色用于病理诊断中的价值分析.中国实验诊断学, 2015, 19(12):2103-2104.

［2］ 邢菲菲.分析HE染色技术在病理诊断中的应用.世界最新医学信息文摘, 2017, 17(31):8-9.

［3］ 郑样贞.分析HE染色技术在病理诊断中的应用.中国社区医师, 2016, 32(17):109, 111.

［4］ 郑菲, 陈培琼, 王玉环.HE染色在临床病理诊断中的应用研究.中外医疗, 2016, 35(30):17-18, 21.

［5］ 段成兵.探讨病理技术HE染色在病理诊断中的应用.世界最新医学信息文摘, 2017, 17(16):148.

［6］ 王朝晖.病理技术HE染色在病理诊断中的应用效果观察.医药前沿, 2016, 6(13):37-38.

［7］ 董星杏.病理技术HE染色在病理诊断中的应用探讨.世界最新医学信息文摘, 2016, 16(34):43-44.