可可嫁接成活率研究

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(1.中国热带农业科学院香料饮料研究所，　海南 万宁 571533；2.农业部热带香料饮料作物种质资源圃，　海南 万宁 571533；3.农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室，　海南 万宁 571533)

可可(Theobromacacao)，属梧桐科(Sterculiaceae)可可属，种子富含脂肪、蛋白、多酚等成分，是制作巧克力、糕点、糖果等食品的重要原料。可可主要分布于南北纬20°内，全球种植面积超过1 000万hm2，为世界第二大饮料作物，在世界农业发展中占有重要地位。我国于20世纪20年代从东南亚引种，20世纪50年代开始目的性试种并获成功。目前，我国可可主要分布在海南岛，种植面积超过300 hm2，远不能满足国内需求，每年仍需进口可可豆10万t以上。

可可作为我国新兴的热带特色经济作物，耐荫蔽，适宜在林下种植。海南省橡胶、椰子、槟榔等经济作物种植面积近60万hm2[1-3]，如果15%的经济林下间种可可，年产可可豆10万t以上，可以满足目前国内需求。可可为典型热带植物，老茎开花结果，观赏价值高，有助于海南省建设美丽乡村、打造“升级版国际旅游岛”。可可主要分布在热带发展中国家，是其中许多国家的重要经济收入来源，但生产技术水平较为落后，先进的育苗技术有助于支撑我国农业“走出去”，服务国家“一带一路”战略。

目前，可可种苗以实生繁殖为主，成林后植株间变异大、易退化，扦插种苗无主根易倒伏，严重影响可可生产的经济效益。嫁接繁殖的种苗可保持母本的优良性状，提升种植园综合效益[4]。然而，国内对可可嫁接育苗技术的研究仍未见报道。为促进我国可可产业化的健康发展，优化可可种苗繁育技术，找到一种操作实用、简便、易于掌握的嫁接方法，研究了可可嫁接育苗时期、嫁接方式等对成活率的影响。

1　材料与方法

1.1　试验地概况

试验地位于海南省万宁市兴隆华侨农场可可育苗基地(北纬18°44′，东经110°11′)。该区域属热带季风气候，年平均温度为24.5 ℃，年平均降雨量为2 400 mm，降水较集中，每年5—10月为雨季，11月至次年4月为旱季。

1.2　试验材料

砧木培养：2014—2015年，选取籽粒饱满可可种子，沙床催芽后，装袋育苗，每2～3个月育苗1次，并实行精细的苗圃管理。2015—2016年嫁接时，苗高为50～80 cm，子叶节处茎粗0.8～1.2 cm。在嫁接前1周将砧木打顶，保留3～5个叶片，对砧木灌足底水，嫁接前砧木枝干表面保持干燥。

接穗采集和运输：接穗来自中国热带农业科学院香料饮料研究所选育和筛选的品种、优良育种材料：热引4号、TAS 2-13、TAS 4-20、TAS 6-11、TAS 8-2、TAS 9-9、TAS 10-9、TASsr 12。在可可优良母树上，选择芽体饱满、无病虫害、半木质化、健壮的当年生枝条作为接穗枝，对接穗枝实行防虫、疏密等管理。在晴天或多云天，采集优良母树上的接穗枝，边采集，边剪去接穗枝上的叶片，保留叶柄并编号挂牌。接穗枝在嫁接当日剪取，用湿毛巾包裹进行长距离运输，到达目的地后，把裹有湿毛巾的接穗枝放置在阴凉处，以备第2、3天嫁接使用。

1.3　试验设计

不同嫁接方法试验设芽接、劈接、枝接、腹接4种处理，在2015年4月份进行；不同嫁接时期(以芽接方法)分别在2015年4月上旬、7月中旬、10月上旬、2016年1月中旬进行；不同砧木直径对嫁接成活率影响，用游标卡尺测量砧木直径，测量部位为距地10 cm，按直径大小分6个等级：0.59 cm以下、0.6～0.69 cm、0.7～0.79 cm、0.8～0.89 cm、0.9～0.99 cm、1.0 cm以上。根据每次采集的接穗状况每处理嫁接30～100株。嫁接90 d后调查成活率和新稍长度。

1.4　嫁接方法

1.4.1芽接

选择枝条上较平部位取芽(即芽点，位于叶柄上方)，先在芽点上下部位横向各环割一刀，再在休眠芽左右纵向各切一刀，接穗长0.8～1.5 cm、宽0.5～1 cm，深度刚到木质部；轻拉接穗上的叶柄使其从木质部上剥离。在砧木基部开一刚达木质部的切口，开切口时使切开的砧木片仅与切口底端相连。将接穗嵌入切口，使接穗形成层与砧木形成层对齐，然后将切开的砧木片紧压接穗，露出接穗上的芽点，自下往上将接穗和切开的砧木片以及接穗和砧木结合处进行绑扎。接穗萌芽长至2～3 cm以后，解除绑扎，接穗愈合后剪去切口上5 cm以上的砧木。

1.4.2劈接

选择长5～8 cm、带2～3个饱满腋芽的良种枝条为接穗；接穗底端削成角度为30°的楔形，顶端横向削平。在砧木子叶节处，将顶部横向剪下，砧木基部纵向劈开。将接穗嵌入切口，使接穗形成层与砧木形成层对齐，然后将劈开的砧木紧压接穗斜面，自下往上绑扎接穗和砧木切口。接穗成活后，解除绑带。

1.4.3枝接

选择长5～8 cm，带2～3个饱满腋芽的良种枝条为接穗；接穗底端削成角度为30°的楔形，顶端横向削平。在砧木子叶节处，斜向下切一深达木质部切口，砧木上形成长3～4 cm舌头。将接穗嵌入切口，使接穗形成层与砧木形成层对齐，然后将切开的砧木舌头紧压接穗斜面，自下往上绑扎接穗和砧木切口。接穗萌芽长至2～3 cm以后，解除绑扎，接穗愈合后剪去切口上5 cm处以上的砧木。

1.4.4腹接

将良种枝条截成长4～6 cm、带2～3个饱满腋芽的枝条，将接穗两端均削成斜面；接穗的无腋芽一侧纵向削去韧皮部，露出纵削面，纵削面与斜面形成约45°夹角。在砧木上开一深度刚达木质部的竖长切口，切除中段砧木片，剥离切口两端的砧木片的韧皮部，切口两端的砧木片的一端与砧木相连。将接穗嵌入切口，使纵削面与砧木的形成层契合，切口两端的砧木片覆压在接穗两端，固定砧木片和接穗，自下往上进行绑扎。接穗成活后，解除绑带，剪去切口上5 cm处以上的砧木。

2　结果与分析

2.1　不同嫁接方法对嫁接成活率的影响

由表1可知，不同嫁接方法的嫁接成活率差异显著。腹接的嫁接成活率最高，达95.5%；劈接和芽接次之，分别为77.1%和74.2%；枝接最低，为44.1%。劈接和芽接之间差异不显著，与腹接、枝接差异极显著；腹接与枝接之间差异极显著。

表1不同嫁接方法对成活率的影响

嫁接方法嫁接株数成活株数成活率(%)LSD0．01枝接773444．1A芽接977274．2B劈接352777．1B腹接888495．5C

注：LSD0.01列没有相同字母表示成活率在p<0.01水平差异显著，有相同字母表示成活率差异不显著。下同。

2.2　嫁接时期对嫁接成活率的影响

采用热引4号可可为接穗，以芽接方法比较不同嫁接时间对成活率的影响。由表1可知，嫁接时期的不同导致嫁接成活率不同，4月上旬、10月上旬的嫁接成活率最高，成活率分别达79.5%和74.4%，12月中旬成活率最低，仅33.8%。因此，4月和10月前后是可可嫁接的最适时期。

表2不同嫁接时期对成活率的影响

嫁接时期嫁接株数成活株数成活率(%)LSD0．011月中旬682333．8A4月上旬786279．5C7月中旬1277155．9B10月上旬15611674．4C

2.3　砧木直径对嫁接成活率的影响

在4月上旬，以芽接方法比较不同砧木直径对嫁接成活率的影响。方差分析及多重比较表明，不同砧木直径等级对嫁接成活率和新芽生长量没有显著影响。相关性分析表明，嫁接成活率与砧木直径在一定程度上呈线性相关，相关系数R2=0.923 5，回归函数式为y=36.51x+43.32。嫁接成活后，新生萌芽生长速度与砧木直径呈正相关。

表3砧木直径对嫁接成活率和新芽生长的影响

砧木直径(cm)成活率(%)萌芽长(cm)<0．5961．66．6±1．30．6～0．6969．48．5±1．50．7～0．7968．58．9±1．10．8～0．8976．49．7±0．90．9～0．9979．311．2±1．2>1．081．811．8±1．7

2.4　不同种质接穗对嫁接成活率的影响

在4月上旬，以芽接方法比较不同种质接穗对成活率的影响。单因子方差分析及多重比较表明，7份可可种质接穗嫁接成活率存在极显著差异。嫁接成活率最高的为TAS 10-9、TAS 9-9，成活率达90%以上。成活率最低的为TAS 2-13，仅为45.5%。不同种质嫁接的平均成活率为72.3%，亲和性较好的砧穗组合嫁接成活率比平均成活率高近20%。

表4不同种质接穗嫁接成活率差异

种质编号嫁接株数成活株数成活率(%)LSD0．01叶片数茎粗(cm)茎长(cm)TAS6⁃11393589．7E4．5±0．22．6±0．310．8±0．8TAS8⁃2422661．9AC4．1±0．33．1±0．211．4±1．1TAS10⁃9363391．6E3．3±0．22．5±0．212．5±1．0TAS2⁃13442045．5A3．7±0．32．8±0．112．4±1．0TAS9⁃9534890．6E3．2±0．32．5±0．18．8±0．6TASsr12362466．7AD3．7±0．32．9±0．214．5±1．8TAS4⁃20321856．3AB4．1±0．42．8±0．211．0±0．6

3　结论与讨论

本试验所选用接穗来自香料饮料研究所鉴定出的优良单株，来源于东南亚、拉丁美洲、大洋洲等可可主产区，具有丰富的遗传差异。传统上，人们依据地理起源和形态特征将可可分成Criollo、Forastero和Trinitario (Criollo×Forastero)3大遗传类群；最近，利用SSR标记和基因组序列分析可可种质遗传多样性，将可可划分成10大遗传类群：Amelonado、Contamana、Curaray、Guiana、Iquitos、Maraňón、Nanay、Purús、Criollo 和Nacional[5-6]。可可遗传多样性分析表明，可可不同类群间表型具有明显差异，果重、果长等变异大。不同种质间嫁接成活率的差异在一定程度上受遗传差异的影响，如TAS 6-11、TAS 9-9、TAS 10-9种质均归属H类[7]，成活率均在90%左右，生产实践中可优先从H类中选育优良母株作为接穗，有利于提高嫁接成活率。

不同嫁接方法接穗与砧木的贴合方式和绑扎方式不同，对嫁接成活率有显著影响[8]。可可腹接法接穗与砧木间平行排布，接穗与砧木上所有切口均紧密贴合，绑扎后固定紧密并与暴露环境完全隔绝，利于接穗与砧木结合部位愈合，因此嫁接成活率较高。然而，腹接法对接穗和砧木的要求较高，接穗枝和砧木都要圆直以便于削出平直切面；砧木直径最好大于1.2 cm，如果砧木过细，难以切出平直的切口，与砧木匹配的接穗也较少，不利于大量嫁接育苗。本研究中，可可枝接法嫁接成活率最低，原因是接穗与砧木贴合后有20～40°的夹角，绑扎后贴合部位易松动，接穗与砧木间空间较大，雨水易进入，对嫁接成活率有一定影响。

本研究结果表明，海南地区最适宜可可嫁接育苗时期为4月上旬和10月上旬。4月上旬前后气温稳定，芽条萌动，嫁接成活率最高。10月上旬前后降水逐渐减少，嫁接部位易于愈合，成活率也较高，更利于嫁接种苗的规模化繁育。可可树的枝条在3—5月份萌动最为旺盛，新萌生的枝条需4—5个月长成半木质化状态，9—10月份时母树上接穗量大且质量适于嫁接。可可种子属于顽拗性种子，收获后长时间贮藏种子活力急剧下降[9]；1—3月份成熟的可可果实占到全年的80%左右，收获后直接用于繁苗，当年9—10月份幼苗直径可达0.8 cm左右，便可作为砧木生产嫁接种苗。

参考文献：

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[3]江湛钰.海南槟榔业发展的现状及技术创新中存在的问题[J].中国商论,2016,(16):137-138.

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[6]Utro F,Cornejo O E,Livingstone D,et al.ARG-based genome-wide analysis of cacao cultivars[J].BMC Bioinformatics,2012,13(19):S 17.

[7]李付鹏,秦晓威,郝朝运,等.可可核心种质遗传多样性及果实性状与SSR标记关联分析[J].热带作物学报,2016,37(2):226-233.

[8]赵伟明,张海军,施娟娟,等.不同嫁接时间和砧木处理对薄壳山核桃嫁接成活率的影响[J].西南林业大学学报,2014,34(4):104-106.

[9]李付鹏,秦晓威,朱自慧,等.不同处理对可可种子萌发以及幼苗生长的影响[J].热带农业科学,2015,35(5):5-8.