甲胎蛋白异质体测定在原发性肝癌和良性肝病鉴别诊断中的应用分析

李晓峰　王其　童涌

[摘要] 目的 分析甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）异质体测定在原发性肝癌和良性肝病鉴别诊断中的应用价值。方法 选择2016年3月～2017年4月本院收治的慢性乙型肝炎病毒患者104例作为研究对象，其中包括原发性肝癌53例，各类良性肝病患者51例；所有患者均进行微量离心柱法分离小扁豆凝集素结合型AFP-L3（甲胎蛋白异质体、AFP-L3、AFP-L3 variant）测定，并通过实施化学发光法测定甲胎蛋白含量、AFP-L3水平及AFP-L3占总甲胎蛋白的比率。检测后所有检测结果均以AFP-L3>10%为阳性作为诊断标准、AFP≥400 ng/mL为阳性作为判断标准。 结果 53例原发性肝癌患者中，AFP-L3>10%43例（81.1%）；51例各类慢性肝病患者中，AFP-L3>10%5例（9.8%），肝癌AFP-L3陽性率明显高于良性肝病阳性率（P<0.05）。53例原发性肝癌患者中，AFP>400 ng/mL 33例（62.3%）；51例各类慢性肝病患者中，AFP≥400 ng/mL 14例（27.5%），肝癌AFP阳性率明显高于良性肝病阳性率（P<0.05）。肝癌患者AFP-L3>10%、AFP≥400 ng/mL比较差异不明显（P>0.05）。 结论 在原发性肝癌和良性肝病鉴别诊断中，通过甲胎蛋白异质体测定，能有效区分肝癌与良性肝病，弥补AFP诊断中的不足之处，具有一定的临床诊断实用性，值得临床推广应用。

[关键词] 甲胎蛋白异质体测定；原发性肝癌；良性肝病；鉴别诊断价值

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）04-0005-03

[Abstract] Objective To analyze the application value of AFP（α-fetoprotein） heterogeneity in the differential diagnosis of primary liver cancer and benign liver disease. Methods A total of 104 patients with chronic hepatitis B virus admitted in our hospital from March 2016 to April 2017 were selected， including 53 patients with primary liver cancer and 51 patients with various types of benign liver disease. All patients underwent microcentrifuge column method to Isolate lentil lectin-binding AFP-L3（alpha-fetoprotein heterogeneity， AFP-L3，AFP-L3 variant）. The alpha-fetoprotein content， the AFP-L3 level and the ratio of AFP-L3 to total alpha-fetoprotein were determined by chemiluminescence assay. After detection， the AFP-L3>10% was as a positive diagnostic criteria and the AFP≥400 ng/mL was as a positive standard. Results Of the 53 patients with primary liver cancer， there were 43 patients with AFP-L3>10%（81.1%）. In 51 patients with chronic liver disease， there were 5 patients with AFP-L3>10% （9.8%）. The positive rate of AFP-L3 in hepatocellular carcinoma was significantly higher than that in benign liver disease（P<0.05）. There were 33 patients with AFP>400 ng/mL（62.3%） in 53 patients with primary liver cancer. There were 14 patients with AFP≥400 ng/mL（27.5%） in 51 cases of chronic liver disease. AFP positive rate of liver cancer was significantly higher than that of benign liver disease（P<0.05）. There were no significant differences in AFP-L3>10% and AFP≥400 ng/mL between the two groups （P>0.05）. Conclusion In the differential diagnosis of primary hepatocellular carcinoma and benign liver disease， the determination of alpha-fetoprotein heterogeneity can effectively distinguish between liver cancer and benign liver disease and make up for the deficiency of AFP diagnosis， which has some clinical diagnosis practicality and is worthy of promotion and application.

[Key words] Alpha-fetoprotein heterogeneity determination； Primary liver cancer； Benign liver disease； Differential diagnosis value

原发性肝癌在临床治疗中较为常见，具有病情发展快、死亡率高等特点。由于此病症经临床诊断发现后，病情已发展到了中晚期，使得患者错过最佳治疗时机[1]。因此，早期鉴别诊断对提高患者生活质量及生存率具有积极意义。随着医疗水平的不断进步与发展，血清甲胎蛋白异质体测定的临床应用，可对肝癌高危人群进行有效监测，使肝癌能够在无症状下的亚临床期作出诊断，再加上外科手术技术的成熟，以及各種局部治疗等非手术治疗方法的发展，使肝癌的预后较过去有了明显提高[2-3]。在原发性肝癌诊断中，因与良性肝病诊断中的部分结果相一致，易出现误诊现象，从而提高了误诊率，使得肝癌患者错过最佳治疗时机[4]。因此，本次研究基于以上背景，分析甲胎蛋白异质体测定在原发性肝癌和良性肝病鉴别诊断中的应用效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2016年3月～2017年4月本院收治的慢性乙型肝炎病毒患者104例作为研究对象，其中包括原发性肝癌53例、各类良性肝病患者51例，所有患者均在本院确诊病情。原发性肝癌患者均为男性，年龄43～72岁，平均（55.7±8.4）岁，其中AFP≥400 ng/mL 33例，AFP<400 ng/mL 20例；良性肝病患者中，男31例、女20例，年龄35～66岁，平均（46.7±6.6）岁，其中13例AFP≥400 ng/mL、38例AFP值（20～400）ng/mL；对比分析原发性肝癌患者与良性肝病患者基本资料，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。所有患者均符合病毒性肝炎诊断标准[5]。

1.2方法

1.2.1 AFP定量 所有患者均采用化学发光免疫分析法进行AFP定量检测，通过全自动电化学发光免疫分析仪，应用配合的AFP定量检测试剂盒，由我院检测中心进行测定。

1.2.2 AFP-L3分离 采用由北京热量生物技术有限公司提供的甲胎蛋白异质体AFP-L3亲和吸附离心管。在AFP-L3分离时，通过微量离心柱法，于离心柱内装小扁豆聚集素的琼脂糖，其可有效结合AFP-L3[6]。操作方法如下：于600 mL清洗液中加入患者的400 mL血清，将其加入到小扁豆聚集素的琼脂糖离心柱中，在血清经过离心柱时，其会与小扁豆聚集素中结合力强的甲胎蛋白异质体结合于离心柱中，通过清洗可将不结合的甲胎蛋白清洗下去，最后经过专用的洗脱液洗脱后，可得到处理后的标本，此标本中就含有AFP-L3[7-11]。

1.2.3 AFP-L3检测 通过MAGLUMI2000全自动化学发光仪及配套定标液及试剂、质控物，分别检测待测血清中AFP的总量及AFP-L3水平。

1.3观察指标

观察分析AFP含量、AFP-L3水平及AFP-L3占总甲胎蛋白的比率。检测后所有检测结果均以AFP-L3>10%（即AFP-L3占总甲胎蛋白的百分比）为阳性作为诊断标准，AFP≥400 ng/mL为阳性作为判断标准[12]。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0统计学软件进行数据处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验；计数资料以[n（%）]表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 原发性肝癌和良性肝病AFP含量、AFP-L3检测结果比较

53例原发性肝癌患者中，当AFP处于（350±115）ng/mL时，AFP-L3水平呈阳性43例（81.1%）；51例各类良性肝病患者中，当AFP处于（120±109）ng/mL时，AFP-L3水平呈阳性5例（9.8%），肝癌AFP-L3阳性率明显高于良性肝病阳性率（P<0.05），见表1。

2.2原发性肝癌和良性肝病AFP结果比较

在53例原发性肝癌患者中，AFP≥400 ng/mL 33例（62.3%）；在51例各类慢性肝病患者中，AFP≥400 ng/mL的患者有14例（27.5%），肝癌AFP阳性率明显高于良性肝病阳性率（P<0.05），见表2。

2.3良性肝病AFP-L3>10%、AFP比较

良性肝病AFP-L3>10%阳性5例（9.8%）；良性肝病AFP≥400 ng/mL 14例（27.5%），差异有统计学意义（χ2=5.239，P<0.05）。

3 讨论

肝癌是指发生在肝脏的恶性肿瘤，包括转移性肝癌及原发性肝癌两种，其中原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，原发性肝癌占居恶性肿瘤第五位，此病症可分为胆管细胞型肝癌、混合型肝癌及肝细胞型肝癌；通过肿瘤形态可将其分为弥漫型、巨块型和结节型[13]。原发性肝癌具有较高的死亡率，其仅次于食道癌及胃癌，是常见的三大恶性肿瘤之一。原发性肝癌初期症状不明显，随着病情的发展，至晚期后，主要临床表现为乏力、消瘦、黄疸、腹水、肝痛等症状[14]。在临床治疗中一般采取西药治疗，但患者到晚期后因癌细胞扩散，治愈率较低。因此，在原发性肝癌诊断中，可尽早发现，尽早诊断，尽早给予有效治疗，对提高治疗效果、延长患者生存时间具有重要意义[15]。目前，在原发性肝癌临床诊断中，血清甲胎蛋白为首选诊断方式，但在良性肝病患者中，甲胎蛋白也会有不同程度的升高，从而导致其在原发性肝癌中的敏感度及特异性受到影响[13]。因此，在原发性肝癌的AFP诊断中将其阈值提高到400 ng/mL，在提高特异性的同时，其灵敏度也会随之降低，进而出现原发性肝癌漏诊现象[16-18]。

随着医疗水平的不断进步与发展，在恶性肿瘤的诊断中，除了影像学技术及病理切片外，其血清检测已成为诊断肿瘤的有效方法[19-20]。AFP作为常用的诊断方法，但其并不能有效区分良恶性肿瘤。因此，单独应用AFP检测诊断肿瘤存在一定的困难[21-22]。有研究发现，AFP-L3能在肝炎高危患者中发现直径小于2 cm的肝癌，AFP-L3可提前9～12个月发现肝癌的存在，在AFP-L3临界值为10%状态下，诊断出肝癌病灶，其诊断准确率较高[23]。在本次研究中发现，53例原发性肝癌患者中，AFP-L3水平呈阳性43例（81.1%）；51例各类慢性肝病患者中，AFP-L3水平呈阳性5例（9.8%），肝癌AFP-L3阳性率明显高于良性肝病阳性率。53例原发性肝癌患者中，AFP≥400 ng/mL的患者有33例（62.3%）；51例各类慢性肝病患者中，AFP≥400 ng/mL 14例（27.5%），肝癌AFP陽性率明显高于良性肝病阳性率。由此可知，AFP-L3在原发性肝癌患者的诊断中，在保持较高特异度的同时，可提高灵敏度。通过检测肝病患者血清中的AFP及AFP-L3含量，并将辅助诊断肝癌的阳性界值设为10%，但由于AFP具有异质性，导致肝癌患者AFP检测持续低浓度；因此，通过检测AFP-L3浓度，可对原发性肝癌患者的指标进行诊断，可有效鉴别原发性肝癌及良性肝病。由此可知，AFP-L3诊断准确率要明显高于AFP诊断准确率[24-25]。

综上所述，甲胎蛋白异质体测定在原发性肝癌和良性肝病鉴别诊断中具有较高的应用价值，可有效鉴别诊断出原发性肝癌，为原发性肝癌的诊断提供重要依据，值得临床推广应用。

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（收稿日期：2017-10-10）