粉防己碱抗支原体分子机制研究

丁亦男，魏健，王光野

（长春师范大学，吉林长春 130000）

粉防己碱（Tetrandrine，TET）异名汉防己碱、又名汉防己甲素、汉防己碱，主要从己科草料根部精粹、提炼出来，从成分来看属于种苄基异喹啉类生物碱[1]。最近几年，由于这种物质具有较高的医学作用，而被广泛用于治疗各种肝炎和呼吸道疾病，以及逐渐运用到皮肤创伤治疗当中，而随着细胞分离技术以及培养技术不断的进步，以及在分子方面的应用逐渐深入，而使得这种物质被应用到抗纤维化中去，如TET抗纤维化的治疗。

1 抑制细胞因子的致纤维化效果

纤维化的产生主要是在细胞因子影响及协助下所完成的，又或者是在病菌的干扰下而逐渐形成，由此引起迁移以及导致细胞增生异变，与细胞外基质合成所导致，又或者是因为产生出三种不同的生物方面的反应机制所导致，在实验中将TGF-β1cDNA注入到白鼠的另外一边的肾动脉当中，而经过此次试验可发现，肾小球硬化对策无异常，这表面该物质能够改善细胞外基质沉积现象，及肾小球硬化的作用[2]。而通过研究Northern所进行的杂交试验证明，使用TET之时，能够有效的降低TGF-β1 mRNA，从而大大的减少肾小球ECM的产生，减少肾小球硬化的出现。田字彬[3]等人在做试验中就发现，TET能够减少TGF-β1 mRNA，能够有效的控制PDGF的出现，而这必须要保持在适当的范围之内，在此基础上可以抑制住PDGF的产生，以及FB与lto细胞胶原的产生。这表明TET除了能够直接影响细胞增殖出现，以及有效降低胶原合成之外，同样也能够有效的抑制住PDGF的出现，而能够起到抗纤维化的效果。根据一些报道可知[4]，TET还能阻断PDGFR(PDGF成分）能够影响到细胞分泌出现，而有效的降低PDGF结合受体的出现，从而实现抗纤维化的效果。

2 钙拮抗作用

细胞浆Ca2+浓度升高源于各类疾病的病理生理基础。相关研究结果证明，胞浆内游离Ca2+利用与其受体蛋白钙调蛋白（Calmodulin，CaM）融合在一起实现第二信使复合体的形成，激活CaM依赖性的cAMP二磷酸酶，降低细胞内cAMP的水平，而cAMP水平的降低可增加细胞内胶原基因的表达，且可抑制胶原酶的活性。已有研究证实，TET是一种强有力的钙拮抗剂。Liu QY[5]等的研究表明，TET对Ca2+通道的阻滞是非选择性的，既可阻滞细胞膜电压门控通道介导的Ca2+内流，又可阻滞受体门控通道干预细胞内Ca2+分布。

3 抗脂质过氧化的影响

根据相关的试验可知，脂质过氧化物一旦形成，将会产生出极强的质纤维化现象，其中细胞浆液及线粒体内钙化一旦出现以后，就会导致脂质过氧化损害的机制产生，而这主要还是因为钙化导致线粒体膜电离失效，以及呼吸链出现阻碍，以及电子传递链出现失常，由此而引起氧自由基的出现，直接的刺激到Ca2+依赖蛋白酶，由此导致细胞内的黄嘌呤脱氢酶（XDH）逐渐的转化成为黄嘌呤经酶（X0D），XOD则就会在细胞内产生许多的氧自由基，而由此引起细胞出现过氧化损害的出现，其中，TET不但具有较强的抗氧化的作用，同时还能够产生CaM拮抗剂，此外，根据相关的试验表明，TET还能够提高肺纤维化活性，及提高肝脏细胞内的超氧化歧化酶的活性，而这将进一步的加强SOD及时清理能力，将体内的氧自由基基础的清理出去，而能有效地防止纤维化的产生。

4 TET预防瘢痕

瘢痕与肝、肺等内脏纤维化疾病在病理上都表现为胶原等细胞外基质的过多无序沉积。随着对TET抗纤维化机制研究的逐步深入，人们很自然就联想到其防治瘢痕的可能性，目前已有人在这方面做了一些有益的尝试。刘德伍[6]等观察TET对体外培养人瘢痕FB生长的影响，结果发现TET能抑制FB生长，且与浓度、时间呈正相关。采用同样的方法，李万同[7]等也发现TET能浓度依赖性地抑制HTSFB的增殖活力，浓度为1 mg/L时即开始表现出抑制作用，当浓度达到100 mg/L时，抑制率可达89.4%，细胞的活力也下降到对照组的38.5%。在上述模型中再加入一定浓度的TGF-β，发现TGF-β有促进瘢痕基质收缩的作用，而TET在不抑制FB增殖活力的浓度范围内（≤4 mg/L）即可有效抑制TGF-β的这种作用。因此推测，TET对细胞因子刺激FB、启动和促进瘢痕增生的过程可能有直接的作用，有必要深入探讨和研究。

5 粉防己碱对血管内皮剥脱后再狭窄的分子机制研究

肝纤维化是多种慢性肝病的共同事件（commonevents）。慢性肝病时肝组织肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Fector，TNFα）、转化生长因子β1（Transforming Growth Factor β1，TGFβ1）、血小板源生长因子（Platelet Derivead Growth Factor，PDGF）及表示为上调，而促使肝星状细胞出现，而导致此类物质产生，与不断的转化，而这能够促使T型及Ⅲ型胶的上调及出现，而由此导致细胞出现纤维化的现象[8]，其中，核转录因子AP-1（C-fos与 C-jun同/异二聚体）DNA Ⅲ型胶原基因转录上调、结合了增强对T型具有一定的调节的作用[9]，根据一些研究后可发现，配合使用粉防己碱（tetrandrine，TET）与甘草酸（Glycyrrhizinicacid，GLZ）能够显著增加其抗肝纤维化的疗效。陈锡美等[10]通过采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型，同时给予不同剂量（5 mg/kg、10 mg/kg、20 mg/kg体重）TET、（50mg/kg体重）Glz及二者联合灌胃或腹腔注射，用RT-PCR法检测肝组织Ⅰ型、Ⅲ型前胶原、c-fos及c-junmRNA表达。结果10mg、20mg/kg体重TET和GLZ单独应用能够不同程度抑制肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型、Ⅲ型前胶原、c-fos及c-junmRNA表达，两种药物联合应用效果更为显著。由此可以看出联合应用Tet与Glz能够更有效地在转录及其上游水平抑制肝脏胶原合成。