周其琛
(天津市河西区纯美宠物诊所 300221)
犬猫皮肤病种类有很多,有因寄生虫而引起的,也有因真菌、细菌而导致的,还有过敏性皮肤病,犬猫所罹患的这些所有的皮肤病都会导致病患的皮肤出现红肿以及瘙痒。随着病情越发严重,犬猫皮肤上还会出现红斑,皮肤溃烂导致脱毛等症状。这对犬猫以及饲主而言是都是极为痛苦的,不仅影响其犬猫的外貌还会造成犬猫瘙痒难耐。犬猫皮肤病比较常见的是感染了毛疮白癣菌、犬小芽孢皮癣菌、白色念珠菌以及厚皮马拉色氏霉菌等病原菌。犬猫皮肤病治疗一般从属于西医内科范畴,在以前被称为疮疡科,所有的皮肤病都可称为疮,而疡是指所有属于内科类疾病,包括疖、痹、瘤等等,但是在临床上西医疗法对犬猫皮肤病病原菌的抑制作用有限,会激发抗药性菌株的出现,治标不治本,导致犬猫皮肤病容易陷入复发且再治疗就会相对比较困难的情况。
在我国古代医学发展史上就有很多关于皮肤病的相关论述,例如,《内经》中就有不少相关治疗记载,《素问·痹论》中写道:“体内卫气,其性漂疾,不能形于脉也,故循于皮肤之中,分肉之间”,还有《灵枢·本脏篇》以及《诸病源侯论》中对皮肤病发病的原因以及其症状和病理均有表述。我国中医认为皮肤病是由风、湿、热等因素由内而外发作的,是本体状况的外在表现。犬猫的皮肤病是一种比较常见的病,同时也是易发病,往往存在反复发作的情况,彻底根治难,特别是在西医治疗中一旦形成抗药性菌株,将会越来越难以治疗。因此,我们可以从中医调理入手,通过中医固其源,止于表的方式来进行治标治本,避免西医疗法中使用抗菌素产生抗药性菌株的情况。通过本实验主要是为了验证某些中草药对犬猫皮肤病病原菌的抑制效能,尝试从中医角度探索出一条能够有效治疗犬猫皮肤病的途径,使治疗过程对犬猫不会产生毒副作用,寻找出更高效且不会产生耐药性的中草药,期望能够在治疗犬猫皮肤病问题上得以创新,治标又治本。笔者从患病犬猫身上通过分离获取并培养了四种犬猫皮肤病病原菌,用来进行某些中草药的抑菌效能试验。
实验所用菌株包括:毛疮白癣菌、白色念珠菌、犬小芽孢皮癣菌、厚皮马拉色氏霉菌,这些菌种均从罹患皮肤病犬猫皮肤上分离获取,经培养用于实验。
本试验采用的真菌培养基是琼脂平皿培养基,琼脂平皿培养基中的主要成分包括琼脂(寒天)、胨、葡萄糖、酵母、硫酸镁、磷酸钾等。
进行中草药试验品的制备需要根据每种中草药不同的性质特点进行制备。本实验选用了12种中草药,其中包括野生的鲜品,也包括已经晒干的干品。在实验过程中由于丁香中含挥发油比较多,针对其特点对丁香进行制备。首先要从丁香中提取出挥发油,留存备用,其次是对丁香进行煎剂制备,准备两种形式的丁香实验材料进行实验。在具体实验过程中需要分步骤进行依次实验。先将挥发油用于实验,接着在单独将煎剂用于实验,之后再将挥发油和煎剂合并液进行实验,已确定丁香真正起作用的成分。通常在临床治疗的时候羊蹄、芦荟以及凤仙都多采用鲜品的形式入药,因此在实验中我们也采用鲜品的形式进行实验,除此之外,再以煎剂的形式进行实验。其他中草药则都要制备其煎剂,并将3次煎剂进行合并,得到的煎剂合并液要进行浓缩,使每毫升药液含生药1g,在经过15min的120℃高压灭菌以备实验用。
配制菌悬液需要将用于实验的菌种根据其生长习性进行培养。使用试管斜面培养基分别进行在27℃环境中培养一星期以及在37℃环境中培养24h,培养成功经检查后,使用灭菌生理盐水将其调制成108CFU以备实验使用。
使用平皿打孔法测试不同中草药对不同菌株的药敏试验。将调配好的用于实验的菌液均匀涂在SDA培养基表面,再使用平皿打孔法用直径为6mm的琼脂打孔器在平板上进行打孔,之后进行封底。
加样的时候可以使用微量加样器来吸取用于实验的已制备好的中草药药液,分别吸取并分别加入到各个孔里,每孔都平均加入 50u1。
进行抗菌中草药的药敏试验采用常规药敏纸片法进行实验测定,在各种用于实验的中草药药液中分别都浸入直径为6mm的灭菌滤纸,在中草药药液中浸润40min后将灭菌滤纸取出待用,应用于试验中时放入到之前准备好的抑菌平皿中。
每种病原菌都有其独特的生存习性,因此根据其各自不同的习性分别采取在27℃环境中培养一星期以及在37℃环境中培养24h,进行恒温培养。
根据实验结果进行药敏实验判定,对照中药抑菌圈的标准量进行定论,当抑菌圈直径在10m1以下,则实验结果为耐药,用“+”表示;当抑菌圈直径在 10~15m1之间,则实验结果为中敏,用“++”表示;当抑菌圈直径在16m1以上,则实验结果为高敏,用“+++”表示。12种中草药抑菌效果表如下图所示:
经试验结果可知,这12种中草药对犬猫皮肤病这几种常见病原菌确实具有抑菌作用,其抑菌程度各不相同。在这12味中草药中丁香、羊蹄以及栀子抑菌效果最为显著,能够更高效的抑制犬猫皮肤病病原菌。同时从实验结果中我们还能够看出对中草药使用不同的提取方法,其抑菌结果最后也不一样,例如,丁香挥发油与煎剂提取液合并使用的抑菌效果要比单纯使用丁香挥发油或煎剂的抑菌效果要好。
综上所述,我国地大物博,拥有很多丰富的中草药,治疗犬猫皮肤病仅仅依靠西医治疗容易导致病原菌形成耐药性,造成治疗效果的不理想。而中医疗法通过使用中草药进行调理,能够使犬猫皮肤病治标又治本,无副作用,避免治疗过程中抗药性菌株的产生,本实验通过探究,验证了几种中草药对犬猫皮肤病病原菌的抑制效能,以期能实现犬猫皮肤病治疗的最佳方式。