我院25例布鲁菌病临床特征与实验室分析

吴建玲

(邵武市立医院检验科，福建 邵武 354000)

布鲁菌病系布鲁杆菌感染引起的人畜共患病。近年来，由于养殖业和畜牧业的发展，我市2015年-2016年从原来的零检出到两年25例，呈快速增长态势，形势非常严峻。本病临床表现复杂，病程可长达数月至数年，极易漏诊或误诊为其它系统疾病而延误治疗。我们收集2015年-2016年我院25例布鲁菌病患者的布鲁杆菌试管凝集试验结果[1-4]及血培养结果，总结该病的流行特征、临床表现及实验室检查等方面的特点，旨在提高各临床科室医生和微生物人员对该病的认识，提高该病的诊断正确率并规范治疗。

1 资料与方法

1．1 一般资料 2015年-2016年我院分离出布鲁菌病25例，25例中男性20例，女性5例，年龄37～67岁，平均年龄52岁，大多为有明确接触牛羊及其制品史者。

1．2 实验材料 血清凝集试验是福建省邵武市疾控中心提供的结果，血培养是梅里埃BacT/ALERT 3D血液全自动培养系统及配套的需氧与厌氧瓶，应用VITEK 2微生物鉴定仪、GN鉴定卡、哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力平板均是梅里埃厂家提供。

1．3 细菌培养及鉴定 在发热期采集静脉血（或骨髓）5～10ml注入血培养瓶中，混匀，放入BacT/ALERT 3D血培养仪中37℃培养。培养瓶阳性报警后，取出培养瓶，同时接种哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力平板35℃5%～10%CO2温箱孵育72h。挑取血平板上细小菌落涂片镜检，若为革兰阴性小球杆菌或小杆菌，则配制麦氏0．5的菌悬液，用GN鉴定卡鉴定。

1．4 诊断标准 有流行病学史（明确接触牛羊及其制品史）的患者，出现持续数日乃至数周发热、多汗、乏力、肌肉和关节疼痛，淋巴结、肝、脾、睾丸肿大等临床症状，从患者血液和骨髓中培养分离到布鲁氏菌，本组病例均符合该诊断标准。

2 结果

2．1 职业分布 25例中有明确接触牛羊及其制品史者23例，其中12例为牛羊屠宰工，8例为卖牛、羊肉的个体户，3例为放牧牛羊的农民，2例无明确接触史。发病时间为3-12月，其中1例6月治愈10月复发，另1例8月治愈12月复发。

2．2 临床表现 25例患者均以持续发热、多汗、乏力等症状来我院就诊，由于其伴随症状有咳嗽、头痛、心悸、关节及腰腿疼痛或肿胀、肝脾肿大、肝功能异常等复杂多样，临床表现呈多样性且无特异性[5]，关节疼痛可逐渐转为慢性，侵袭骨骼系统、中枢神经系统、呼吸道、胃肠炎、心血管系统与皮肤，所以收住院科室也多达6个科室，其中肾内8例、神内4例、急诊4例，感染科3例，中医3例、骨科3例，其中神内1例和骨科1例没有坚持足疗程服药，分别于10月和12月复发入住肾内。

2．3 血液分析与肝功能结果 25例患者血液分析与肝功能的检测，结果报告见表1。

如表 1所示，血常规、PCT、CRP、肝功能等结果的改变缺乏特异性[6-8]，但对布鲁菌病的治疗和转归起一定辅助诊断作用，为临床医生的诊治提供参考意义。

表1 25例布鲁菌病血液分析与肝功能结果的对比

2．4 血培养及试管凝集结果 25例患者均采用血培养及试管凝集实验两种方法进行布鲁菌的检测，经过30d结果报告如表2。

表2 25例布鲁菌病两种实验室方法结果的对比

3 讨论

2015年-2016年来，布鲁菌病在我市有快速增多趋势，疫情形势严峻，我院各科医生和微生物人员对该病的快速确诊能力直接关系着人民的健康。我院25例布鲁菌病中，入住不同科室，反复不明原因发热者8例，发热间断头痛者4例，发热、咳嗽、咳痰者4例，反复发热、肝脾肿大、肝功能异常者3例，发热、乏力、头痛者3例，发热、关节、腰腿疼痛者3例等症状不一。从血液分析和肝功能的结果角度看，白细胞和中心粒细胞增高的有5例，占20%，减少的有4例，占16%；PCT增高5例、偏高18例，合计92%；CRP增高8例、偏高17例，合计100%；AST和ALT增高各3例，也仅占12%，偏高8例，占32%；这几个项目的特异性均不高，对布鲁菌病的诊断和治疗仅起一定的辅助作用。加上布鲁菌病患者临床表现多样且无明显特异性，表现为多发合并症，所以各临床医生如果经验不足，极易漏诊或误诊。

由于该病患者一开始均以发热乏力为最初症状，易被误诊为感冒，且多于当地诊所、乡镇医院就诊，只有到了多种抗菌药物治疗无效时或长期病情控制不佳等情况时，才会到上级医院来住院治疗，为避免各临床医生漏诊或误诊，对待这种临床不明原因发热的可疑病例应及时进行流行病学调查和必要的实验室检查，如血清凝集试验及血培养、骨髓培养等。血清凝集试验及血培养、骨髓培养应同时并多次送检，及时与检验人员沟通，并延长培养时间来提高阳性率。我院25例病例中均表现为血清凝集试验阳性，但血培养七天内仅22例报阳，3例血培养七天内阴性而血清凝集试验阳性，我们继续密切关注血培养，直到第10d、第15d、第25d三例陆续报阳，经鉴定均为马尔他布鲁杆菌。复发的两例布鲁杆菌凝集试验均阳性，复查血培养分别于第9d和第16d血培养仪报阳，但是分别转种血琼脂平板无生长，常规3d过1次血平板，直至第30d仍无生长，才报告阴性[9，10]。我院医生结合我室结果和血清凝集试验结果联合用药，足疗程治疗[11]，以防复发及慢性化。对布鲁菌的治疗失败的两例，不是因为布鲁菌对药物有抗性，而是因为患者未能坚持足量疗程用药。

血液或骨髓等临床标本中分离出布鲁菌是诊断布鲁菌病感染的金标准，但由于布鲁菌生长缓慢，初次分离一般需 3～7d，有时需 20～30d，容易漏检；而传统的血清学凝集性试验也是目前公认的标准方法，用于大范围的筛选和确认试验，虽然有交叉反应的存在，易造成一定的假阳性，但两者结合，互补长短，同时加强与临床医生的沟通，对疑似病例的血培养瓶应培养至第4周，转种后无菌生长才可报告阴性。另外报阳标本分别转种血琼脂平板、巧克力平板和麦康凯平板5%～10%CO2培养箱孵育，24h肉眼仅见血平板第一区有小片滋润菌苔，48h后菌落微小如针尖状，96h后形成明确的单个菌落，菌落细小，圆形、光滑、凸起、灰色、不溶血，麦康凯平板和巧克力平板不生长。括取血平板第一区菌苔涂片，经革兰染色镜检为革兰阴性小杆菌或小球杆菌，菌两端钝圆，无芽孢，排列如细沙样[12]。氧化酶阳性，触酶阳性，立即用VITEK 2细菌鉴定仪GN鉴定卡鉴定为布鲁杆菌，准确率为94%～99%，将GN中生化结果做了统计如下：ProA(+)、TyrA(+)、URE(+)、GlyA(+)、ELLM 91．2%(+)、AGlu 83．6%(+)、APPA 61．8%(+)、ILATK 52．5%(+)、SUCT 20．7%(+)。 尽早报告给临床医生，为该病的确诊治疗赢取时间。25例布鲁菌病中23例经足疗程治疗完全康复出院，复发的2例30d内血培养报阳但未检测出布鲁菌可能与已经较长时间用药但未足疗程用药有密切关系。

由于布鲁菌对人有极强致病力，常导致实验室获得性感染，被认为是潜在的生物恐怖病原菌，它还具有较强的侵袭力，布鲁菌可以通过完整的皮肤和黏膜进入宿主体内[13，14]、亦可通过形成气溶胶经呼吸道而感染[15]、还可经食用牛、羊肉及未经灭菌的乳制品通过消化道而传播。实验室工作人员应做好生物安全，注意自身防护，带好外科口罩和乳胶手套，穿好防护服，做好防护工作，在生物安全柜内按标准操作，防止感染。由于布鲁菌在外界环境中抵抗力较强，在病畜的分泌物、排泄物中能存活4个月左右，在食品中约存活2个月，对寒冷的抵抗力较强，但对湿热及消毒剂的抵抗力不强，煮沸或高压消毒立即死亡。在生物安全柜内，紫外线对布鲁菌的灭菌效果良好，15min的持续照射就能完全杀灭布鲁菌；在操作台面上，75%酒精对布鲁菌的灭菌效果良好，15min的持续作用就能完全杀灭布鲁菌[16]，培养废弃物均应高压灭菌后才能移出实验室。我室严格按照标准预防要求，做好台面消毒，紫外线照射，废物高压灭菌等措施，保证我室人员安全，避免造成工作人员实验室感染和环境污染。

目前，针对我市的布鲁菌病，我们呼吁政府及有关部门做好牲畜的检疫和免疫，有效地控制传染源，做好综合防治宣传措施，加强防治经费的投入，加强机构和专业队伍的建设，做好对公民的健康教育工作，增强农牧民们的个人保护意识，改变生产生活习惯，提高自我防护能力，在全市内做好布鲁菌病从畜到人的监测工作及筛查工作，与我室人员及时密切沟通，对SAT阳性患者血培养适当延长培养时间，密切关注，重点观察，争取不在我室漏检并及时通报疫情，与疾控中心一起监督患者密切配合治疗，做好流行病学调查，使布鲁菌病疫情得到很好的控制[17]。

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