USP22在女性宫颈癌组织中的表达及与患者病理学特征和预后的关系

常静

(周口市儿童医院（周口市妇幼保健院）妇产科，河南 周口 466000)

宫颈癌是在我国女性中常见的恶性肿瘤之一，其在临床上的高发病率以及高死亡率严重影响我国女性的生活质量、生育甚至威胁生命安全[1-3]。近年来临床上对宫颈癌的治疗取得了不小的进步，但由于其发生到形成是一个多源性、多个步骤及多阶段的过程，并且其发病原因并不十分清楚，常规治疗难以达到理想的治疗效果，因此对宫颈癌的患者来说，发现新的分子靶点，并对其采取针对性治疗成为临床的热点[4-6]。特异性肽酶22（USP22）是泛素特异性水解酶之一，其在多种恶性肿瘤中都有表达，近年来有研究表明USP22在肿瘤细胞生长过程中起到关键作用，其可以调控基因的复制和表达，从而调控细胞周期，USP22缺乏的癌细胞出现细胞生长缓慢和停滞的现象[7-9]。因此本文通过研究USP22的表达水平对宫颈癌肿瘤细胞的生长的影响，来探讨其与患者预后的关系。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选取我院因宫颈癌行手术治疗的术后标本100例（收集时间：2012年1月～2013年12月），因宫颈上皮瘤变（CIN）行手术治疗的术后标本60例。

宫颈癌组织， 年龄 41～66 岁， 平均 52．4±9．5岁，临床分期：Ⅰ期42例、Ⅱ期58例，病理学分级：G1级24例、G2级40例、G3级32例，发生淋巴结转移54例。CIN组织，年龄37～65岁，平均50．4±10．8 岁，其中 CINⅡ级 29 例、CINⅢ级 31 例：两组患者的年龄比较，差异无统计学意义 （P＞0．05）。

1．2 纳入排除标准

1．2．1 纳入标准 ⑴宫颈癌的诊断标准参考人民卫生出版社《妇产科学》第八版中的标准；⑵所有患者均在本院接受手术治疗，标本来源于手术后；⑶CIN组织标本来源于因CINⅡ级～Ⅲ级手术后标本；⑷宫颈癌患者临床分期：Ⅰ期～Ⅱ期；⑸所有患者手术前均未接受放化疗。

1．2．2 排除标准 ⑴转移性宫颈癌；⑵合并其他部位恶性肿瘤疾病疾病；⑶未经病理学证实；⑷既往具有放化疗病史。

1．3 免疫组化染色方法 二甲苯脱蜡后，采用梯度乙醇水化各5min，再用PBS冲洗，抗原修复后再次用PBS冲洗液冲洗切片，先滴加1：150稀释的一抗 （兔抗人USP22单克隆抗体），4℃保持10-12h；以PBS冲洗后再滴加二抗，37℃保持半小时，PBS清洗后DAB显色，苏木精复染后梯度乙醇脱水，二甲苯透明，并用中性树胶封片。

1．4 免疫组化结果判断 免疫组化结果判定：USP22蛋白阳性着色表达于细胞核，呈黄色、棕黄色、褐色表达，⑴根据着色强度：0分为无色、1分为淡黄色、2分为棕黄色、3分为褐色、黑色；⑵根据阳性细胞比例：阳性细胞数目所占比例≤10%为1分、阳性细胞所占比例11%～50%为2分、阳性细胞数51%～75%为3分、阳性细胞数所占比例＞75%为4分，两种积分相乘总分＜3分为阴性、≧3分为阳性。总分＜3 分：“-”表达；为 3～5 分，“+”表达；为6～9 分，“++”表达；＞9 分，“+++”表达。

1．5 术后随访 本研究纳入的100例宫颈癌患者，术后均进行了随访观察，主要观察患者的生存率、生存时间，随访方式主要通过电话、患者到门诊接受相关诊查，每一次随访做好记录，术后第1年每一个病例随访1次，术后第2年和第3年每3个月进行一次随访。

1．6 统计学方法 统计软件采用SPSS 16．0，采用均数±标准差进行统计描述；计数资料组间比较采用χ2检验；生存分析采用kaplan-meier法，生存时间分析采用log-rank秩和检验；P值＜0．05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2．1 两组标本中USP22蛋白阳性表达率比较 宫颈癌组中的USP22蛋白阳性表达率58．00%、CIN组中的USP蛋白阳性表达率31．67%，两组比较差异具有统计学意义（P＜0．05）；（表 1，图 1）。

表1 两组标本中USP22蛋白阳性表达率比较

图1 A为USP22蛋白在宫颈癌组织中阳性表达，B为USP22蛋白在CIN组织中呈阴性表达，（100倍）

2．2 宫颈癌患者癌组织中USP22蛋白阳性表达率与患者临床病理学特征的关系 组织学分级G3级、发生淋巴结转移、肿瘤病灶直径＞5cm宫颈癌组织中的USP22蛋白阳性表达率显著的高于宫颈癌组织学分级G1+G2级、未发生淋巴结转移、肿瘤病灶直径≤5cm的患者，两组比较差异具有统计学意义（P＜0．05）；（表 2）。

表2 USP22蛋白阳性表达率与患者临床病理学特征的关系

2．3 宫颈癌患者癌组织中USP22蛋白阳性表达率与患者预后的关系 USP22蛋白阳性表达患者的3年无病生存率58．62%、3年总生存率60．34%均显著的低于 USP22蛋白阴性患者的 78．57%、85．71%，差异均具有统计学意义（P＜0．05）；（表 3）。USP22蛋白阳性表达患者的生存时间显著的低于USP22 蛋 白 阴 性 表 达 患 者 （Z=4．465，P=0．035＜0．05）；图 2。

表3 宫颈癌患者癌组织中USP22蛋白阳性表达率与患者预后的关系[n（%）]

3 讨论

图2 两组患者的生存时间函数图

在全球范围内，宫颈癌在女性生殖系统恶性肿瘤的发病率中高居首位，尤其我国为该类肿瘤疾病的高发地区，据统计我国每年发病患者占全球总数的1/3-1/4，且随着人们生活方式和观念的转变，目前宫颈癌的发病有明显年轻化的趋势，严重影响了我国女性的正常生活、生育以及生命。为了尽可能的降低该疾病对女性的伤害，目前临床上多采用更先进的筛查手段，并逐步提高女性的普查意识，做到该类疾病的早发现早治疗，以提高临床上的治愈率。宫颈癌发病的重要原因是乳头瘤病毒（HPV）感染导致的宫颈正常细胞癌变，临床上是对确诊宫颈癌的患者可采用手术、放疗、化疗、药物及基因等个性化的综合治疗[10]，但目前对于宫颈癌的发病原因仍不十分清楚，其发病是一个多源性、多个步骤及多阶段的过程，其与诸多因素有关，例如早婚、早育、多个性伴侣、吸烟、免疫力低下等，因此对宫颈癌发病机制更深入全面的研究，有助于对于该病的诊断及治疗[11]。虽然近年来手术治疗宫颈癌的效果逐渐提高，但是由于癌细胞的浸润和转移的出现，严重影响了相关治疗的疗效，因此在分子水平上寻找治疗肿瘤的靶向治疗逐渐在临床上获得认可，而宫颈癌治疗常关注的分子靶点是VEGF，其可以控制肿瘤组织的血管的生成，从而抑制肿瘤的生长，在临床上取得了一定疗效，因此这也提示我们可以寻找新的抑制肿瘤生长的分子靶点[12，13]。DUBs是一类蛋白酶超家族，可以作用于特异性蛋白质-泛素，切断泛素链，从而避免底物降解，其中USP22是DUBs中最多一类，作为一个人类转录辅助因子复合物（hSAGA）的亚单位，可以降解对组蛋白H2A、H2B的尾端特异的泛素化分子，并通过这种方式改变核酸的复制和表达，进而影响癌细胞的增殖，从而控制肿瘤的生长，并有希望成为抑制肿瘤的关键靶点[14，15]，目前已经在多种恶性肿瘤发现其存在，但在宫颈癌却报道较少，因此本文通过研究UPS22与宫颈癌的关系，来为临床上的治疗提供新的选择。

3．1 两组标本中USP22蛋白阳性表达率比较 本文考察了USP22在宫颈癌和CIN中的表达，发现宫颈癌组中的USP22蛋白阳性表达率高于CIN组，两组比较差异具有统计学意义，这表明USP22在宫颈癌肿瘤细胞的生长过程中扮演着重要角色，其与癌细胞的增殖关系密切，因此可以以USP22为分子靶点，采用治疗药物干扰其正常的表达，进而抑制癌细胞的增殖，提高患者的治疗效果。

3．2 宫颈癌患者癌组织中USP22蛋白阳性表达率与患者临床病理学特征的关系 肿瘤病情的发展进程可由组织学分级、发生淋巴结转移和肿瘤病灶直径等指标来表达，因此可以通过研究USP22与以上指标的关系，来表达其与肿瘤病情发展的关系。本文发现组织学分级G3级、发生淋巴结转移、肿瘤病灶直径＞5cm宫颈癌组织中的USP22蛋白阳性表达率显著的高于宫颈癌组织学分级G1+G2级、未发生淋巴结转移、肿瘤病灶≤5的患者，两组比较差异具有统计学意义，这表明USP22与肿瘤病情发展关系密切，推测其与宫颈癌的分化程度有关，并且参与宫颈癌的淋巴转移过程，还可能参与了肿瘤的生长和浸润。

3．3 宫颈癌患者癌组织中USP22蛋白阳性表达率与患者预后的关系 由于以USP22为分子靶点的治疗药物，具有更高的靶向性，可以在更大程度上抑制癌细胞的扩散，从而达到改善预后的目的，因此本文以USP22蛋白阳性表达患者治疗后的生存率为考察指标，发现USP22蛋白阳性表达患者的3年无病生存率和3年总生存率均显著的低于USP22蛋白阴性患者的；USP22蛋白阳性表达患者的生存时间显著的低于USP22蛋白阴性表达患者，结果均具有统计学意义，这表明USP22不仅参与了宫颈癌变的发生发展过程，并且还参与了癌细胞的转移和扩散，以USP22为分子靶点的治疗明显可以改善患者预后，提高患者生存率，延长患者生存时间。

综上所述，本文通过研究USP22蛋白阳性表达与宫颈癌的关系，阐明了USP22参与了宫颈癌发生、发展、转移以及扩散，并以其为分子靶点的治疗明显提高生存率和改善患者预后，有望成为新的宫颈癌的治疗靶点。

[1]孔琳，雷张涛，周亮．宫颈癌化疗进展[J]．中国医师进修杂志，2015，38(7)：541-543．

[2]幸琼，幸情．HR-HPV与TCT筛查宫颈癌及其癌前病变的临床价值[J]．实验与检验医学，2016，34(6)：761-763．

[3]Mckee SJ，Bergot A，Leggatt GR．Recent progress in vaccination against human papillomavirus-mediated cervical cancer[J]．Reviews in Medical Virology，2015，25(S1)：54-71．

[4]张燕茹，王月云．宫颈癌防治研究进展[J]．中国肿瘤，2015，24(12)：998-1002．

[5]黄璇，张询，HUANGXuan，等．宫颈癌预后相关分子标志物的研究进展[J]．肿瘤防治研究，2016，43(9)：806-810．

[6]Kahng J，Kim EH，Kim HG，et al．Development of a cervical cancer progress prediction tool for human papillomavirus-positive Koreans：A support vector machine-based approach[J]．Journal of International Medical Research，2015，43(4)：217-230．

[7]郑凤霞，聂丽菊，孙平风，等．宫颈癌中表皮生长因子受体基因状态的研究进展[J]．中国妇幼保健，2015，30(15)：2465-2467．

[8]王技军，贺岩．USP22在恶性肿瘤中的研究进展[J]．实用肿瘤学杂志，2016，30(6)：551-554．

[9]Jones J，Dean JL，Schrecengost RS，et al．Abstract 1862：Discerning the role of USP22 in prostate cancer development and progression[J]．Cancer Research，2015，75(15)：1862-1862．

[10]古杰超，冯秀兰，黄伟刚．鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)与细胞角蛋白19(CK19)联合检测对早期宫颈癌及癌前病变诊断的临床价值[J]．实验与检验医学，2016，34(5)：618-620．

[11]李霓，郑荣寿，张思维，等．2003～2007年中国宫颈癌发病与死亡分析[J]．中国肿瘤，2012，21(11)：801-804．

[12]宋春丽．宫颈癌组织中KISS-1、VEGF的表达及意义[J]．中国热带医学，2015，15(10)：1221-1223．

[13]王广娇，杨欣，郝敏．血管内皮生长因子A在宫颈癌发病机制中的研究进展[J]．国际妇产科学杂志，2016，43(5)：519-523．

[14]Hu J，Yang D，Zhang H，et al．USP22 promotes tumor progression and induces epithelial-mesenchymal transition in lung adenocarcinoma[J]．Lung Cancer，2015，88(3)：239-245．

[15]敖宁，刘玉琴，AONing，等．USP22在肿瘤发生发展中的作用研究进展[J]．基础医学与临床，2012，32(10)：1235-1238．