杨淑芬 王海颖
(上海中医药大学,上海 201203)
芳香开窍类中药性温,味辛,擅走窜,归于心肺二经。一般古代医家利用口服给药,所用开窍药多为安宫牛黄丸、苏合香丸等方剂,在治疗厥心痛等急危重症上发挥了重要作用。而本次实验设计通过鼻黏膜吸收芳香开窍药,从而增高其血药浓度,经过血脑屏障发挥开窍醒神之功[1]。本文通过调查文献,组成两个芳香开窍方剂:配方一组(薄荷、白芷、冰片、栀子花)、配方二组(石菖蒲、肉桂、冰片、桂花)。并已通过实验证明其精油气雾能使5%戊巴比妥纳催眠的小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间明显缩短[2]。为了进一步探究其醒神作用强弱,故设计与同样具有芳香开窍作用的风油精[3]进行对比实验。现报告如下。
1.1 实验动物 SPF级ICR小鼠36只,雌雄各半,25~33 g;清洁级短毛豚鼠32只,雌雄各半,体质量200~250 g,年龄约1个月大,由上海中医药大学实验中心提供,许可证号:SCXK(沪)2013-0016。
1.2 试剂与药物 戊巴比妥钠由Merck公司提供,以蒸馏水配制成0.5%溶液。薄荷精油(主要成分薄荷脑)、肉桂精油(主要成分肉桂醛)、白芷精油(主要成分白芷素)、石菖蒲精油(主要成分β细辛醚)、桂花精油(主要成分十六碳酸)、栀子花精油(主要成分芳樟醇)、合成冰片。以上精油皆为水蒸气蒸馏法提取,由广州精美中化有限公司提供。风油精(由漳州水仙药业有限公司生产)。
1.3 药物溶液配制 配方一组加入薄荷精油、白芷精油、栀子花精油各 0.2 mL,冰片0.2 g,加蒸馏水至20 mL。配方二组加入肉桂精油、石菖蒲精油、桂花精油各0.2 mL,0.2 g冰片,加蒸馏水至20 mL。风油精组加入风油精0.8 mL,加蒸馏水至20 mL。
1.4 实验仪器 超声波雾化器×2(100 mL),由东莞市乐朝实业有限公司生产。电子天平,上海中医药大学动物实验中心提供。密闭透明塑料箱×2,容积27 cm×35 cm×45 cm,由北京坤朋茶花家居用品有限公司生产。
1.5 实验方法 1)过敏实验。(1)实验目的:为探究配方1号、配方2号和风油精的精油气雾是否会对动物呼吸系统造成刺激反应,故使用豚鼠作为实验动物。豚鼠嗅觉发达,易过敏。常用于药物过敏和平喘药的研究。豚鼠过敏症状表现,见表1。(2)实验步骤:32只豚鼠,置于动物实验中心1周,使其适应环境。1周后随机分组,每组8只,雌雄各半,分为4组,分别为配方一组,配方二组,风油精对照组,空白组。配方一组8只,置入透明塑料箱内,给予配方一号气雾吸入15 min;后取出。记录喷雾前15 min状态,喷雾15 min后的状态,喷雾结束后15 min的状态。将塑料箱洗净,待箱内气味消失后重复上述步骤,进行剩余3组的过敏实验。隔天重复以上步骤,实验共重复3次。(3)实验结果:见表2。配方一号、配方二号和风油精均不使豚鼠过敏。2)对比实验。(1)实验目的:对比配方一组、配方二组和风油精组的醒神功效。(2)实验步骤:36只小鼠置于动物实验中心1周,使其适应环境。1周后称质量,标记,并随机分组,每组9只,雌雄至少4只,分为4组,分别为配方一组,配方二组,风油精组,空白组。将配方一组小鼠置于充满该组配方气雾的透明塑料箱内15 min,后取出置于空气15 min,按50 mg/kg比例,腹腔注射5%戊巴比妥钠溶液。以注射时间到小鼠翻正反射消失为睡眠潜伏期,翻正反射消失持续时间为睡眠时间。记录注射时间、睡眠潜伏期和翻正反射消失持续时间。将塑料箱洗净,待箱内气味消失后重复上述步骤,进行剩余3组的对比实验。隔天重复以上步骤,实验共重复3次。每次实验各组实验顺序随意。
表1 豚鼠过敏分级
1.6 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件。计量资料以(±s)表示,采用t检验检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 过敏实验 见表2。配方一号、配方二号和风油精均不使豚鼠过敏。
表2 豚鼠过敏强度
2.2 对比实验 见表3,图1~2。配方一组和配方二组均能较风油精组缩短小鼠睡眠时间(均P<0.01),配方一组较风油精组能延长睡眠潜伏期(P<0.05),而配方二组和风油精组较空白组睡眠潜伏期延长(P<0.05)。配方二组和风油精组比较,睡眠潜伏期差别不大(P>0.05)。
表3 各配方组对戊巴比妥所致小鼠睡眠时间的影响(±s)
表3 各配方组对戊巴比妥所致小鼠睡眠时间的影响(±s)
与空白对照组比较,*P<0.05;与风油精组比较,△P<0.05,△△P<0.01。
组别 n 睡眠时间(min) 睡眠潜伏期(min)配方一组 8 20.78±6.93△△ 11.11±6.14△配方二组 8 26.76±6.77△△ 5.86±1.32*风油精组 8 40.54±7.97 5.72±2.77*空白对照组 8 48.23±5.69 4.16±1.10
图1 各组对小鼠睡眠时间的影响
图2 各组对小鼠睡眠潜伏期的影响
由实验结果可得配方一组和配方二组的醒神效果优于同等剂量的风油精。风油精主要成分为薄荷脑、樟脑、桉叶油醇、水杨酸甲酯[4]。其中薄荷脑能加强戊巴比妥钠介导的中枢抑制作用[5],樟脑在中枢受抑制时兴奋呼吸,升高血压[6]。桉叶油醇和水杨酸甲酯主要药理作用为抗炎抗菌[7-8]。故风油精在整体上以消炎镇痛为其最突出功效,兼芳香醒神,但作用不大。
配方一号和配方二号中几乎所有中药都从不同角度达到开窍醒神之功。冰片不仅能通过开放血脑屏障而提高药物的脑内浓度,而且对中枢神经兴奋有双向调节作用,既可以镇静安神(延长小鼠睡眠潜伏期),又具有醒脑作用(缩短小鼠睡眠时间)[9]。石菖蒲挥发油主要成分β-细辛醚通过血脑屏障兴奋脊髓、抑制中脑和大脑从而达到开窍和抗惊厥的作用[10]。小剂量白芷具有兴奋延脑呼吸中枢、血管中枢[11]。肉桂对中枢系统不同部位具有兴奋或抑制作用[12],对全身血管有扩张作用[13]。栀子花有抗焦虑作用[14],桂花能有效抗炎抗氧化[15]。因此通过现代药理可知,配方一号和配方二号药物成分的醒神作用强于风油精。
本实验证明了自拟的两个中药开窍配方精油的醒脑作用强于具有一定刺激气味的风油精,且根据实验结果,风油精的醒神效果较空白对照组水蒸气而言,并无明显差距。通过本次实验,则表明风油精确有醒神功效但作用不强。《本草纲目》记载“冰片,通诸窍,散郁火”。《神农本草经》认为“石菖蒲,补五脏,通九窍,明耳目”,都为本次实验配方的醒神功效提供理论依据。基于明确药理实验的基础上,日后将进一步以人体为对象设计精油实验,明确人体对于精油气雾的敏感度和其对人体的醒神作用,以期望提高大部分“倦怠嗜睡的疲劳综合症者”的生活质量,且本实验仅通过文献来明确每味中药对于中枢系统的药理作用,今后实验将侧重于从复方角度,研究阐述配方整体联合产生、互相影响的功效。
[1]杨淑芬,杨艺娇,王海颖.浅述开窍醒脑中药作用机制[J].中国中医急症,2017,26(2):244-245,260.
[2]杨艺娇,杨淑芬,王海颖.中药挥发油配方对小鼠睡眠时间的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2017,15(15):1838-1859.
[3]邹亚群,李东,李锐.风油精的药效学研究[J].中国药业,2003,12(8):25-26.
[4]周自新.风油精中4种挥发油的含量测定[J].中国中药杂志,1996,42(7):418-419,425.
[5]陈光亮,佘玉宝,李冬梅.薄荷油及其有效成分药理作用的研究概况[J].中国中医药信息杂志,2000,7(2):33-34.
[6]丁元刚,马红梅,张伯礼.樟脑药理毒理研究回顾及安全性研究展望[J].中国药物警戒,2012,9(1):38-42.
[7]李光友,徐建民,范菊香.桉叶油的药理作用及其临床研究进展[J].安徽农业科学,2014,54(12):3602-3603.
[8]马建华.水杨酸甲酯清除羟基自由基活性的研究[J].化学通报,2006,73(3):228-230.
[9]刘洋,张伯礼,胡利民.冰片的药理实验研究概况[J].天津中医药,2003,21(4):85-87.
[10]韩亚亮,刘萍,何新荣,等.石菖蒲挥发油的基本成分及其药理作用研究进展[J].中国药物应用与监测,2011,8(2):120-124.
[11]朱艺欣,李宝莉,马宏胜,等.白芷的有效成分提取、药理作用及临床应用研究进展[J].中国医药导报,2014,35(31):159-162,166.
[12]张利芳,罗春,王晖.常见南药中挥发油药理作用研究进展[J].广东药学院学报,2014,32(1):115-117.
[13]吴凡,贾汝汉.肉桂提取物的药理作用研究进展[J].医药导报,2012,31(7):882-885.
[14]姜冬梅,朱源,余江南,等.芳樟醇药理作用及制剂研究进展[J].中国中药杂志,2015,61(18):3530-3533.
[15]丁立新,张宇,于德成.桂花体内抗氧化及抗炎作用研究[J].黑龙江医药科学,2009,38(4):7.