胃癌化疗前后血清巨噬细胞抑制因子—1水平的变化及其临床意义

谢艳茹+吴敏华+周月芬

[摘要] 目的 探討进展期胃癌化疗前后血清巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）水平的变化及其临床意义。 方法 回顾性分析2013年1月～2015年1月在丽水市中心医院住院的进展期胃癌患者61例，应用酶联免疫吸附测定双抗体夹心法检测其化疗前、化疗2个周期后血清MIC-1水平，采用电化学发光免疫分析仪检测上述胃癌患者血清标本癌胚抗原（CEA）、糖类抗原（CA199）浓度，分析化疗前后血清肿瘤标志物水平的变化与临床资料的关系。 结果 化疗后MIC-1、CEA、CA199水平均明显低于化疗前，差异均有统计学意义（P < 0.05）。MIC-1水平与临床分期及分化程度相关（P < 0.05）。MIC-1联合CEA、CA199三者作为一个肿瘤标志物，化疗前其表达与临床分期、分化程度及化疗疗效相关（P < 0.05），与腹水高度相关（P < 0.01）；化疗后其表达与腹水、分化程度、化疗效果均相关（P < 0.01）。 结论 MIC-1在诊断进展期胃癌方面有较高的研究价值，同时联合CEA、CA199检测可以更好地评价胃癌患者的化疗效果，对于判定胃癌患者预后及预示复发有一定的预测价值。MIC-1作为一种新的肿瘤标志物具有良好的应用前景及研究价值。

[关键词] 巨噬细胞抑制因子；肿瘤标志物；胃癌；研究价值

[中图分类号] R735.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）01（b）-0092-05

[Abstract] Objective To investigate the changes and the clinical significance of serum macrophage inhibitory cytokine （MIC-1） levels before and after chemotherapy in advanced gastric cancer. Methods The clinical data of 61 patients with advanced gastric cancer admitted to Lishui Central Hospital from January 2013 to January 2015 were retrospective analyzed. Double antibody sandwich ELISA method was applied to detect the serum MIC-1 levels before chemotherapy and after 2 cycles of chemotherapy. The carcinoembryonic antigen （CEA） and cancer antigen-199 （CA199） concentration in serum samples of the gastric cancer were detected by electrochemiluminescence immunoassay analyzer. Relationship between the levels of serum tumor marker before and after chemotherapy and the clinical data were analyzed. Results After chemotherapy， the levels of MIC-1， CEA and CA199 were all significantly lower than those of before chemotherapy， with statistically significant differences （P < 0.05）. The level of MIC-1 was correlated with the clinical stage and the degree of differentiation， with statistically significant differences （P < 0.05）. MIC-1 combined with CEA and CA199 as one tumor marker， before chemotherapy， the expressions were correlated with the clinical stage， the degree of differentiation and the chemotherapy efficacy （P < 0.05）， and was highly correlated with ascites （P < 0.01）. After chemotherapy， the expressions were highly correlated with ascites， differentiation and chemotherapy efficacy （P < 0.01）. Conclusion This study suggests that MIC-1 has high research value in the diagnosis of advanced gastric cancer. MIC-1 combine with CEA and CA199 can better evaluate the chemotherapy efficacy in patients with gastric cancer and has certain prognostic value for determining the prognosis and the occurrence. As a new tumor marker， MIC-1 has good application prospect and research value.endprint

[Key words] Macrophage inhibitory factor； Tumor marker； Gastric cancer； Research value

中国每年都有较其他国家更多的新发胃癌病例，在我国其发病率和死亡率均升至恶性肿瘤的第三位。自2005年以来，丽水地区胃癌发病率一直高居首位，严重危害人们健康[1]。胃癌在临床诊治过程中，肿瘤标志物检测已经广泛开展，目前临床常用的肿瘤标志物主要是癌胚抗原（CEA）、糖类抗原199（CA199）等，但缺乏较高的特异性及灵敏度，且不能作为生化复发及疗效评定指标。目前越来越多的实验采用新的或几种肿瘤标志物联合检测，进而提高胃癌的诊断效能，更好地进行疗效判定及预后评价。近年大量研究发现，巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1）作为人转化生长因子β（TGF-β）家族成员，广泛参与细胞凋亡、侵袭和转移[2]。正常血清中，MIC-1表达水平低下，而在恶性肿瘤、炎症等病理情况下MIC-1表达水平可明显升高，且持续时间显著延长[3]。它与胃癌的关系十分密切，与其他致癌生长因子共同作用可增强肿瘤细胞的侵袭性和转移能力，使胃癌的恶性生物学行为增加，并在胃癌患者血清及胃癌组织中高表达[4]。本研究旨在探讨化疗前后胃癌患者血清MIC-1、CEA、CA199表达水平的变化，以探讨联合检测MIC-1作为胃癌化疗效果评价指标的可行性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2013年1月～2015年1月在丽水市中心医院（以下简称“我院”）肿瘤内科确诊的进展期胃癌患者61例为研究对象。纳入标准：①经组织学确诊的进展期胃癌患者；②所有患者均有完整的临床数据；③主要器官功能基本正常，无严重合并症；④预计生存时间>3个月。记录患者相关的临床数据，包括性别、年龄、部位、病理分化程度、肿瘤临床分期、化疗前后两周期肿瘤标志物在血清中的水平及化疗效果等。胃癌病理分类依据世界卫生组织肿瘤病理学及遗传学分类[5]，肿瘤分期根据美国癌症联合委员会（AJCC）胃癌TMN分期法（2010年第7版）[6]。其中男38例，女23例；年龄39～72岁，中位年龄62岁；初治42例，复治19例；高分化腺癌5例，中分化腺癌23例，低分化腺癌33例；Ⅱ期8例，Ⅲ期12例，Ⅳ期41例；伴发腹水18例，无腹水43例。

1.2 血清肿瘤标志物检测

收集61例胃癌患者化疗前及化疗2个周期后12～16 d的血清标本，采用带有分离胶的真空采血管抽取患者空腹静脉血4 mL，自然凝集30 min，8℃，4000 r/min离心15 min，分离血清分装并-80℃冰箱保存。血清MIC-1检测采用酶联免疫吸附测定双抗体夹心法，试剂盒购自北京金紫晶生物医药有限公司（E00056），伯乐公司imark酶标仪检测各孔吸光度（OD）值，严格按照仪器和试剂使用说明书操作。罗氏Cobase 601全自动电化学发光分析仪及配套试剂检测血清CEA、CA199水平。CEA、CA199的正常范围分别为0～5 ng/mL、0～37.0 U/mL。

1.3 化疗方案及疗效评定标准

采用NCCN指南推荐[7]的标准SOX（奥沙利铂注射液+替吉奥胶囊）方案，其中奥沙利铂注射液（生产厂家：江苏恒瑞医药股份有限公司，50 mg/支，生产批号：16092116）130 mg/m2，静脉滴注3 h，第1天；替吉奥胶囊（生产厂家：鲁南制药有限公司生产，20 mg/粒，生产批号：023160904）80 mg/m2，分2次，餐后口服，第1～14天，每21 d为1个周期，至少完成2个周期。所有可测量病灶均有化疗前的基线测量，以后每2个周期进行影像学检查测量。疗效评价[8]按RECIST标准分为完全缓解（CR），部分缓解（PR），病情稳定（SD）和病情进展（PD）。以CR+PR统计为化疗有效，以PD+SD统计为化疗无效。至少完成2个周期后评价疗效。CR或SD者4周后复查影像学检查，如患者在症状缓解后再次加重则及时复查。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0对所得数据进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统計学意义。

2 结果

2.1 化疗前后患者MIC-1、CA199、CEA水平变化

化疗后CEA、CA199、MIC-1指标均低于化疗前，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 化疗前MIC-1、CA199、CEA与临床分期和组织学分级的关系

CEA与临床分期无明显相关性（P > 0.05），但与分化程度相关（P < 0.01）。CA199与临床分期相关（P < 0.01），但与分化程度无明显相关性（P > 0.05）。MIC-1与临床分期及分化程度均相关（P < 0.05）。见表2。

2.3 MIC-1、CA199、CEA作为联合标志物与临床分期、组织学分级、疗效的关系

MIC-1、CEA、CA199三者作为一个肿瘤标记物，化疗前其表达与临床分期、分化程度、腹水、化疗效果相关（P < 0.05），其中与腹水高度相关（P < 0.01）；化疗后其表达与分化程度、腹水、化疗效果均高度相关（P < 0.01），与临床分期无相关性（P > 0.05）。见表3。

3 讨论

胃癌是临床常见的消化系统恶性肿瘤，手术、化疗、放疗是主要治疗手段，疗效评估采用胃镜、增强CT等，但存在胃部充盈情况及胃镜操作人员不均质等问题，进而影响病情评估。因此，探寻有效的血清学肿瘤标志物对于胃癌早期诊断、监测病情进展及疗效评估具有重要意义。

MIC-1是1997年Bootcov等[9]研究巨噬细胞活化相关基因时从U937细胞系cDNA文库首先分离出来的。它是巨噬细胞活化表达的产物。管华琴等[10]研究发现，MIC-1在人胃癌组织中高表达，随着慢性炎症由癌前病变粘膜组织向胃癌的演变过程，MIC-1表达显著增加，提示MIC-1的表达是胃癌发生的早期事件，参与胃癌的发生发展。MIC-1作为早期胃癌肿瘤抑制因子，通过活化p53通路[11]、抑制COX-2表达[12]、诱导Caspase-8通路[13]及激活磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶和糖原合成酶3β信号通路[14]等多种作用机制发挥作用。相反，在胃癌晚期，它通过抑制β-cateninδ1基因表达[15]、上调uPA系统提高胃癌细胞的侵袭能力[16]和诱导胃癌细胞中ErbB2受体酪氨酸激酶的过度表达[17]等参与促癌作用。Lee等[18]研究发现，胃癌淋巴结转移或远处转移MIC-1 mRNA表达明显高于无转移组，提示MIC-1表达与肿瘤转移相关。Zhang等[19]通过不同治疗手段治疗早期胃癌，结果显示，MIC-1可以作为判断胃癌预后的一个重要标志物。同时Mehta、Liu等[20-21]研究结果也显示，MIC-1可作为早期肺癌、肠癌诊断及预后评估的潜在的新血清肿瘤生物标志物。本研究主要探究MIC-1在评价胃癌患者化疗效果中所起的作用。endprint

本研究将61例胃癌患者作为研究对象，实验数据分析显示，化疗后MIC-1、CEA、CA199水平均较化疗前有明显下降，差异均有统计学意义（P < 0.05），提示这3种肿瘤标志物均有单独作为预测胃癌化疗效果指标的可能性。同时MIC-1水平与临床分期及分化程度均相关，CEA仅与分化程度相关，CA199仅与临床分期相关，提示MIC-1与CEA、CA199相比，可能更好地预测胃癌患者的恶性程度及预后。本研究进一步将MIC-1、CEA、CA199三者作为肿瘤标志物联合检测，其化疗前表达水平与临床分期、分化程度及化疗效果相关，但与腹水明显相关。化疗后其表达与分化程度、腹水、化疗效果均有较高相关性。结果提示，联合检测MIC-1、CEA、CA199三者作为肿瘤标志物可以更好地判断胃癌患者的临床分期及恶性程度，同时对于合并腹水患者具有潜在的诊断价值，而且可以更好地评价胃癌患者化疗的效果，指导临床治疗方案的调整。与Murielle、王小兵、吴佳等[22-24]研究结果显示的MIC-1对于提高胃癌早期诊断水平以及评价临床疗效具有重要的临床意义和价值的研究结果相符。但限于本研究病例样本量小，还需进一步扩大样本量进行研究。

综上所述，MIC-1与CEA、CA199相比，能更好地预测胃癌患者的恶性程度及预后，MIC-1在诊断伴有恶性腹腔积液的Ⅳ期胃癌方面有较高的研究价值，同时联合CEA、CA199检测可以更好地评价胃癌患者的化疗效果，对于判定胃癌患者预后及预示复发有一定的预测价值。MIC-1作为一种新的肿瘤标志物具有良好的应用前景及研究价值。

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（收稿日期：2017-10-13 本文编辑：王 娟）endprint