非霍奇金淋巴瘤患者T淋巴细胞亚群测定的临床意义

沈 君，王开泰，陆红娟

(上海市第一人民医院宝山分院，上海 200940)

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一组高度异质性的淋巴系统恶性肿瘤，起源于B淋巴细胞、T 淋巴细胞或自然杀伤(NK)细胞[1]。NHL的发生、发展与机体系统的免疫功能状态密切相关，通常伴有免疫功能的抑制和损害，包括细胞免疫功能以及体液免疫功能紊乱[2]。T淋巴细胞在体内的数量和比例相对比较稳定，一旦出现数量变化或比例失调可引起免疫机制紊乱[3]。本文通过检测NHL患者外周血T淋巴细胞亚群的变化，探讨其临床价值。

1 临床资料

1.1一般资料 选取我院2010年1月—2015年12月初治NHL患者105例作为NHL组，均经淋巴结活检组织病理学检查确诊，诊断及分类符合WHO 2008淋巴瘤分类标准。患者男61例，女44例；中位年龄66(26～88)岁，弥漫大B细胞淋巴瘤80例，套细胞淋巴瘤9例，伯基特淋巴瘤6例，滤泡性淋巴瘤10例；病理分期Ⅲ/Ⅳ期72例，Ⅰ/Ⅱ期33例;化疗后缓解(部分缓解或完全缓解)60例，未缓解(无效或疾病进展)45例。选择同时期来院体检、未发现明确肿瘤疾患的正常人群52例作为健康对照组，其中男27例，女25例；中位年龄55(21～80)岁。

1.2研究方法 采集入选对象清晨空腹静脉血2 mL，血液标本EDTA抗凝，制备样本。样本白细胞计数应在(4.0～10.0)×109L-1，若>10.0×109L-1的样本用PBS稀释，若 <4.0×109L-1的样本分离单个核细胞，溶血标本不能用。血液样本均在采集后6 h内处理。采用Beckman CoulterEPICS XL型流式细胞仪测定CD4+、CD8+水平并计算CD4+/CD8+值。

1.3统计学方法 采用SPSS 17.0软件包进行数据统计和分析。计量资料符合正态分布以均值±标准差描述，行t检验；非正态分布以中位数进行统计描述，比较采用方差分析和q检验; 对预后因素行多因素COX分析；计数资料用百分数(%)进行描述，行卡方检验； 检验水准定为α=0.05。

2 结 果

2.1NHL组与健康对照组T淋巴细胞亚群含量比较 NHL组患者CD4+水平显著低于健康对照组，CD8+水平显著高于健康对照组，CD4+/CD8+显著低于健康对照组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1 NHL组与健康对照组T淋巴细胞亚群检测结果

2.2不同分期NHL患者T淋巴细胞亚群含量比较Ⅲ/Ⅳ期NHL患者CD4+显著低于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，CD8+显著高于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，CD4+/CD8+显著低于Ⅰ/Ⅱ期NHL患者，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表2。

表2 不同分期NHL患者T淋巴细胞亚群检测结果

2.3初治NHL缓解者化疗前后T淋巴细胞亚群含量比较 化疗后CD4+较化疗前明显升高，CD8+明显降低，CD4+/CD8+明显升高，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表3。

表3 初治NHL缓解者化疗前后T淋巴细胞亚群检测结果

2.4初治NHL未缓解者化疗前后T淋巴细胞亚群含量比较 化疗后CD4+较化疗前有所降低，CD8+有所升高，CD4+/CD8+有所降低，差异均无统计学意义(P均>0.05)。见表4。

表4 初治NHL未缓解者化疗前后T淋巴细胞亚群检测结果

3 讨 论

肿瘤的发生/发展与机体的免疫状况密切相关，在机体抗肿瘤免疫效应中，细胞免疫起着重要的作用[4]。T淋巴细胞是最重要的细胞免疫细胞，它通过功能各异的T淋巴细胞亚群来发挥肿瘤免疫及监视作用，T细胞各亚群比例是反映细胞免疫功能的重要标志[5-6]。其中CD4+细胞是主要的细胞免疫应答细胞，CD8+细胞具有杀伤靶细胞的功能，同时CD8+细胞对CD4+细胞又具有调节、抑制作用，CD4+/CD8+比值反映机体的细胞免疫功能状态，CD4+/CD8+保持动态平衡是维持机体免疫力的关键因素。

血液肿瘤患者多伴有外周血T淋巴细胞亚群的变化，在血液肿瘤发生发展过程中，肿瘤细胞产生免疫抑制因子来抑制淋巴细胞分化增殖，CD4+淋巴细胞表面抗原减少，CD8+细胞反应性增多，CD4+/CD8+比值下降[7-8]，机体免疫功能出现紊乱。非霍奇金淋巴瘤作为最常见及高发的血液肿瘤之一，体内存在细胞免疫功能受损[9]。为进一步明确NHL患者免疫功能情况，笔者研究通过流式细胞仪(FCM)测定外周血T淋巴细胞亚群来了解患者疾病状态，从而指导诊疗。

Yang等[10]对B细胞淋巴瘤患者进行淋巴组织细胞分析,结果显示在调节性T细胞升高的肿瘤组织中CD4+/CD8+的比值下降。本研究结果证实初诊NHL患者外周血CD4+细胞及CD4+/CD8+比值较正常健康人群显著降低，CD8+细胞较健康人群显著升高。本研究结果亦显示，Ⅲ/Ⅳ期NHL患者外周血CD4+细胞、CD4+/CD8+比值较Ⅰ/Ⅱ期NHL患者显著降低，CD8+细胞显著升高。从研究结果可以看出，与健康人群相比，NHL患者确实存在免疫紊乱，且与临床分期、疾病进展密切相关，T淋巴细胞亚群检测为临床提供了一项简易可行的病情评估免疫学指标。本研究结果与国内多个研究结果一致[10-12]。

Ansell等[13]早期研究中已证明弥漫大B细胞淋巴瘤中, T淋巴细胞中活化的CD4+细胞含量越高则预后越好。本次研究结果显示，NHL患者治疗缓解者外周血CD4+细胞，CD4+/CD8+比值较化疗前显著升高，CD8+细胞较化疗前显著降低；治疗未缓解者外周血CD4+细胞，CD4+/CD8+比值较化疗前有所下降，CD8+细胞较化疗前相比有所上升，但差异无统计学意义，可能与样本量较少有关。本研究结果说明治疗前NHL患者细胞免疫功能多处于受抑制状态，治疗有效的NHL患者体内细胞免疫功能有所恢复。而化疗后未缓解的患者的细胞免疫功能仍处于受抑状态。T淋巴细胞亚群测定有助于评估病情及判断预后。Diederichsen等[14]研究指出CD4+/CD8+比值可作为判断肿瘤预后的相关指标，本研究结果与之一致。

综上所述，NHL患者体内存在细胞免疫紊乱，通过检测外周血T淋巴细胞亚群有助于了解患者的免疫状况，可实现疾病评估及协助判断预后。T淋巴细胞亚群检测方法简单易行，为临床及时了解NHL患者病情变化提供了一项有效的参考手段。

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