三批种鹅相继发生禽霍乱的诊断与治疗

牛绪东，张春玮，任 禾，冯学俊，马洪超，张元瑞，马卫明，刘建柱

（1.山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018；2.中国动物疫病预防控制中心，北京 100125）

1 发病情况

2017年8月山东省菏泽市某养殖户饲养的3批种鹅相继发病死亡。这3批种鹅因在发病前2个月开始强制换羽，被限食13 d（只喝水不喂食）。恢复采食量后，由于没有产蛋，该养殖户对其饲喂了育成期饲料（饲料质量较差）。饲喂1个半月后，3 000只18月龄灰鹅和700只8月龄白鹅开始发病死亡。相隔10 d左右，3 000只4月龄白鹅开始发病死亡。截至9月8日，18月龄灰鹅死亡96只，8月龄白鹅死亡32只，4月龄白鹅死亡24只。该养殖户曾饲喂青霉素、阿莫西林和黄芪多糖等药物，全群注射头孢噻呋钠。虽暂时有一定疗效，但不久又出现发病死亡。

2 临床症状

病鹅精神沉郁或嗜睡、羽毛松乱、翅膀下垂、食欲减退或废绝、离群独立、腿无力且行动缓慢。眼及鼻孔处有浆液性和黏液性分泌物，气喘，甩头频繁。病鹅严重下痢，排出腥臭的黄绿色或黄白色稀便，体温多在42～43 ℃。急性病例多于3 d内死亡，有的病鹅无前驱症状，突然于夜间死亡。个别病程较长的鹅可见跗关节肿大，并出现跛行、下痢、贫血、消瘦和瘫痪症状，肢爪干瘪无光泽（图1）。

图1 急性病例爪鲜亮，慢性病例爪干瘪

3 剖检变化

腹腔内脏浆膜、心包膜、腹膜、肠系膜及其周围脂肪可见明显的出血片和出血点（图2、图3、图4）；喉头及气管黏膜潮红、出血（图5）；肺脏充血、出血，甚至水肿（图6）；肝脏肿大、变性，质脆且微黄，并出现多量针头大小的灰黄色或黄白色坏死点（图7）；心包内积有淡黄色液体（图8），心外膜及心耳出血（图9），心内膜不同程度出血（图10）；脾脏肿大、质脆、出血，且有坏死灶（图11）；肾脏轻度肿大、出血；胰腺潮红，可见出血点及白色坏死点（图12）；胃肠黏膜出血，特别是十二指肠黏膜更明显；卵泡出血、变性（图13）。

图2 腹腔内脏浆膜严重出血

图3 心包膜及腹膜可见明显的出血片和出血点

图4 肠系膜及周围脂肪出血

图5 喉头及气管黏膜潮红、出血

图6 肺脏充血、出血、水肿

图7 肝脏肿大并布满灰黄色的坏死点

图8 心包积液，心外膜及心冠脂肪出血

图9 心外膜及心耳出血

图10 心内膜出血

图11 脾脏肿大、出血、坏死

图12 胰腺潮红，可见出血点及白色坏死点

图13 卵泡出血、变性

4 实验室诊断

4.1 病料镜检

无菌切取肝脏，进行直接触片、自然干燥和瑞氏染色，可看到两极浓染的小杆菌；用革兰氏染色可见红色小杆菌。

4.2 细菌分离培养及生化试验

无菌采取肝脏病料，将其涂布于普通琼脂平板、麦康凯平板和鲜血平板上，置于37 ℃的恒温箱内培养1 d后观察结果，发现普通琼脂平板和麦康凯平板上无菌生长，而在鲜血平板上可看到光滑、透明的露珠样小菌落。随后将分离菌接种于血清肉汤培养基中纯培养1 d，最终取0.2 mL此培养液接种于微量生化反应管2 d后观察结果，可见触酶、氧化酶反应阳性，吲哚试验阳性，脲酶试验阴性，说明该菌分解了葡萄糖、蔗糖、果糖和甘露醇，不分解乳糖、麦芽糖和山梨醇。将纯培养物进行直接涂片、自然干燥和瑞氏染色、镜检可见大量两极浓染的小杆菌（图14）；随后用革兰氏染色，可见大量红色小杆菌（图15）。

图14 瑞氏染色镜检结果

图15 革兰氏染色镜检结果

4.3 PCR检测

取肝脏和脾脏进行研磨，离心后取上清液进行PCR基因扩增，使用流感病毒的通用引物进行检测，结果为阴性。取纯培养物，对分离菌进行16S rRNA序列分析，最终确定为禽多杀性巴氏杆菌。

4.4 药敏试验

极敏药物有盐酸环丙沙星（21 mm）、盐酸沙拉沙星（20 mm）和盐酸多西环素（28 mm）；高敏药物有烟酸诺氟沙星（16 mm）和恩诺沙星（19 mm）；低敏药物有磺胺氯吡嗪钠（9 mm）和盐酸林可霉素（8 mm）；不敏感药物包括盐酸左氧氟沙星、硫酸黏菌素、硫酸庆大霉素、磺胺甲氧嘧啶钠、氟苯尼考、盐酸头孢噻呋、替米考星、硫酸新霉素、磺胺间甲氧嘧啶钠和阿莫西林。

5 治疗措施及效果

用三氯异氰尿酸钠（浓度为1∶800），对种鹅舍及其周围环境进行消毒。首先，每天1次，连续3 d；然后，每3 d 1次，连续3次；最后，进行常规消毒。对全场鹅群拌料喂服10%多西环素可溶性粉，每100 kg饲料加入本品400 g，连喂6 d；发现病鹅后及时隔离治疗，对病鹅肌肉注射5%恩诺沙星注射液，每次0.1 mL/kg，每天2次，连续使用 3～5 d。

采取上述措施2 d后见效，4 d后基本恢复正常，继续用药2 d后痊愈，没有出现新病例，取得了满意疗效。

6 讨论与结论

通过流行病学调查、临床症状检查和病理剖检，进行了初步诊断。例如：强制换羽后成年鹅开始零星发病，多于夜间突然死亡；剖检可见内脏浆膜严重出血，肝脏肿大并出现大量灰黄色或灰白色坏死灶等。通过实验室检测，最终判定引起该场三批种鹅陆续发病死亡的病原为禽多杀性巴氏杆菌，确诊为禽霍乱。

该场三批种鹅相继发生禽霍乱的主要原因是：首先，对正处于强制换羽恢复期的18月龄灰鹅饲喂了质量较差的育成料，再加上当时天气闷热、潮湿，使其在短期内受到了多重应激，导致鹅群机体免疫力下降，从而诱发了条件性致病菌——多杀性巴氏杆菌感染[3]；其次，灰鹅发病后，该养殖户没有及时给后两批白鹅进行预防性投药，造成该病蔓延。

根据药敏试验，及时采用极敏药物盐酸多西环素对全场鹅群进行治疗和预防，并选用高敏药物恩诺沙星注射液对病鹅个体进行肌肉注射，很快控制了病情，取得了较好疗效。选择多西环素和恩诺沙星对产蛋种鹅群进行药物治疗，未见有影响种鹅生产性能现象。

鹅禽霍乱可使用禽巴氏杆菌疫苗进行预防。禽霍乱弱毒疫苗可用于成年鹅的紧急免疫或常规免疫，肌肉注射1 mL/羽（大约含10亿活菌）；禽霍乱氢氧化铝甲醛疫苗可用于2月龄以上鹅群的常规免疫，肌肉注射2 mL/羽，每年至少免疫2次[4]；本病高发区最好采用标准疫苗和本地疫苗株制成的灭活苗联合免疫[5]。但需注意，目前禽霍乱商品化疫苗只对同型毒株有效，况且巴氏杆菌的抗原结构比较复杂，疫苗免疫效果并不理想[6]。因此，鹅禽霍乱的预防主要是加强鹅群的饲养管理，做好卫生消毒，提高机体免疫力，喂给优质的全价饲料，时刻注意天气变化，尽量减少应激，定期或针对性地使用有效预防药物。

[1] 程龙飞，许利娜，林建生，等. 福建及邻近省份禽源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定[J]. 中国动物传染病学报，2014，22（4）：40-44.

[2] 刁有祥. 鸭鹅病防治及安全用药[M]. 北京：化学工业出版社，2016：100-106.

[3] 许英民. 中西医结合治疗种鹅慢性巴氏杆菌病[J]. 中兽医医药杂志，2015（3）：63-65.

[4] 陈金英. 鹅霍乱病的防治措施[J]. 中国畜牧兽医文摘，2016，32（3）：217.

[5] 王 伟. 一例鹅巴氏杆菌病的诊治[J]. 上海畜牧兽医通讯，2012（5）：90-91.

[6] 秦绪伟，刁有祥. 鹅巴氏杆菌病的诊断与治疗[J]. 家禽科学，2017（3）：37-39.