共刺激分子PD—L1、PD—L2和B7—H4在宫颈癌中的表达及病理特征研究

黄庆文等

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doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2017.30.77

摘要 目的：探讨共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在宫颈癌中的表达及病理特征。方法：收治宫颈癌患者35例作为试验组，另选择宫颈上皮组织正常患者34例作为对照组。结果：PD-L1、B7-H4在正常宫颈中几乎不表达，在上皮细胞瘤变组织中PD-L2和B7-H4值与对照组相比，差异均具有统计学意义（P<0.05）；患者的肿瘤浸润度>10mm的组织中，PD-L1的表达情况明显高于浸润的深度，其高出的部分≤10mm（P<0.05）；发生淋巴转移患者组织中PD-L2的表达情况明显高于无淋巴转移者（P<0.05）；淋巴癌患者的宫颈癌组织中的B7-H4表达情况明显高于淋巴转移者（P<0.05）。结论：宫颈癌患者高表达与肿瘤的淋巴侵袭力以及转移有关，即PD-L1、PD-L2和BT-H4发生高表达现象。

关键词 共刺激分子；PD-L1；PD-L2；B7-H4；宫颈癌

宫颈癌是最常见的威胁女性健康的恶性肿瘤之一。大量的调查显示，近年来宫颈癌的发生率在逐年上升，并且年轻女性的患病率也在逐渐增加。因此，做好宫颈癌的防治工作，对我国的女性健康有着重要意义。据相关文献报告，在宫颈癌患者的局部微循环境中，往往会存在T细胞免疫水平较为低下的情况。在抑制肿瘤生长、扩散、杀伤肿瘤细胞和识别肿瘤细胞方面，T细胞发挥着重要作用。2014年1月-2017年1月收治宫颈癌患者35例，探究共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在宫颈癌中的表达及病理特征，现将探究结果进行如下报告。

资料与方法

2014年1月-2017年1月收治宫颈癌患者35例作为试验组，患者年龄35～65岁，平均（43.15±2.15）岁；其中鳞状细胞癌29例，腺癌6例。另选择34例宫颈上皮组织正常者作为对照组。两组上述一般资料间差异无统计学意义（P>0.05），能进行比较。

方法：仪器为DigiRetina 16；显微镜为光学显微镜；并选择由基因公司生产的兔抗人PD-L1、兔抗人PD-L2以及兔抗人B7-H4，选用福州迈新公司生产的二抗的试剂盒。全部患者样本均选用石蜡切片，并采用常规的方式进行脱蜡脱水，使用浓度3%过氧化氢进行孵育，时间10 min，目的是消除内源性过氧化氢物酶的活性，并使用PBS清洗3次，先使用枸橼酸钠缓冲液进行PD-L1和PD-L2抗原修复，使用Tris-EDTA对B7-H4的抗原进行修复。冷却后，使用PBS清洗3次，滴入PD-L1抗体、PD-L2抗体和B7-H4，4℃环境中静置1夜。使用PBS洗3次，并向其中加入酶标羊抗鼠，兔IgG聚合物。在室温环境中30 min，用PBS同样清洗3次，并使用DAB进行显示。再使用苏木精进行复染，最后使用中性树脂对其进行封片。

观察指标：观察PD-L1、PD-L2和B7-H4在胞膜胞质中的染色情况。

疗效评价标准：PD-L1、PD-L2和B7-H4在胞膜胞质中的染色情况，棕黄色为阳性，无染色为阴性。

统计学方法：以SPSS 18.0软件统计分析此次研究数据，计量资料以（x±s）表示，使用t检验；计数资料以率（%）表示，用X²检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

结果

PD-L1、PD-L2和B7-H4在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变以及宫颈癌组织中的表达结果：PD-L1、B7-H4在正常的宫颈中几乎不表达；在上皮细胞瘤变组织中，PD-L2和B7-H4值与对照组相比，差异均有统计学意义（P<0.05）；在宫颈癌组织中，PD-L1、PD-L2和BT-H4与对照组相比均较高。

宫颈癌临床病例特点与PD-L1、PD-L2和BT-H4表达的相关性：患者的肿瘤浸润度>10 mm的组织中，PD-L1表达为明显高浸润的深度，其高出的部分≤10mm，差异均具有统计学意义（P<0.05）；发生淋巴转移患者组织中PD-L2的表达情况要明显高于无淋巴转移的，差异有统计学意义（P<0.05）；发生淋巴癌患者的患者宫颈组癌组织中的B7-H4表达情况要明显高于淋巴转移者，差异均有统计学意义（P<0.05）。

讨论

共刺激分子在T细胞功能中能够发挥重要作用，主要包括促进增殖化分的正调控因子以及激活T细胞等。在B7家族中，负性调控因子是一个重要的组成部分，BT-H4主要是从卵巢癌中克隆得到的，并且在除宫颈癌的乳腺癌以及肺癌等多种癌症组织中都有表达，其在表达方面都与肿瘤的病理特征存在一定联系。PD-L1和PD-L2也是B7家族成员的重要组成部分之一，也能够引起T细胞凋亡和失去功能，使腫瘤细胞能够继续增长。

本次探究发现，PD-L1、PD-L2和B7-H4在正常的宫颈细胞中几乎不表达，PD-L1、PD-L2和BT-H4在上皮细胞瘤变中表达的情况明显好于正常宫颈组织，并且PD-L1、PD-L2和BT-H4在宫颈癌组织表达的情况明显好于上皮细胞瘤变。说明负性调节的共刺激分子在恶性肿瘤组织中的表达比较高。在肿瘤发生的过程中，其能够使人体正常的免疫细胞发生逃逸。

综上所述，宫颈癌患者高表达与肿瘤的淋巴侵袭力以及转移有关，即PD-L1、PD-L2和B7-H4发生高表达现象。endprint