IL—35与临床疾病关系的研究进展

赵君雅 孙鸿宇 李薇 李威 李欣 官杰

[摘要]白细胞介素-35（IL-35）是IL-12 p35和EBi3亚基组成的异源二聚体，由调节性T细胞（Treg）特异性产生，被誉为最强抗炎因子。其能扩增Treg细胞的数量，抑制效应性T细胞的产生，并通过iTR35细胞正向促进抑炎效应。另一方面，当IL-35过度表达时，效应T细胞和巨噬细胞所受抑制显著增强，甚至可导致机体出现免疫抑制状态。本文就IL-35与相关疾病的国内外最新进展进行综述。

[关键词]白细胞介素-35；免疫抑制；炎症；肿瘤

[中图分类号] R392.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2018）12（b）-0016-03

[Abstract] Interleukin 35 （IL-35） is produced exclusively by regulatory T cells， which is composed of two subunits， IL-12 p35 and EBi3. Known as the strongest anti-inflammatory factor， it leads to the amplification of regulatory T cells， the inhibition of production of effector T cells， and promotes anti-inflammatory effects through iTR35 cells. Besides， its overexpression can result in evidently inhibitory effects on T cells and macrophages， which even induces immunosuppression. This paper gives a general review about its latest advances in related diseases at home and abroad.

[Key words] Interleukin 35； Immunosuppression； Inflammation； Tumour

白细胞介素-35（interleukin 35，IL-35）是调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）产生的细胞因子，于2007年由Collison等[1]首次报道。IL-35是IL-12 p35和EBi3亚基组成的异源二聚体[2]，被誉为抑制活性最强的新型抗炎细胞因子。其通过扩增Treg细胞的数量[3]，抑制效应T细胞（effector T cell，Teff）的增殖[4]，从而抑制炎症反应并防止自身免疫反应的过度发生。此外，IL-35还能诱导新型Treg细胞（inducible IL-35-producing Tregs，iTr35）的产生，后者也能分泌IL-35，故通过正反馈的方式能够促进免疫抑制的进程[5-6]。另一方面，在少数疾病中，过度表达的IL-35能诱导机体免疫微环境失调，此时Treg细胞在局部大量聚集，导致其对效应T细胞和巨噬细胞产生过高的抑制作用，甚至可能抑制自身免疫[7]。本文旨在更新关于其产生、调节及应用的最新进展，进一步探讨其在疾病中的作用，现就近期研究报道进行综述。

1 IL-35的生物学特征

IL-35是由Treg细胞特异性产生的IL-12家族新成员，以IL-12的α链IL-12A亚基和IL-27的β链EBI3亚基参与组成[8]。该家族成员（如IL-12、IL-23）参与的多为促炎反应，而IL-35多表现为对炎症的抑制作用。Collison等[1]的研究显示，IL-35任一条链的缺乏均会导致Treg细胞对Teff细胞抑制能力的减弱。尽管IL-35凭借对Treg功能的调控在免疫治疗方面取得了良好的效果，但介导其抑制活性的因素很大程度上仍是未知，这也限定了IL-35的使用及发展。

2 IL-35与临床疾病的关系

2.1 IL-35与胰腺癌

90%的胰腺癌为胰腺导管腺癌（pancreatic ductal carcinoma，PDAC）。大量实验显示PDAC与肿瘤内部、周边的炎症反应以及失调的免疫监视明显相关[9]。金鹏[10]通过PCR分离外周单核淋巴细胞发现患者外周血浆中EBi3的mRNA水平显著高于对照组，提示患者外周血浆中IL-35含量高于常人，并与国际抗癌联盟（UICC）中的肿瘤分期及转移范围成正相关。Nicholl等[11]认为IL-35在PDAC中表达增强，并有促肿瘤转移的效果。Huang等[12]通过对病变组织的连续切片，发现构成IL-35的亞基EBi3及p35在PDAC细胞中高度表达。研究者根据临床及实验数据，证实了IL-35是通过趋化单核-巨噬细胞浸润，进而诱导其分泌促血管新生因子，来促进胰腺癌的血管新生[13]。因此认为，IL-35能够发出信号诱导血管生成，并促进PDAC细胞的生长。

2.2 IL-35与炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）

IBD是一种反复发作的慢性炎症，包括溃疡性结肠炎和克罗恩病[14]。CD4+调节T细胞（regulation T cell，Treg cell）是调节性T细胞亚群之一，主要来源于胸腺，具有抑制自身反应性T细胞和维持自身免疫耐受的功能[15]。IL-35的亚基EBi3早先被视为同IBD发病相关的免疫调节剂[16]。但随着近年来对IL-35的深入探索，这种理论受到质疑。Wirtz等[17]针对EBi3基因缺陷小鼠在慢性炎性肠病中的表现进行分析，发现缺乏EBi3基因的小鼠有明显的结肠炎病理表现且存活时间更短。其中，活化的CD4+ T细胞亚群可阻碍辅助性T细胞Th1和Th17从而加速炎症反应。不仅如此，经IL-12 p35链（rIL-35）用药治疗后，Th1、Th17和与之相关的转录因子T-bet和ROR-γT也受到抑制。此结果与先前资料[18]证明的“IL-35可抑制胶原诱导的关节炎”相吻合，这在一定程度上验证了IL-35潜在的免疫抑制性。

2.3 IL-35與1型糖尿病

1型糖尿病属于自身免疫疾病，是由于多种异常自身免疫抗体损伤胰岛B细胞造成的胰岛素分泌不足。Bettini等[6]的研究显示，IL-35是通过借助大鼠胰岛素启动子RIP Ⅱ作用于胰岛β细胞。研究人员通过建立RIP-IL-35转基因小鼠模型（即转IL-35基因小鼠）对胰岛中IL-35细胞数量进行分析，结果显示胰岛中的IL-35含量减少。研究人员发现，由于IL-35可在G1期抑制T细胞的增殖进而造成T细胞减少，此效应对疾病的进展能起到一定的阻滞作用。此外，Manzoor等[19]所建模型中也得到相似的结果，该研究发现，注射有胰岛素启动子AAV8mIP-IL-35疫苗鼠有良好的抑制β细胞自免反应的效果，可一定程度延缓病情的演进。

2.4 IL-35与系统性硬化症（systemicscleroderma，SSc）

SSc是由于反复慢性感染导致结缔组织代谢及血管异常的自身免疫疾病。目前，多数学者认为SSc患者产生的细胞因子能促进胶原蛋白的合成[20]。Tomcik等[21]的研究显示，转化生长因子-β（TGF-β）的活动可以导致SSc中一型胶原过度表达。在人体正常皮肤中IL-35组成成分EBi3蛋白处于低水平状态，而在病灶区，由于受TGF-β的作用使EBi3上调[22]，导致IL-35在真皮成纤维细胞中过度表达，进而诱导成纤维细胞活化并释放胶原。

2.5 IL-35与类风湿性关节炎（rheumatic arthritis，RA）

Nakano等[23]对RA患者的研究显示，IL-35在体外可以提高免疫抑制效应。在活动性RA患者血浆中，Treg细胞数量显著减少，IL-35水平降低[24]，且该含量与在DAS28-ESR评分系统（此系统用于评价RA的病情及疗效）中的指标情况密切相关。IL-35通过与CD2、CD3和CD28的结合，从而抑制炎性因子（如IL-17和IFN-γ等）的含量以及效应T细胞的生长[25]。现有数据显示，RA患者中Treg数量的减少可以使IL-35含量降低[26]，而低含量的IL-35又反过来降低了促进Treg细胞增殖与分化的作用[27]，该结果造成反应性T细胞的过度活化[28]，从而释放大量炎性介质，最终导致RA的发生。

3总结与展望

IL-35是由调节性T细胞分泌的一种新型抗炎因子，在炎症性疾病和肿瘤中发挥重要作用[29]。炎症是疾病以及其相关并发症发展的关键步骤，精准分析参与炎症反应的环节对疾病的诊治大有裨益。IL-35具有诱发Treg及其效应物的抗炎特性，因此成为自身免疫性疾病及感染性疾病中抗炎难题的靶向目标。鉴于不同疾病，IL-35发挥的作用众说纷纭。就目前而言，其表现的并非为绝对的免疫抑制作用，例如IL-35也可在一些疾病中推动病情进展[30]，如SSc、PDAC等。IL-35的生物学功能及其在疾病中的作用机制仍需进一步研究，随着科技的进展，IL-35有望成为免疫系统疾病新的治疗靶点，并为今后治疗该类疾病提供新的选择。

[参考文献]

[1]Collison LW，Workman CJ，Kuo TT，et al.The inhibitory cytokine IL-35 contributes to regulatory T-cell function[J].Nature，2007，450（7169）：566-569.

[2]Choi J，Leung PS，Bowlus C，et al.IL-35 and autoimmunity：a comprehensive perspective[J].Clin Rev Allergy Immunol，2015，49（3）：327-332.

[3]李宝柱，赵娜，何向辉，等.白细胞介素35抑制小鼠心脏移植排斥反应的研究[J].中华器官移植杂志，2017，38（1）：34-38.

[4]Bettini M，Castellaw AH，Lennon GP，et al.Prevention of autoimmune diabetes by ectopic pancreatic β-cell expression of interleukin-35[J].Diabetas，2012，61（6）：1519-1526.

[5]Bhme J，Robnagel C，Jacobs T，et al.Epstein-Barr virus-induced gene 3 suppresses T helper type 1，type 17 and type 2 immune responses after Trypanosoma cruzi infectionand inhibits parasite replication by interfering with alternative macrophage activation[J].Immunology，2016，147（3）：338-348.

[6]Tao LL，Zhu J，Chen YF，et al.IL-35 improves Tregs mediated immune suppression in atherosclerotic mice[J].Exp Ther Med，2016，12（4）：2469-2476.

[7]Okada K，Fujimura T，Kikuchi T，et al.Effect of interleukin （IL）-35 on IL-17 expression and production by human CD4+ T cells[J].Peer J，2017，5：e2999.

[8]Vignali DA，Kuchroo VK.IL-12 family cytokines：immunological playmakers[J].Nat Immunol，2012，13（8）：722-728.

[9]Farren MR，Mace T，Geyer S，et al.Systemic immune activity predicts overall survival in treatment nave patients with metastatic pancreatic cancer[J].Clin Cancer Res，2016，22（10）：2565-2574.

[10]金鹏.IL-35在胰腺导管腺癌患者外周血中的表达[D].天津：天津医科大学，2014.

[11]Nicholl MB，Ledgewood CL，Chen X，et al.IL-35 promotes pancreas cancer growth through enhancement of proliferation and inhibition of apoptosis：evidence for a role as an autocrine growth factor[J].Cytokine，2014，70（2）：126-133.

[12]Huang C，Li Z，Li N，et al.Interleukin 35 expression correlates with microvessel density in pancreatic ductal adenocarcinoma，recruits monocytes，and promotes growth and angiogenesis of xenograft tumors in mice[J].Gastroenterology，2018，154（3）：675-688.

[13]Templin J，Atanackovic D，Hasche D，et al.Oscillating expression of interleukin-16 in multiple myeloma is associated with proliferation，clonogenic growth，and PI3K/NFKB/MAPK activation[J].Oncotarget，2017，8（30）：49253-49263.

[14]林俊超，吴开春.炎症性肠病的中西医结合治疗[J].临床内科杂志，2018，35（4）：230-232.

[15]Khattri R，Cox T，Yasayko SA，et al.An essential role for Scurfin in CD4+CD25+ T regulatory cells[J].Nat Immunol，2003，4（4）：337-342.

[16]李艳梅.IL-35在炎症性肠病患者血清和肠粘膜组织中的表达[D].济南：山东大学，2015.

[17]Wirtz S，Billmeier U，Mchedlidze T，et al.Interleukin-35 mediates mucosal immune responses that protect against T-Cell-dependent colitis[J].Gastroenterology，2011，141（5）：1875.

[18]Kochetkova I，Golden S，Holderness K，et al.IL-35 stimulation of CD39+ regulatory T cells confers protection against collagen Ⅱ-induced arthritis via the production of IL-10[J].J Immunol，2010，184（12）：7144-7153.

[19]Manzoor F，Johnson MC，Li C，et al.β-cell-specific IL-35 therapy suppresses ongoing autoimmune diabetes in NOD mice[J].Eur J Immunol，2017，47（1）：144-154.

[20]李晶冰，丁敏，牟萍，等.积雪草甙对系统性硬皮病成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成及分泌TGF-β1的影响[J].江苏医药，2014，40（20）：2387-2389.

[21]Tomcik M，Zerr P，Palumbozerr K，et al.Interleukin-35 is upregulated in systemic sclerosis and its serum levels are associated with early disease[J].Rheumatology，2016，54（12）：2273.

[22]李二威.CD4+CD25+调节性T细胞分泌的IL-10、IL-35在过敏性哮喘中作用机制的初步研究[D].郑州：郑州大学，2015

[23]Nakano S，Morimoto S，Suzuki S，et al.Immunoregulatory role of IL-35 in T cells of patients with rheumatoid arthritis[J].Rheumatology，2015，54（8）：1498.

[24]熊怡淞，宋燕，俞娟，等.類风湿关节炎患者外周血Treg细胞及其分泌IL-35水平检测与临床意义[J].重庆医学，2018，47（5）：622-625.

[25]王佳.抑制性细胞因子IL-35对急性髓细胞白血病免疫功能的影响及其机制研究[D].合肥：安徽医科大学，2016.

[26]顾危页，庞智，郑家驹，等.CD4+CD25 high Tr和CTLA-4与炎症性肠病的关系研究[J].实用临床医药杂志，2010， 14（15）：28-30.

[27]姜申易，鲁静.IL-35在类风湿关节炎中的研究进展[J].中国免疫杂志，2015，31（12）：1714-1717.

[28]田园，胡建东.程序性细胞死亡分子-1在类风湿关节炎发病机制中的作用研究进展[J].中华风湿病学杂志，2018，22（4）：280-283.

[29]姚国泰，陈励.IL-35与人类自身免疫性疾病的关系[J].细胞与分子免疫学杂志，2016，32（7）：993-995.

[30]刘丽.多发性硬化患者血清IL-33及IL-35水平的变化及其临床意义[D].郑州：郑州大学，2013.