高进涛,高占东,刘波
(山东省济宁市嘉祥县畜牧兽医局,济宁 272400)
犊牛急性肺炎具有发病急、发病过程短以及死亡率高的特点,临床上主要以犊牛出现体温升高,呼吸急促、困难,干咳为主要症状。牛群出现该种疫病后,很多养殖户在没有明确病原的基础上,随意使用抗生素治疗,导致治疗效果差,治疗周期长,死亡率升高。由于导致犊牛出现急性肺炎的病原多种多样,在具体诊治中,先要明确病原类型,然后选择高敏抗生素对症治疗,以提高治疗效果,降低死亡率。
2017年10月13日,内蒙古包头市昆区一位养殖户向乡级兽医站报告,养殖的牛群中出现了2头5月龄以咳嗽为主要临床症状的发病牛,出现发病症状后,病情在牛群中迅速传播,犊牛群发病数量进一步增加,死亡率升高。接到求助后,立即赶往该养殖场,到达养殖场后,该养殖场的13头犊牛普遍发病,已经死亡4头犊牛。患病牛病情较为严重,普遍表现为体温升高到41 ℃以上,出现咳嗽症状,呼吸困难。养殖户反映,出现临床症状后,立即采取措施,将患病牛隔离单独饲养,并对整个养殖场进行2次消毒,清理患病犊牛的牛舍,但病情依然没有得到控制,向其他犊牛群体传播,成年牛未表现出典型发病现象。养殖户通过采集病死牛的病料,带回实验室进行诊断,率先明确了病原菌类型,结合药敏试验,选择高敏抗生素进行对症治疗,有效控制了病情,避免损失进一步加大。
牛群表现为突然发病,发病后患病牛表现为精神状态逐渐恶化,采食量逐渐下降,直到停止采食,体温迅速升高到41 ℃以上,呈现稽留热,脉搏跳动急促,高达100次/min以上,呼吸困难,呈现浅表性,呼吸频率增加。发病初期,所有患病牛会出现间歇性的干咳,随着病情进一步发展,患病牛逐渐变为湿咳,每次咳嗽后都会做出痛苦的吞咽动作,特别在犊牛站立、卧地或身体运动后,咳嗽症状更为明显。用手叩诊患病牛胸部呈现浊音,患病牛痛苦,拒绝触摸。发病严重的患病牛呼吸极度困难,伸颈张嘴呼吸,舌头外伸,从口角中分泌出大量泡沫状内容物,随后倒地不起,四肢伸直,最后窒息而死。
将4头病死犊牛在无菌环境下解剖,病死犊牛表现为皮下组织严重充血,瘤胃、网胃、瓣胃、真胃黏膜脱落,容易分离,粘膜下组织充血出血[1]。所有病死牛浆膜水肿,肠系膜充血严重,肠系膜淋巴结充血肿大。打开胸腔和腹腔,发现内部存在大量浆液性纤维素性渗出液,肺脏严重肿胀,肺心叶、尖叶、隔叶严重充血肿大,并且存在出血现象,切面呈现暗褐色或紫褐色,质地变脆。心脏外膜严重出血,肝脏肿大,充血,质地变脆,肝脏外观呈现紫红色或深红色。肾脏表面出现带状出血,脾脏表面也存在大量出血点。
无菌环境下,采集上述病死牛典型病变脏器组织,将其粉碎后制成触片,经火焰固定,选择使用革兰氏染色剂进行充分染色,干燥后放在显微镜下观察,可以看到革兰氏阴性染色,呈现卵圆形的短小杆菌,有荚膜,无芽孢,两级浓染。
将上述采集到的病料接种到普通琼脂平板和血液琼脂平板上,恒温培养箱内培养48 h,温度控制在37 ℃,血液琼脂平板上生长出灰白色、呈半透明状、边缘整齐、中间凸起、圆形湿润的致病菌菌落,菌落周围存在一圈淡绿色的晕[2];致病菌在普通琼脂平板上生长不良。将分离得到的致病菌转移到麦康凯琼脂平板上,相同的环境下培养24 h,致病菌在麦康凯琼脂培养基上不生长。
生化试验发现,该种致病菌能够分解葡萄糖、麦芽糖、甘露醇,产酸,不分解乳糖,MR试验、VP试验呈阴性,能产生硫化氢,接触酶试验呈阴性,不液化明胶。结合生化试验结果,符合多杀性巴氏杆菌的生化特点[3]。将上述采集到的病料粉碎后,充分研磨,加入5倍灭菌生理盐水,制成悬浊液后,取上层清液0.5 mL,腹腔注射到小白鼠体内,同时设置对照组,小白鼠腹腔注射0.5 mL生理盐水,实验组小白鼠注射24 h后死亡,解剖病死小白鼠,采集典型病变脏器,做涂片镜检,同样为革兰氏阴性染色的两级浓染的球状杆菌。最终确诊为多杀性巴氏杆菌感染引起的犊牛急性肺炎。
将上述分离的致病菌选择纸片法进行常规药敏试验,药敏试验发现该种致病菌对氟苯尼考、先锋霉素、哌拉西林、头孢曲松、呋喃妥因、环丙沙星高度敏感;对复方新诺明、头孢他啶、妥布霉素、利福平中敏;对红霉素、万古霉素、四环素、青霉素、链霉素耐药。
多杀性巴氏杆菌感染引起的犊牛急性肺炎,要选择高敏抗生素对症治疗。本次治疗选择使用20%的氟苯尼考注射液,使用剂量为0.1 mL/kg体重,肌肉注射,1次/d,连续使用3 d为1个疗程。同时选择使用5%的葡萄糖生理盐水500 mL,25%的葡萄糖酸钙50 mL,维生素C注射液20 mL,氨茶碱4 mL,30%的安乃近注射液10 mL,上述药物混合后,1次静脉注射,强化补液,降低体温,缓解呼吸道症状[4]。采用上述方法治疗9 d,2头病情较为严重的患病牛治疗无效死亡,其余患病牛恢复健康。日常要指导养殖户加强饲养管理,重视犊牛牛舍温度管理,强化通风,控制饲养密度。定期清理牛舍,对牛舍进行彻底消毒,坚持每周消毒1~2次。按照养殖场的免疫计划,对犊牛群进行严格的疫苗免疫接种[5]。通过将该养殖场分离得到的致病菌制成灭活疫苗后免疫接种,提高牛群对该种疾病的抵抗能力[6]。