水牛繁殖生物技术的应用

黄健，陈明棠，覃广胜，谭正准，李辉，赵朝步

（广西水牛研究所，南宁 530001）

0 引言

现阶段，国内相关部门提高了对水牛业发展的重视，给予了水牛业较高的经济扶持，并且将扩大水牛奶业规模来作为乡镇经济发展的新项目，从而为水牛业的持续稳定发展提供了保障。然而因水牛本身生育能力的弱化，如晩发情、晚育、两次生育时间过长、受孕率不高等特点，致使国内水牛杂交优化过程体现出优良受精卵缺失的情况，要改善这样的情况，就应该合理运用先进的生物技术，以强化水牛的生育能力，以此保证水牛业的良好发展。

1 人工授精技术

国内对育龄水牛实行人工授精技术，早在20世纪40年代就已开始。相关资料显示，国内相关部门所实行的水牛杂交改良优化模式，不仅提高了各地区水牛的产奶量，而且水牛的肉质大大提高[1]。

2 超数排卵和同期发情

在通常状态下，水牛在发情期都只会产生一个卵子，养殖者借助对外源激素的运用，可以提高发情水牛的卵子产出个数，以促进仔牛产出量的提高，同时借助胚胎移植来促进良好基因类型的扩散。相对于奶牛来说，水牛发情时的卵泡数量往往会低30%，并且卵泡的闭锁率也比奶牛高，更重要的是，水牛对促排卵激素的反应也不明显，所以仔牛产量的提升率也往往会低于奶牛。现阶段，水牛的犊牛出生率尽管有明显的提升，有效受精卵有时也会由原来的1个提升到3个，然而更多的情况下还是只有1个。常用于水牛超排的促性腺激素有PMSG（孕马血清促性腺激素）和FSH （促卵胞素），FSH的超排效果优于PMSG，每次超排获得有效胚胎的数量是2.09∶0.56。同期发情技术便于掌握适时输精，缩短发情配种时间，有利于提高人工授精配种受胎率和胚胎移植受胎率。我国相关部门对水牛同期发情技术的运用进行了全面的分析探索，并且将这种技术运用到了强化水牛生育能力的环节中，如GnRH法、孕酮法、2次PGF2α法、孕酮和ECG方法等。经诸多分析实践得出，在一般情况下，高质量卵子与黄体并存时，就会明显强化受孕率，尤其是对水牛的同期发情会起到很大的作用，在水牛发情期借助对孕酮的运用可强化生育能力。然而，从整体情况来分析，水牛同期发情技术的运用程度还需要强化。因为水牛对促排卵反应力较差，再加上其发情的征兆也不明显，所以排卵数量和同期发情的效果也不明显。所以，就应该建立较长时间的分析探索方案，以明确水牛排卵和发情的特点，以采取相应的发情识别技巧[2]。

3 水牛胚胎体外生产

胚胎体外生产包括卵母细胞体外成熟、体外受精和体外胚胎培养。通过IVP可大量生产良种胚胎，是解决水牛品种改良过程中胚胎来源困难的一个有效途径。胚胎体外生产的卵母细胞来源主要分为屠宰场卵巢和活体采卵。屠宰场卵巢容易获得，但是由于系谱不明确，而且绝大部分为沼泽型水牛卵巢，因此对水牛品种改良的意义不大。OPU通过B型超声波引导，经子宫壁采集卵母细胞，可重复从遗传价值高的水牛采集卵母细胞，与体外受精技术相结合可生产大量系谱明确的胚胎，从而充分利用优良母畜的遗传潜力。OPU与体外胚胎生产技术相结合，生产的可移植胚胎为超数排卵的2～3倍，每头供体每月可生产更多的可移植胚胎（2.0±0.6枚），并可克服母畜生殖道疾病对胚胎质量的影响。体外胚胎生产虽然也取得了一定的成绩，但是水牛胚胎体外生产所需条件较高，需要专业的仪器设备进行操作，实质上仍处于研究阶段，还未能真正应用于生产中。今后应降低胚胎体外生产的成本，提高体外生产效率。目前正由专业的单位进行良种胚胎体外生产，而后将胚胎冷冻保存，提供给基层的水牛养殖户进行移植生产[3]。

4 水牛胚胎移植

实行胚胎移植属于提供排卵数量、人工授精以及体细胞移植的后续流程，对高素质水牛的繁衍会起到不可替代的保障作用。那么在具体行动中，所要考虑的首要项目就是缓解供卵个体与受卵个体的同期发情的矛盾，广泛运用的措施与供卵水牛发情期处理过程几乎是一致的。胚胎移植的操作关键是将胚胎准确地输入到卵巢有黄体的子宫角中。因水牛本身黄体表现征兆较为淡化，为后续促孕环节带来了难度，更为受精卵的移植过程带来较大难度。在通常情况下，水牛宫颈在发情时，就会封闭，为移植受精卵管线的插入带来难度，并很有可能导致子宫明显的损伤，从而弱化胚胎移植质量和水平。如果要想改善这样的局面，强化水牛的受孕能力，就应该选取具备2次以上生产经验的水牛来作为受体接受胚胎移植。需要强调的是，如果所选的水牛，其本身素质不符合相关标准，则很有可能会导致胚胎移植失败的不良后果。现阶段，国内水牛胚胎移植的成功率通常仅达到10%左右，即使各方面基础条件完备时，其成功率也只有40%～60%，更重要的是受体水牛在怀孕初期往往会出现较高的流产率，具体会达到50%左右。所以，就必须要制定并落实标准的母牛饲喂、养护方案，不仅如此，还需要实行受精卵相互影响和受精卵发育的分析探索，以强化水牛的受孕能力。

5 水牛胚胎冷冻

现代的受精卵冷冻技术完全能够脱离时间和空间的制约，缓解母牛分娩与移植在时间以及空间受限的情况，达到对水牛受精卵进行异地移植的目标，并且还会对高质量种源进行长久的贮存，有利于受精卵的传递，为水牛生物技术的广泛宣传和运用奠定了坚实基础。然而现阶段，水牛受精卵冷冻技术还没能得到较大范围的运用，在未来还必须要进行更大规模的水牛受精卵冷冻工作，并且以状态维护剂、冷冻措施以及受精卵成长时期等环节作为着重点，明显强化水牛受精卵的成活能力，强化对受精卵冷冻技术的运用程度[4]。

6 结束语

水牛业属于人们实现经济目标的新项目，有着非常广阔的发展前景。但是水牛的受孕期往往会有明显的季节性，并且其发情表现也较为淡化，为发情识别提高了难度，并且在一定时期内，发情次数少、受孕率小，这些客观因素限制着水牛生育能力的强化。即使这样，国内相关部门还是对水牛的内分泌进行了分析、探索，并且对水牛的各种繁殖技术进行了充分的探索，从而为水牛生育能力的强化提供了保障。