兜兰新品种‘红霞兜兰’的选育

李冬梅 吕复兵 陈和明 赵超艺 刘小飞 朱根发

摘 要 ‘红霞兜兰是以‘带叶兜兰为母本、‘同色兜兰为父本，通过人工授粉杂交育成的F1新品种，属斑叶类，抗性强，花期3～5月，开花期长达50～60 d；花梗长5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直径10～12 cm，紫红色具紫褐色斑点；中萼片宽卵形，长3.5～4.3 cm，宽3.2～4.0 cm，紫红色，边缘具淡黄色晕和紫褐色斑点；合萼片宽卵形，稍小于中萼片，长3.0～3.5 cm，宽2.5～3.0 cm，淡黄白色，具深浅不一的紫红色斑点或斑块；花瓣椭圆形，边缘波状具白色缘毛，长5.0～5.5 cm，宽3.5～4.0 cm；唇瓣兜状，长3.5～4.5 cm，宽1.9～2.1 cm，黄褐色，具紫红色斑点；退化雄蕊黄色，中心具紫褐色晕。花梗长度中等，避免了母本花梗过长易倒伏和父本花梗过短贴着盆生长的缺点，具有较好的观赏价值，对兜兰属植物资源的种质创新和保护具有重要意义。

关键词 红霞兜兰 ；品种 ；选育

中图分类号 S682.31 文献标识码 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2018.10.008

Abstract Paphiopedilum variety 'Hongxia' was a new F1 of a hand pollinated Paphiopedilum crossed with P. hirsutissimum as female parent and P. concolor as male parent. The new variety has spotted leaves with high resistance. This variety flowers for 50～60 days from March to May. The pedicel is 5.5～7.8 cm long， and purple-brown with white pubescence. The variety has one or two flowers， 10～12 cm in diameter， with purple-red and purple-brown spots in the flower（s）. Dorsal sepal， broadly ovate， 3.5～4.3 cm long， 3.2～4.0 cm wide， purple-red with yellowish halo and purple-brown spots at the margin. Synsepal broadly ovate， slightly smaller than dorsal sepal， 3.0～3.5 cm long， 2.5～3.0 cm wide， yellowish white with dark purple spots or patches. Petals elliptic， margin wavy with white margin hairs， 5.0～5.5 cm long， 3.5～4.0 cm wide. Lip， deeply pouched， 3.5～4.5 cm long， 1.9～2.1 cm wide， yellowish-brown with purple-red spots. The staminode is yellow with purple-brown halo at the center. The pedicel is medium in length， which avoids the disadvantages of slope of long female pedicel and the attachment of short male pedicel to the basin. The new variety has good ornamental value， and has great influence on the innovation and protection of germplasm resources of the genus Paphiopedilum.

Keywords Paphiopedilum variety Hongxia ； variety ； breeding

兜蘭，是兰科（Orchidaceae）兜兰属（Paphiopedilum）植物的统称。其花期持久，花色艳丽，花型奇特，具有很高的观赏和经济价值[1]。兜兰主要分布于亚洲热带地区至太平洋一些岛屿，为陆生兰，少数为附生兰。中国是世界上兜兰属植物最丰富的国家之一[1]。由于人们对兜兰野生资源的过度采挖，兜兰已成为世界上最濒危的植物物种之一，所有野生兜兰种类均被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录Ⅰ而被禁止贸易。兜兰杂交育种对满足市场需求和对野生兜兰植物资源的保护具有重要意义[1-8]。

英国皇家园艺学会（Royal Horticultural Society，简称RHS）是世界上权威的兰花新品种登录机构，该机构只登录首次育成的兰花属间和种间杂交种。由于以‘带叶兜兰为母本和‘同色兜兰为父本的杂交种之一Paph. Kamioka已于2007在RHS登记，本研究以‘带叶兜兰为母本和‘同色兜兰为父本的杂交种将不能再在RHS网站登记。因此，本文仅对兜兰新品种‘红霞兜兰的选育过程及栽培技术特点阐述。

1 材料与方法

1.1 材料

母本‘带叶兜兰（图1），属绿叶类，叶带形或线形，花单朵，较大，直径9～12 cm，紫褐色为主，花期4～5月，单株花期30～50 d，环境适应性较强，抗逆性较强。

父本‘同色兜兰（图2），属斑叶类，叶矩形至狭椭圆形，叶背面具极密集的紫点或完全紫色，花1～2朵，直径5～7 cm，淡黄色或近黄色，具紫色细斑点，周年开花，单株花期35～45 d，环境适应性强，抗逆性强。

1.2 方法

1.2.1 人工授粉

2014年4月中下旬，用灭菌牙签采集父本的花粉授于母本的柱头上，母本‘带叶兜兰在花朵盛开7 d内进行人工授粉，授粉前先用剪刀剪去母本和父本的唇瓣，将‘同色兜兰的花粉授于‘带叶兜兰的柱头上。

1.2.2 杂交蒴果的保存

采集的蒴果装于尼龙网袋中，保存于4℃冰箱5 d。

1.2.3 杂交蒴果的消毒

将4℃处理过的蒴果，在超净工作台上用棉球蘸取70%酒精擦拭蒴果表面晾干后，用0.1%升汞溶液消毒25 min，灭菌水冲洗4次。

1.2.4 无菌播种与原球茎诱导

用刀片切开消毒的蒴果，将褐色粉末种子接种到种子萌发培养基上培养，培养温度为25～30℃，光照强度为2 000～2 300 lx，光照时间控制为14 h/d；所述的种子萌发培养基成分为1/6 MS、6-苄氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉胶粉9.5 g/L，pH 5.6。培养基灭菌条件为125℃，40 min。发芽率=（发芽的种子数/播种的种子数）×100%。

1.2.5 壮苗及生根培养

将原球茎及芽混合体接种在壮苗及生根培养基上培养，培养温度为25～30℃，光照强度为2 000～2 300 lx，光照时间控制为14 h/d；所述的壮苗及生根培养基成分为1/6 MS、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.5 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉胶粉8.5 g/L，pH 5.6。培养基灭菌条件为125℃，40 min。

1.2.6 炼苗移栽

当小苗植株长至4～7 cm高时，2015年9月，将培养瓶转移至温室，在温室自然光照下炼苗10 d，取出瓶苗，洗净根部培养基，百菌清溶液消毒后，移栽到体积比兰石∶陶粒为3∶2的混合基质中。移栽成活率达85%；百菌清溶液消毒是用0.3%的百菌清溶液浸泡30 min。

1.2.7 大棚种植与病虫害防治

移栽5 d开始施水溶性的平衡肥，每10 d施肥1次，喷施药剂预防病虫害；每月用清水冲洗栽培基质1次。移栽后前6个月为小苗管理期，待小苗长出新根，更换栽培杯，施肥方式同上。植株进入大苗期后，进行水、肥、光、温度和病虫害管理调控，保持通风透气遮阴，湿度在70～85%，温度在20～32℃条件；如果温度高于32℃，用风机和水帘降温。花芽出现后，要进行花期的水、肥、光、温和病虫害的管理。

2 结果与分析

2.1 选育过程

授粉后120 d，将基本成熟而未开裂的蒴果作为外植体（图3）；蒴果消毒后播种原球茎诱导培养基，培养90 d，形成原球茎及芽混合体（图4），杂交种子萌发率达90%以上（一共播种10瓶培养基，每瓶播种种子数100粒，发芽数在90～95，总种子发芽率达90%以上）；再培养210 d，长成带2～4条根，2～4片叶的完整植株（图5）。大棚种植2.5年后，进行开花类型的兜兰新品种选择。从中选育出类型之一，在2018年3～5月初次开花，如图6所示，于2018年6月将选育出的新类型命名为‘红霞兜兰。

2.2 品种特征特性

‘红霞兜兰单株花期50～60 d，花期在3～5月，花为紫红色，花瓣有紫褐色斑点。‘红霞兜兰植株株形、花形、花色和花梗长等性状介于两个亲本之间（图6），其与父母本的主要区别特征见表1。‘红霞兜兰植株丛生，单株有叶5～9片；开花株平均株高9.5 cm，株幅27.5 cm，倒二叶叶长11～12 cm，叶宽2.5～2.8 cm。叶基部具紫红色斑点，叶面具深浅绿色相间的网格斑，叶背面绿色。花梗长5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直径10～12 cm，紫红色，具紫褐色斑点；中萼片宽卵形，长3.5～4.3 cm，宽3.2～4.0 cm，紫红色，边缘具淡黄色晕和紫褐色斑点；合萼片宽卵形，稍小于中萼片，长3.0～3.5 cm，宽2.5～3.0 cm，淡黄白色，具深浅不一的紫红色斑点或斑块；花瓣椭圆形，边缘波状具白色缘毛，长5.0～5.5 cm，宽3.5～4.0 cm；唇瓣兜状，长3.5～4.5 cm，宽1.9～2.1 cm，黄褐色，具紫红色斑点；退化雄蕊黄色，中心具紫褐色晕。

2.3 繁殖及栽培技术要点

选择健康的亲本进行人工授粉杂交，收取蒴果后，采用组织培养无菌播种的方式进行。将装有瓶苗的培养瓶置于温室中炼苗10～15 d，取出瓶苗，洗净根部培养基，0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min，取出晾干后移栽到兰石体积比∶陶粒=（1～3）∶（1～2）的混合基质中；需用双层遮阴网遮阴。兰石和陶粒用清水浸泡3～4 h至充分吸水后，再用清水冲洗除去残渣和尘泥，晾晒至1～2成干。移栽成活率达85%以上。

移栽5～7 d开始施肥。选择水溶性的平衡肥（氮∶磷∶钾=20∶20∶20），以1 000～1 500倍浓度，每10～15 d基部澆灌施肥1次；为防栽培基质中盐分过高，每月用清水淋洗栽培基质1次，淋洗方法同施肥方法。移栽后前6个月为小苗管理期，待小苗长出新根，更换栽培杯，施肥方式同上。植株进入大苗期后，施用高磷钾肥（氮∶磷∶钾=10∶20∶30），施用方式、浓度和次数同上。小苗和大苗期保持通风透气遮阴，湿度在70～85%，温度在20～32℃条件。换盆时间宜选择3～5月和9～10月，健康的植株可直接转入较大盆中，病株可用70%酒精擦拭过的剪刀剪去老根和病叶，清除基质，将修理好的植株用0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min后，放在阴凉处晾干后种植。

病害的防治是每月分别喷洒50%的多菌灵可湿性粉剂800～1 000倍1～2次，70%的甲基托布津可湿性粉剂800～1 000倍1～2次；虫害的防治是将40%的氧化乐果乳油800～1 000倍和80%的敌敌畏800～1 000倍交替喷施，防治菜蛾和蜗牛，每月喷施1～2次。

3 讨论与结论

兜兰属植物的杂交育种由于在自然条件下受种子萌发条件的限制，发展较缓慢，而采用普通的无菌播种技术也存在着种子萌发率低和周期长的困难。‘带叶兜兰人工同种异株授粉的种子播种在1/2 MS、MS、RE、VW、‘花宝1号、1/4 MS的基本培养基上，1/2 MS和RE的基本培养基上种子萌发率高[9-12]；‘带叶兜兰授粉后120～150 d的种子萌发率高[9-10，13]。‘同色兜兰人工同种异株授粉的种子播种在1/2 MS和1/4 MS的基本培养基上，种子萌发率高；同时，‘同色兜兰授粉后210 d的种子萌发率最高[14-15]。因此，不同的兜兰品种的最佳种子萌发培养基和最佳授粉后果荚的采集时间也不同。

笔者经改变基本培养基的成分，将基本培养基调成1/6MS，再在其中添加椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、6-苄氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L和卡拉胶粉9.5 g/L，以‘带叶兜兰为母本、‘同色兜兰为父本的杂交蒴果种子在此培养基上萌发率达90%以上。推测可能是1/6 MS的盐离子浓度低，有利于种子的萌发，而其中附加物椰汁和香蕉汁，也为种子的萌发提供必需的物质基础，其具体的作用机理需要做进一步探究。在已成功报道的兜兰种子萌发的培养基中，一般都有附加物椰汁或香蕉汁[5，10-12，14-15]。已报道的兜兰新品种的选育时间在3～5年[5-8]。本研究的选育时间为4年，与已报道的兜兰新品种选育的时间长一致。

参考文献

[1] 刘仲健，陈心启，陈利君，等. 中国兜兰属植物[M].2009，北京：科学出版社.

[2] 曾宋君，陈之林，吴坤林，等. 兜兰无菌播种和组织培养研究进展[J]. 园艺学报，2007，34（3）：793-796.

[3] 曾宋君，田瑞雪，陈之林，等. 兜兰属植物杂交育种研究进展[J]. 热带亚热带植物学报，2010，18（2）：459-468.

[4] 曾宋君，夏念和，陈之林，等. 国产兜兰属植物观赏价值评价及其在华南地区的应用前景分析[J]. 中国野生植物资源，2011，30（2）：9-13，35.

[5] 傅燕艳，曾宋君，张建霞，等. 兜兰新品种‘南之霞[J]. 园艺学报，2013，40（4）：804-806.

[6] 王燕君，谭志勇，刘运权，等. 兜兰新品种‘红玛瑙[J]. 园艺学报，2012，39（8）：1 626-1 628.

[7] 闻真珍，王燕君，林 茵，等. 兜兰新品种‘农大乌纱[J]. 园艺学报，2014，41（3）：609-611.

[8] 王燕君，张乐萍，王亚平，等. 兜兰新品种“金冠兜兰”的选育[J].北方园艺，2016，（2）：154-156.

[9] 曾宋君，陈之林，段 俊. 带叶兜兰的无菌播种和离体快速繁殖[J]. 植物生理通讯，2006，42（2）：247.

[10] 田 凡，颜凤霞，姜运力，等. 带叶兜兰种子无菌萌发及试管成苗技术研究[J].江苏农业科学，2017，45（9）：30-33.

[11] 陈宝玲，陈 尔，杨舒婷，等. 不同培养基组分对带叶兜兰离体培养效果的影响[J]. 南方农业学报，2016，47（10）：1 730-1 736.

[12] 陈宝玲，周千淞，陈 尔，等. 带叶兜兰壮苗生根培養基及移栽基质选择[J]. 广西林业科学，2017，46（2）：206-209.

[13] 张娟娟，严 宁，胡 虹. 三种兜兰属植物种子发育过程及其与无菌萌发的关系[J]. 植物分类与资源学报，2013，35（1）：33-40.

[14] 王莲辉，姜运力，余金勇，等. 同色兜兰的组织培养与快速繁殖[J]. 植物生理学通讯，2008，44（6）：1 171-1 172.

[15] 李秀玲，黄昌艳，宋 倩，等. 同色兜兰的非共生萌发与快速繁殖研究[J]. 植物科学学报，2016，34（1）：127-134.