“通督调神法”针刺对局灶性脑缺血大鼠认知功能的影响

粟漩，钱虹，麦方永

（广东省中西医结合医院 康复科，广东 佛山528200）

认知障碍是脑卒中患者最常见的功能障碍之一，脑卒中患者3个月时认知损害的发生率可达30%［1］，Ballard等［2］调查发现，年龄超过75岁的卒中患者脑卒中后3～15个月发生痴呆的概率高达9%。本课题组前期研究发现 “通督调神法”针刺能有效改善脑卒中患者的吞咽功能［3］，临床实践亦证明 “通督调神法”针刺治疗神志相关疾病疗效确切［4－5］。基于此，本研究通过观察 “通督调神法”针刺对局灶性脑缺血模型大鼠学习记忆功能的影响，为 “通督调神法”针刺在脑卒中后认知障碍的临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 动物 SPF级雄性SD大鼠40只，体质量250～300 g，广州中医药大学 （大学城校区）实验动物中心提供 （合格证明编号：NO.44002100009037），饲养温度在22℃～25℃，相对湿度在45%～60%，保持12小时明暗周期，自由进食与饮水。

1.2 仪器 Morris水迷宫设备 （广州飞迪生物科技有限公司）。

1.3 模型制备 大鼠适应性喂养1周后随机分为假手术组10只与手术组30只，手术组参照改良Longa法制备左侧大脑中动脉阻塞 （middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，假手术组仅分离动脉，不插入尼龙栓线。结果：假手术组死亡2只，手术组死亡6只，手术组大鼠再随机分成模型组、针刺组、西药组，每组各8只。

1.4 治疗方法 ①假手术组不给予任何处理。②模型组不给予治疗。③针刺组予 “通督调神法”针刺。操作：大鼠绑缚固定，参照大鼠穴位针灸图谱［6］取百会、大椎、人中、风府等穴，常规消毒后，用华佗牌1寸无菌针灸针针刺， “百会”向后斜刺 0.5寸， “大椎”直刺 0.5寸， “人中”直刺 0.5寸，“风府”斜刺0.5寸，行针强度以大鼠安静耐受为度，留针20 min。④西药组予尼莫通12 mg／kg，按20 mL／kg灌胃。针刺及灌胃均为每日1次，连续治疗15天。

1.5 行为学观察 治疗结束后第1天，所有大鼠进行水迷宫适应性训练。治疗结束后第2天和第4天进行Morris水迷宫测试，具体内容包括：①定位航行实验：将大鼠从第1象限边缘面向水池壁放入水中，记录大鼠在水池中寻找到平台的时间（即逃避潜伏期）及游泳路径，定位航行实验上午、下午各2次。②空间探索实验：完成最后1次定位航行实验后撤除平台，大鼠入水后自由游泳120 s，记录每只大鼠的平台穿越次数以及游泳轨迹。

1.6 统计学方法 采用SPSS 19.0分析数据，计量资料以x±s表示，组间比较采用单因素方差分析，两两比较方差齐性时采用 LSD－t法， 方差不齐时采用 Dunnett＇s T3 法， P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验动物情况 针刺组有2只大鼠因针刺意外死亡，假手术组和模型组各有1只状态不佳，最终纳入统计大鼠28只。

2.2 各组定位航行实验结果比较 各组大鼠逃避潜伏期经方差分析，差异有统计学意义 （P<0.05）。两两比较：与假手术组比较，模型组的逃避潜伏期明显增加 （P<0.05）；与模型组比较，针刺组和西药组的逃避潜伏期明显缩短 （P<0.05），且针刺组第4天的逃避潜伏期比西药组更短 （P<0.05）。见表1、图1。

表1 各组大鼠的定位航行实验结果比较 （x±s）

图1 定位航行实验各组大鼠的游泳轨迹比较

2.3 各组空间探索实验结果比较 各组大鼠平台穿越次数经方差分析，差异有统计学意义 （P＜0.05）。两两比较：与假手术组比较，模型组平台穿越次数减少 （P＜0.05）；与模型组比较，西药组、针刺组平台穿越次数增加 （P＜0.05），且针刺组多于西药组 （P ＜0.05）。 见表 2、 图 2。

表2 各组大鼠的空间探索实验结果比较 （x±s）

图2 空间探索实验各组大鼠的游泳轨迹比较

3 讨论

缺血性脑卒中是脑血管病的最常见类型［7］，据统计，我国缺血性脑卒中发病率高达 91.3／10 万 ～ 263.1／10 万［8］， 缺血性脑卒中和卒中后认知障碍已成为我国最重要的公共卫生问题之一。

脑卒中后认知障碍属中医学 “痴呆”范畴，该病多以阴精、气血亏虚为本，以痰浊瘀血为标，病位在脑。 《难经·二十八难》： “督脉者……上至风府，入属于脑”、 “脑为元神之府”，可见督脉与脑、神志关系密切。 “通督调神法”是通过刺激督脉要穴以疏通督脉经气，最终达到醒脑调神功效的一种治疗思路。针刺处方所选均为督脉穴位，其中 “百会”为 “三阳五会”， “大椎”与百会合用能调节一身阳气， “风府”为“风邪所入之府，脑后之空窍” （《医经理解》）， “人中”为手足阳明经与督脉的交会穴，针刺以上穴位能起到益气通督、调神健脑的功效。本研究结果显示，模型组的逃避潜伏期较假手术组增加，平台穿越次数较假手术组减少，说明MCAO模型大鼠的学习记忆功能出现障碍，而经 “通督调神法”针刺和尼莫通灌胃治疗后，MCAO模型大鼠的学习记忆功能明显改善。

综上所述， “通督调神法”针刺能改善局灶性脑缺血大鼠的认知功能。 “通督调神法”针刺改善脑缺血大鼠认知功能的作用机制是什么？远期疗效如何？ “通督调神法”针刺和尼莫通灌胃对缺血性认知障碍是否有协同治疗作用？以上问题均值得进一步研究探讨。

[1] 张通.中国脑卒中康复治疗指南 (2011完全版) [J].中国康复理论与实践,2012,18(4):301-318.

[2] Bollard C,Rowan E,Stcphcns S,et al.Prospective follow-up study between 3 and 15 months after stroke:improvements and decline in cognitive function among dementia-free stroke survivors>75 years of age[J].Stroke,2003,34(10):2440-2444.

[3] 粟漩,赖新生.通督调神法电针治疗脑卒中后吞咽障碍疗效观察[J].针灸临床杂志,2010,26(6):3-6.

[4] 孙培养,储浩然,李佩芳,等.通督调神针法治疗脑卒中后抑郁:随机对照研究 [J].中国针灸,2013,33(1):3-7.

[5] 张绪峰,蒋丽元,王慧.李平通督调神针法改善失眠症患者睡眠及心理状态的临床研究 [J].中华中医药学刊,2015,33(10):2542-2545.

[6] 华兴邦,周浩良.大鼠穴位图谱的研制 [J].实验动物与动物实验,1991,2(1):1-5.

[7] 贾建平.神经病学 [M].北京:人民卫生出版社,2008:175.

[8] 涂雪松.缺血性脑卒中的流行病学研究 [J].中国临床神经科学,2016,24(5):594-599.