简述蒙医药治疗ITP与hsa-miR-143△

萨茹拉 布仁巴图

(1.内蒙古民族大学，内蒙古 通辽 028000; 2.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028000)

1 ITP 的发病机制

原发性血小板减少症(immune thrombocytopenia ,ITP) 是由机体免疫系统功能的紊乱引起血小板破坏增加或者自身抗体介导的血小板破坏引起的血小板数目减少的自身免疫性出血性疾病。ITP的发病机制与免疫相关,病前多有病毒感染史,亦有人认为幽门螺杆菌感染与 ITP 的发病有关。在体液免疫机制方面，其主要的抗血小板抗体是膜糖蛋白抗体，包括 GPIIb-IIIa, GPIb-IX,GPIa- IIa,和 GPIV[1]，在细胞免疫机制方面，辅助性 T 细胞(Th)在维持机体稳态方面发挥着重要的作用[2-3]。Lazarus 等[4]发现,在慢性 ITP 患者血清中IL-2 有相似性质的细胞因子 IL-15 是增加的。这些发病机制看似错综复杂，但归根结底是由于免疫细胞中某些基因的表达异常，从而引发对自身血小板的免疫应答，减少了体内血小板的数量，从而引发 ITP 的形成。

2 蒙医药与ITP

原发性血小板减少性症(ITP)在蒙医学理论中是齐苏病的范畴，也属于巴木病一类，是人体三根七素紊乱或者在三根的作用下形成七素途中由各种环境、饮食、生活习惯等以及其它特别的因素所致的七素形成不完善或者三根七素的量发生失衡导致身体各个器官功能紊乱甚至产生疾病。蒙医学理论认为，人体的正常形成均在三根七素的平衡里，由一个相对阴阳平衡的水平上才能完善，如果人体的三根紊乱导致进一步七素失衡是所有疾病的根源。三根所特有的20个因子均因饮食、行为、环境、药物等因素的17个功能所影响，其中哪一步的变化均能引起全身的病变。所以蒙医药理论均以调节三根七素的平衡来达到治疗疾病的目的。蒙医药治疗出血性疾病的历史悠久,从上世纪60年代开始各蒙医学家以止血、凉血、收敛解毒功效的蒙药探索性治疗出血性疾病(包括原发性血小板减少性紫癜)，并取得了满意的疗效，积累了许多宝贵的临床经验，已形成了地域优势。其中蒙药齐顺保利尔毒副作用低、临床长期用药安全可靠，蒙药齐顺保利尔具有明显的升血小板，提高血小板质量作用，使血小板的生存时间延长，增加血小板寿命，提高机体免疫力和促进骨髓造血等功能。尽管蒙药齐顺保利尔在临床治疗效果明显，但其尚未清楚治疗机制，这在一定程度上阻碍了该药推广到其它地区用于治疗ITP以及其它出血性疾病上。

3 ITP的治疗

目前，针对ITP的西医治疗方法有糖皮质激素和脾切除为主要的治疗手段，其中首选肾上腺皮质激素强的松，其有效率为 70%～80%，但在强的松治疗减量过程中容易复发，对于病情十分危急的患者给予血小板输注也是一种对症治疗方法，而静脉输注丙种球蛋白和/或甲基强的松龙是目前普遍应用的西医治疗方法。另外,还可以应用重组活化的因子Ⅶ(rhF Ⅶa)，还有免疫抑制剂的应用和抗-Rh(D)免疫球蛋白的治疗，免疫抑制剂主要有环磷酰胺、硫唑嘌呤、长春新碱等，但其副作用大，应慎用[5-7]。因此蒙药齐顺保利尔治疗ITP能够弥补现代医学中的不足，根治慢性ITP，除了提高血小板计数及质量，延长其寿命之外，据推测具有明显的调节机体免疫功能的作用[8]。

4 miRNA方面的研究

当前常用的miRNA权威数据库是miRBase,该数据库提供miRNA注册、序列查询、基因组定位、相关文献查询和靶基因预测等功能，目前已更新到21.0版本，涵盖223物种，包含28645条miRNA发夹前体，35828条成熟miRNA[9]。

miRNA是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其长约20～24个核苷酸，miRNA调控着许多关键的细胞内过程,包括免疫功能和造血过程[10]。1993年首次在秀丽隐杆线虫中发现miRNA lin-4，7年后在果蝇中发现第2个miRNA let-7。随着对于miRNA作用机理的不断的深入研究，发现miRNA在疾病发生和发展过程中起到不可忽视的作用[11]。近些年，国内外研究表明有些miRNA与ITP患者有明显关联性，隋涛等[12]发现ITP患者外周血血浆中有29个差异表达的miRNA，其中15个上调，14个下调，靶基因测序程序TargetScan和miRanda预测得出的608个靶基因，生物信息学分析提示ITP患者差异表达的miRNA参与了生物学功能、分子功能、细胞组分、Ca+信号通路、T细胞受体信号通路、胞吞作用和代谢途径等等多个生物学途径，但是具体的miRNA致病分子机制尚不清楚，有待更多的实验研究探索和证明。Bay等[13]研究 通过筛选ITP 患者血浆中异常表达的miRNA水平作为一种ITP的生物标记物，发现了8个差异表达的miRNA(miR-302c,miR-483, miR-410, miR-544a, miR-302a, miR-223, miR-597, 和 miR-205)并对急性和慢性ITP可能的发病机制进行了合理的阐述。Jernas等[14]人通过基因组比较分析ITP和正常人的mRNA和miRNA的表达，得出22个差异表达miRNA,通过把靶基因测序程序Target-Scan 和 Miranda算法分析得出靶基因的57个靶基因均与免疫功能有关，并且实验中验证了ITP患者血清中CXCL13的表达异常增多。因此，miRNA被认为在ITP的发病机制中发挥极为重要的作用。

5 miRNA参与血小板的形成

在干细胞分化及骨髓各系细胞生成和成熟的过程中均有miRNA参与，其中mi R-155能结合并抑制与骨髓细胞分化相关的mRNAs从而阻碍造血干细胞分化；miR-28能靶向结合促血小板生成素受体，其表达抑制CD34+细胞来源的巨核细胞的最终分化，且在骨髓增生疾病患者的血小板中过度表达；mi R-150表达上调能促使巨核-血红细胞前体细胞向巨核细胞系而非红细胞系方向分化[15-16]。

6 关于hsa-miR-143

hsa-miR-143位于第 5号染色体5q32区上,其序列是 5'-UGAGAUGAAGCAC- UGUAGCUC-3'，具体位置在5 :148808481-148808- 586，在结构上与其他microRNA一样，不编码蛋白，不含开放阅读框，具有高度的保守性。hsa-miR-143的合成包含3个部分，首先，miR-143在RNA聚合酶Ⅱ的作用下形成pri-microRNA，随后，在与Drosh酶有关的DGCR8蛋白作用下形成更小的具有(70nt)双链发夹结构的pre-microRNA;最后，在Exportin5和GTP依赖蛋白的作用下，由细胞核转运到细胞质，经过Dicer酶的加工，形成21个核苷酸的成熟microRNA，是含有反义链的双链RNA分子，茎环结构的前体根据剪切位点的不同可生成hsa-miR-143-3p和hsa-miR-143-5p[17]。生物信息学分析提示hsa-miR-143可能与细胞分化、代谢密切相关；hsa-miR-143在人脂肪前体细胞诱导分化过程中的表达规律，提示了FFAs、Leptin、Resistin等因素对成熟人脂肪细胞hsa-miR-143的表达具有一定的调控作用[18]。而进一步研究表明蒙药齐顺保利尔治疗ITP调控miRNA的差异表达，因此 在分子生物水平上进一步研究蒙药组方对疾病的影响，来发展我们的传统医学，从科学的角度来解释民族医药的神奇功效。

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