微生物学检验材料采集、保存和运送

贾北宁（辽宁省葫芦岛市南票区畜产品安全监察所 125027）

1 采集

1.1 病料采集的注意事项

病料应该新鲜，有代表性，有一定的数量。从鸡的尸体上取材料时，夏天不应迟于6～8h，冬季不应迟于12～24h。

为了进行病原体的分离，病料应尽可能减少污染。因此，在尸体剖检前，应将尸体浸泡在适宜消毒剂溶液中，既作了皮肤和羽毛的消毒又减少在剖检时羽毛和皮屑飞扬对病料的污染。

要求在剖开腹腔后，首先取微生物检查材料，减少病料在空气中暴露的时间，避免在进行病理学检查时污染病料。

采集病料要求无菌，所用的器械和容器必须事先灭菌，尽可能以无菌操作采集病料。

病料采集后，如不能立刻进行检验，应立即存放在冰箱中。

进行病原微生物检验时，应根据疾病的性质不同而采集不同的病料。

1.2 病料的采集方法

1.2.1 组织和实质脏器的采集方法

病料要用无菌操作的方法从新鲜的尸体采集，为避免污染，剖开腹腔后，注意不要损坏肠道。如有细菌分离培养条件，首先以烧红的铁片烫烙脏器表面，用接种环（火焰灭菌）自烫烙的部位插入组织中缓缓转动接种环，取少量组织或液体，作涂片镜检或接种在培养基上。培养基可根据不同情况而进行选择。一般常用鲜血琼脂平板、普通琼脂平板、营养肉汤或疱肉培养基，必要时，还用其他特殊培养基。

1.2.2 液体材料的采集方法

血液、胆汁、渗出液和浓汁等，可用灭菌吸管、毛细吸管或注射器经烫烙部位插入，吸取内部液体材料，然后将材料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。也可用接种环经消毒的部位插入，提取病料直接接种在培养基上。

1.3 全血的采集方法

全血是指加抗凝剂的血液。用无菌操作，从鸡的心脏采血，盛入试管中。根据欲采的血量，在试管中加入适量的抗凝剂（3.8～4%的枸橼酸钠0.1ml，可抗1ml血液。也可以在5ml血中加入20%枸橼酸钠2～3滴）。

1.4 血清的采集方法

用无菌操作从鸡的心脏采血数毫升（一定不要加抗凝剂），放在灭菌的试管中，摆成斜面，待血液凝固，析出血清后，再将血清吸出，置于另一灭菌试管中。

1.5 肠道及肠内容物采集方法

肠道只需要选择病变最明显的部分，将其中的内容物取掉，用灭菌水轻轻冲洗，然后放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲保存液瓶中送检。也可将肠管剪开，除去内容物，用烧红的铁片轻轻烫烙黏膜表面，将接种环插入黏膜层，取少量材料接种在培养基上。

烧烙肠道表面，用吸管扎穿肠壁，从肠腔内吸取内容物，放入试管中，或者将带有粪便的肠管两端结扎，从两端剪断送检。

1.6 皮肤及羽毛的采集方法

皮肤病料要选择病变最明显的边缘部分，采取少许放于灭菌容器中送检。羽毛也要在病变明显部分采集，用刀将羽毛及其根部皮屑刮取少许放入灭菌容器中送检。

1.7 胚胎样品

选取完整、无腐败的胚胎送检。

2 病料运送

涂片要求涂薄而均匀，自然干燥后，为了防止玻片互相磨蹭，玻片之间垫以火柴棍把最上面的一张翻过来，使涂面向下，用小线扎好，最后用纸包好，送检。

装在试管和广口瓶中的病料应密封后装在冰筒中运送，防止试管和容器翻倒。

运送整个鸡的尸体，用浸透适宜消毒液的布包好，装入塑料袋中。

送检材料应附说明，包括以下内容：送检单位，畜主的姓名和畜禽场的地址，畜禽饲养的品种及其数量，被感染的畜禽种类，首发和继发病例的日期及造成的损失；出现临床症状的畜禽数量、死亡畜禽数量及其年龄，临床症状及其持续时间，死亡情况和时间，基本病理变化，免疫和用用药情况等；送检样品清单和说明，包括病料的种类和数量、保存方法、要求做何种检测，送检者的姓名、地址、邮编和电话，送检日期等。