溶血、脂血对生化检测项目医学决定水平结果的影响分析

1 材料与方法

1.1 材料：选取我院2016年10月-12月的门诊健康体检者、住院患者，其血清无肉眼可见的溶血、脂血、黄疸的标本。

1.2 仪器与方法：SIEMENS ADVIA 2400全自动生化分析仪及原装配套试剂。K采用间接离子选择电极法， GLU采用己糖激酶法， UREA采用尿素酶法，CREA采用肌氨酸氧化酶法， ALB采用溴甲酚绿法，AST、ALT采用速率法。参考仪器操作手册设置溶血(H)、脂血(L)指数参数。

1.3 干扰物配置

1.3.1 不同浓度的溶血模型配制：收集5 ml肝素化的新鲜全血，离心10 min得到压积红细胞，去除血浆后，加入10 mL等渗的盐溶液，慢慢地颠倒试管10次，1 500 r/min 5 min离心后去除盐溶液。重复洗涤红细胞3次，加入等体积的蒸馏水，颠倒试管10次使其充分混匀。低温保存过夜，隔日解冻至室温后3 000 r/min 30 min离心沉淀红细胞碎片，保留上清液(溶血产物)，检测血红蛋白浓度(C)为54 g/L，分别配制不同浓度干扰物浓度，将其与基础血清混匀，比例为1∶9，最终模型管HGB浓度为对照组H0：-(0g/L);H1：+ (0.68g/L);H2：++ (1.35 g/L);H3：+++ (2.70 g/L);H4：++++ (4.05 g/L);H5：++++ (4.73 g/L);H6：++++ (5.40 g/L)。

1.3.2 同浓度的脂血模型配制：将含甘油12.5g的脂肪乳分别配制不同梯度的干扰物(0%、12.5%、25%、50%、75%、87.5%、100%)，将不同浓度的干扰物与基础血清混合，比例为1∶9，最终模型管浓度为对照组L0：-(0 g);L1：+(0.19 g);L2：++(0.38 g);L3：+++(0.76 g);L4：++++(0.94 g);L5：++++(1.09 g);L6：++++(1.25 g)。

1.4 各项目医学决定水平值和生物参考区间:K3.0 mmol/L、5.8 mmol/L、7.0 mmol/L，3.5～5.3 mmol/L；GLU：2.8 mmol/L、7.0 mmol/L、10.0 mmol/L，3.9～6.1 mmol/L； UREA：3.0 mmol/L、7.1 mmol/L、14.2 mmol/L，2.9～8.2 mmol/L； CREA：40.0 μmol/L、141 μmol/L、530 μmol/L，男性40～106 μmol/L，女性40～88 μmol/L；ALB：20.0 g/L 、30.0 g/L、57.0 g/L，40.0～55.0g/L；AST：30 U/L、60 U/L、300 U/L，男性15～40 U/L，女性13～35 U/L ；ALT：30 U/L、60 U/L、300 U/L，9～50 U/L，女性7～40 U/L。

2 结果

2.1 不同浓度溶血的检测结果：K、AST、ALT(溶血指数+～++++)、ALB(溶血指数++++)与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，对不同医学决定水平有干扰； UREA、CREA、GLU(溶血指数+～++++)、ALB(溶血指数+～+++)，与对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)，对不同医学决定水平无干扰，见表1。

表1 加入不同浓度溶血对检测结果的影响

医学决定水平H0(-)H1(+)H2(++)H3(+++)H4(++++)H5(++++)ALB(g/L) 20．0019．65±0．8519．57±0．7919．72±0．7320．33±1．06∗21．15±1．16∗21．68±1．09∗ 30．0035．15±1．0634．88±0．8135．15±0．8035．81±0．74∗36．69±0．87∗37．33±0．80∗ 57．0052．63±0．8152．27±0．8352．68±0．7153．38±0．73∗53．83±080∗54．32±0．82∗K(mmol/L) 3．003．63±0．233．81±0．22∗4．05±0．21∗4．56±0．28∗4．90±0．31∗5．19±0．30∗ 5．805．25±0．315．47±0．30∗5．78±0．19∗6．20±0．11∗6．55±0．11∗6．97±0．17∗

注：*与H0管结果比较，P<0.05；轻度溶血：+～++，中度溶血：+++，重度溶血：++++。

2.2 不同浓度脂血的检测结果：AST、ALT、GLU(2.8 mmol/L)(脂血指数>++)，与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.05)，对不同医学决定水平有干扰； K、UREA、CREA、ALB、GLU(7.0、10.0 mmol/L)(脂血指数+～++++)、AST、ALT(脂血指数+～++)与对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05)，对不同医学决定水平无干扰，见表2。

表2 加入不同浓度脂血对检测结果的影响

注：*与 L0管结果比较，P<0.05；轻度脂血：+～++，中度脂血：+++，重度脂血：++++，-：仪器无结果。

3 讨论

医学决定水平是不同于参考值的另一些限值，通过观察测定值是否高于或低于这些限值，可在疾病诊断中起排除或确认的作用，或对某些疾病进行分级或分类，或对预后作出估计，以提示医师在临床上应采取何种处理方式。对低于或高于生物参考区间的各指标的实验结果，临床通常依赖该指标的医学决定水平进行临床诊断、治疗，因此为了保证给临床提供一个准确的结果，实验室除了检测技术和方法特异性不断提高和完善外，对样本的溶血脂血也应引起重视[2]。本实验中随着溶血指数增加对AST产生正干扰，ALT产生负干扰，与文献报道[3]一致。临床上通常认为20U/L是排除值，低于此水平时可排除多种与AST、ALT增高有关的疾病；60 U/L是高于参考范围上限值，当超过此水平时，多种与AST、ALT增高有关的疾病均应予以考虑，如肝细胞损伤、心肌梗死、肌肉与骨骼疾患、肝后胆道阻塞等；高于300 U/L通常为急性肝细胞损伤，如病毒性肝炎、中毒性肝炎等，而一般酒精性肝炎、心肌梗死、进行性肌营养不良等测定值均在此水平以下。本研究中溶血指数≥++时，AST医学决定水平20 U/L的结果达到甚至超过参考区间上限， 60 U/L的结果均>60 U/L，300 U/L的结果干扰偏差不影响其临床意义。而ALT医学决定水平20 U/L的结果干扰偏差不影响其临床意义，60 U/L、300 U/L结果低于60 U/L或300 U/L。因此，溶血导致AST、ALT医学决定水平限值的偏差，给临床的诊断及治疗提供错误的信息。

因临床接近7.0 mmol/L的K样本很少，本实验仅选择了K的低中浓度医学决定水平进行研究。红细胞内的钾离子浓度是血清的22倍，所以溶血会造成K结果的正干扰[4-5〗，这与本实验结果一致。K限值3.0 mmol/L是低于参考范围下限，若测定值低于此值，可能会出现虚弱、地高辛中毒和(或)心律失常，应予以合适的治疗；5.8 mmol/L高于参考范围上限，若测定值高于此值，应借助其他试验查找高钾原因，并考虑是否有肾小球疾病。溶血指数++时，医学决定水平3.0 mmol/L结果已在正常生物参考区间，5.8 mmol/L结果已超过7.0 mmol/L。当ALB溶血指数>+++即重度溶血时，差异有统计学意义。由于溶血时HGB本身颜色对检测的光学干扰,HGB在431和555 nm波长附近均有吸收峰,本研究ALB的检测方法主波长为630 nm，与555 nm接近，增加比色吸光度值，从而产生正干扰[6]。而ALB低于20g/L，一般在肝病患者提示严重预后不良；低于35 g/L时，各种引起白蛋白降低的因素均应列入考虑范围，如肾病、肝功不全、严重的营养不良、急慢性炎症、恶性肿瘤等；高于57 g/L以上的，应考虑脱水的可能性。因此重度溶血时，医学决定水平20 g/L、35 g/L已无其限值的临床意义。且脂血指数+++即中度脂血时，ALT无法检测出结果，各医学决定水平的偏差均>10%，K产生正干扰且已偏离低值医学决定水平临床意义，与文献一致[7-8]。

综上所述，溶血脂血样本导致部分生化项目医学决定水平偏离其临床意义，且溶血脂血程度越高干扰越显著，尤其对低中浓度医学决定水平限值的临床意义影响更大，故中度、重度溶血脂血样本不适宜直接检测生化项目。

[1] Sonntag O.Hemolysis as an interference factor in cl-inical chemistry[J].Clin Biochem,2002,24: 27.

[2] 王燕.溶血脂血对生化检验结果的影响分析[J].当代医学，2016，5(22)：63-64.

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[4] 王伟.血清标本发生溶血和脂血对生化检验结果的影响分析[J].当代医药论丛，2015，13(19)：47-48.

[5] 黄琼坚.55例标本溶血对生化检测结果影响的分析[J].当代医学,2016,18(11)72-74.

[6] 尹玲，张静，吴倩，等.标本溶血对生化检测结果的影响及预防探讨[J].医药论坛杂志，2015，36(1)：118-119.

[7] 林景涛，翟锬，代艳杰，等.高脂血对血清酶类活性测定影响及处理方法[J].检验医学与临床，2016，7(15)：1542-1546.

[8] 朱征，丁显平，杨敏，等. 高脂血对临床生化测定影响及处理方法的临床研究[J].国际检验医学杂志，2015，33(20)：2533.