九个样品黄芩苷测定的探讨

孙荣飞 赵晓星 张金玺 陈睿彦 赵泽娟 赛金旭

（昭通市食品药品检验所 云南 昭通 657000）

银黄颗粒等九种制剂，为常用药，收载于中国药典及国家药品标准中[1-2]，肺力咳合剂、清开灵注射液为处方药外，其余均为非处方药。黄芩苷为方中的主要成分之一，有抗癌、抗菌、抗病毒、解热、降压、镇静等多种药效[3]，各标准项下，均用高效液相测定其含量，作为质量指标之一，其中一些品种，在进行含量测定时，出现供试品溶液放置一定时间后，所测得含量有不同程度的升高或降低，通过查找资料，暂未有报道，本文便从样品制备、方法学验证、数据分析方面作考察。

1.仪器、试药

1.1 仪器

LC-20AT高效液相色谱仪（日本岛津），MS105DU电子天平（梅特勒-托利多，上海公司），UC-7100S超声波清洗器（美瑞泰克科技（天津）有限公司）。

1.2 试药

黄芩苷对照品（批号：110715-201619）购于中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱纯，乙酸乙酯、磷酸、盐酸均为分析纯，水为纯化水。九种制剂购自本地药店，编号分别为1～9，便于书写及表述，以下均以数字编号标示，详细信息见表1。

2.方法与结果

2.1 色谱条件

2.1.1 1号样品色谱条件：色谱柱为岛津vp-ODS柱（4.6mm×250mm，5μm），DAD检测器，流动相为甲醇-水-磷酸（50:50:0.2），检测波长274nm，柱温30℃，流速1.0mL/min。

2.1.2 2号样品色谱条件：流动相为甲醇-水-冰醋酸（50:50:1），其他条件同2.1.1。

2.1.3 3号样品色谱条件：流动相为甲醇-0.1%磷酸（40:60），检测波长280nm，其他条件同2.1.1。

2.1.4 4号样品色谱条件：流动相为甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠（40:60），检测波长275nm，其他条件同2.1.1。

2.1.5 5号样品色谱条件：流动相为甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），检测波长315nm，其他条件同2.1.1。

2.1.6 6、7号样品色谱条件：流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（45:55），检测波长280nm，其他条件同2.1.1。

2.1.7 8号样品色谱条件：流动相为甲醇-水-磷酸（47:53:0.2），检测波长280nm，其他条件同2.1.1。

2.1.8 9号样品色谱条件：流动相为甲醇-水-冰醋酸（45:55:1），其他条件同2.1.1。

2.2 溶液的配制

2.2.1 对照品溶液的配制 取黄芩苷对照品，用甲醇制成每 1mL 分别含 50μg、0.1mg、25μg、50μg、60μg、0.1mg、70μg、0.1mg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的配制

2.2.2.1 1号供试品溶液的制备 取1号样品，研细，分别精密称取1.5g（n=6），置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超声（功率250W，频率40kHz）30分钟，依次放置0、1、2、4、8、24h，补足重量，过滤，即得。

2.2.2.2 2号供试品溶液的制备 取2号样品，研细，分别精密称取1g（n=6），置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，超声（功率250W，频率40kHz）20分钟，依次放置0、1、2、4、8、24h，补足重量，过滤，即得。

2.2.2.3 3号供试品溶液的制备 取3号样品，去除包衣，研细，分别精密称取0.1g（n=6），置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25mL，超声（功率250W，频率40kHz）10分钟，依次放置0、1、2、4、8、24h，补足重量，过滤，即得。

2.2.2.4 4号供试品溶液的制备 取4号样品，研细，分别精密称取0.75g（n=6），置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100mL，超声（功率250W，频率40kHz）10分钟，依次放置0、1、2、4、8、24h，补足重量，过滤，即得。

2.2.2.5 5号供试品溶液的制备 取5号样品，研细，分别精密称取3g（n=6），置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50mL，超声（功率250W，频率40kHz）30分钟，依次放置0、1、2、4、8、24h，补足重量，过滤，即得。

3.讨论

3.1 9 个样品中黄芩苷的测定，7个为固体制剂，5个出现不同程度的溶出增加，1个无影响，1个含量在降低；2个液体制剂无影响。从提取溶剂、提取方式上看，有甲醇、70%甲醇、50%甲醇、水，均出现显著变化。而2个液体制剂及1个含乳糖的固体制剂无显著变化，其他固体制剂中均有蔗糖或糊精，所测定的9个样品，黄芩苷在含蔗糖或糊精的固体制剂中的溶出与放置时间有明显关联。鉴于2、5号在24h内的结果变化在3%之内，属于可接受范围，在制法中加入过乙醇，与1、3、4号不同，是否还与制法有关，还需进一步研究。

3.2 甲醇及不同浓度甲醇从固体制剂中提取黄芩苷，出现溶出滞后，需放置一定时间，以及含蔗糖固体制剂水溶乙酸乙酯萃取，出现黄芩苷随时间延长而下降的现象，以上是否具有普遍性，还有待进一步验证，这种现象应引起检验检测的重视，特别是监督检验。