安徽丹皮质量分析与评价

周恒+宋扬+胡胜甜+吴计划+王芬

摘 要：目的：分析不同产地不同年份不同规格丹皮的质量。方法：测定不同产地不同年份丹皮的水分，HPLC法测定丹皮中丹皮酚的含量。结果：丹皮酚作为有效成分评价，其含量最高为2.90%，最低为1.78%。结论：不同产地年份及规格的质量差异较大，铜陵GAP基地丹皮质量为优。

关键词：丹皮；丹皮酚；质量分析；评价

中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2017）24-0106-03

Abstract：Objective：To analyze the quality of Cortex Moudan which grew for 3～6 years from main planting parts in Anhui Province. Methods：Using toluene to test the content of moisture and using HPLC method to test the content of paeonol.Results：Paeonol content of Cortex Moutan collected from main planting parts in Anhui Province was from 1.78% to 2.90%.Conclusion：There is diversity between the various places of Anhui Province，according to the content of paeonol，the quality of Cortex Moutan from the Good Agricultural Practice（GAP） of Tongling is the best of all.

Key words：Cortex Moudan；Paeonol；Quality analysis；Evaluation

牡丹皮，又名丹皮，为毛茛科芍药属植物牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）的干燥根皮。秋季采挖根部，除去细根，剥取根皮，晒干而得。现代中药药理研究表明，丹皮含有丹皮酚、芍药苷等多种活性成分[1]，丹皮酚是丹皮中重要的有效成分，具有清热凉血，活血祛瘀的功效[2]，还具有抗肿瘤的作用[3]，通常以丹皮酚含量作为质量控制的主要指标[4]。丹皮主产于安徽、陕西、山东等地，以安徽亳州量最大，其次为铜陵凤凰山一带，因而对安徽丹皮的质量分析显得尤为重要。为此，本实验对2大产地10个地区31批次丹皮进行了质量分析，通过HPLC法测定丹皮中主成分丹皮酚的含量，为安徽丹皮质量控制提供参考。

1 实验材料

1.1 仪器设备 Agilent高效液相色谱系统（1260 Infinity II，VWD Detector，ChemStation色谱工作站）；OHAUS EX125D 電子分析天平（1/100000）；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；电热套等。

1.2 标准品及试剂 丹皮酚对照品（Sigma-ALDRICH，STBF-4379V）；甲醇（HPLC级，国药集团化学试剂有限公司）；超纯水。其余试剂为分析纯。

1.3 实验样品 31批次丹皮分别采自铜陵GAP基地、铜陵听泉居、铜陵示范园、铜陵缪村、南陵丫山西小、南陵丫山龙朱、亳州五马、亳州谯东、亳州大寺，规格按粗细划分为一条和二条。采集时间为2017年9月，遵从不同产地丹皮传统采收期。鲜样亦按统一标准由同样人员进行处理。

2 研究方法

2.1 水分的测定方法 取样品适量（约相当于含水量1～4mL），精密称定，置圆底烧瓶中，加甲苯约200mL。水分测定仪各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯，至充满水分测定管的狭细部分，将圆底烧瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5min，放冷至室温，检读水量。

2.2 丹皮酚含量的分析方法

2.2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6mm×150mm，5μm）；流动相：甲醇-水（45：55）；检测波长274nm；柱温30℃；流量1.0mL/min；在此色谱条件下，理论板数按丹皮酚峰计算大于9000，其色谱图见图1。

2.2.2 对照品溶液制备 精密称取适量丹皮酚对照品，加甲醇制成每1mL含0.02mg、0.2mg丹皮酚的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液制备 样品粉碎，通过24目和65目筛，精密称取65目筛面上的粉末0.5g，加入甲醇，摇匀后称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀过滤。精密取续滤液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用注射器吸取稀释液，通过0.22μm针头过滤器，即得。其色谱图见图2。

2.2.4 线性范围考察 精密量取浓度为0.2mg·mL-1的丹皮酚对照品溶液0.2，0.6，1.0，1.4，1.8mL，分别定容到10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。5个不同浓度的对照品分别进样2次，每次20μL，以峰面积为Y轴，对照品进样量为X轴，绘制散点图，得回归方程为Y=2061.5X+15.74，γ=0.9994，丹皮酚在0.8～7.2μg线性关系良好。见图3。

2.2.5 精密度试验 取上述浓度为0.02mg·mL-1的丹皮酚对照品溶液，连续重复进样5次，每次进样20μL，按上述色谱条件测定，计算RSD=1.16%，表明精密度良好。endprint

2.2.6 稳定性试验 取供试品溶液分别在0，2，4，6，8，12h测定，丹皮酚峰面积RSD=1.69%，表明丹皮酚在12h内基本稳定。

2.2.7 重现性试验 精密称取同一批（26号）丹皮样品5份，按2.2.3制成供试品溶液，测得丹皮酚平均含量为2.11%，RSD=1.27%，重现性良好。

2.2.8 回收率试验 采取加样回收的方法，精密称取0.5g已知丹皮酚含量的丹皮样品，分别精密加入丹皮酚对照品，按2.2.3制成供试品溶液，测得结果见表1，表明加样回收符合规定。

2.2.9 样品含量测定 上机测定，对照品及供试品溶液进样量均为20μL，以外标法计算，样品的测定结果见表2。

3 结果与分析

3.1 不同产地丹皮酚测定结果分析 从不同产地丹皮酚含量测定结果可以看出，安徽凤凰山一带为牡丹皮的道地产区，含量普遍较高，符合文献报道结果，其中以北京同仁堂安徽中药材有限公司GAP种植基地的最高（达2.90%），表明实施了标准化的GAP种植基地，对提高和稳定丹皮的质量意义重大。亳州丹皮酚含量相对较低，与当地自然环境及土壤条件等多种因素有关，具体情况有待进一步研究。见图4。

3.2 同一产地不同生长年限的丹皮酚含量分析 对同一产地不同年限采收的丹皮酚含量进行比较，随着年限增加丹皮酚含量逐渐升高，见图5，其原因是丹皮为多年生木本植物，丹皮酚储于韧皮部薄壁组织细胞中[5]，随着生长年限增加，丹皮酚会逐渐积累。但推迟采挖年限会导致产量下降，应从产量和含量角度综合考虑，确定适宜的种植年限。

3.3 同一产地相同生长年限的丹皮酚含量分析 对同一产地相同生长年限采收的丹皮酚含量进行比较，一条含量高于二条，见图6，其原因是划分规格时，较粗壮的一条多为主根皮，二条则多为侧根皮，主根生长年限较侧根更长，符合3.2的预期。由上述结果可以为丹皮质量等级细分提供参考依据。

3.4 丹皮酚含量的置信区间分析 根据概率论与数理统计有关理论，实验测量结果符合正态分布，95%的置信度接受实验结果的取值范围为：A±1.96C，其中A为平均值，C为标准方差。由表2数据得出凤丹地理标识产区（铜陵凤凰山及南陵丫山一带）丹皮酚含量以95%置信度可接受的取值范围为：（2.15±0.52）%，亳州地区丹皮酚含量以95%置信度可接受的取值范围为：（1.81±0.10）%。中国药典规定丹皮酚含量不得少于1.2%，是全面考虑了产地、气候、贮存及试验方法等众多因素的影响，给出了较为宽泛的要求。针对道地产区药材活性成分实际情况，可制定更为严格的地方标准，确保药品的质量。

参考文献

[1]吴少华，马云保，罗晓东，等.牡丹皮的化学成分研究[J].中草药，2002，33（8）：679-680.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010.

[3]N Li，LL Fan，GP Sun，et al.Paeonol inhibits tumor growth in gastric cancer in vitro and in vivo[J]. World Journal of Gastroenterology，2010，16（35）：4483.

[4]孫言才，沈玉先，孙国平，等.反向高效液相色谱测定原料药及注射剂中丹皮酚的含量[J].中国药理学通报，2003，19（5）：593-595.

[5]高信曾，刘宁.芍药、牡丹根的解剖学观察[J].中国药科大学学报，1986（4）：256-259.

（责编：张宏民）endprint