抗宫炎片指纹图谱在工艺控制中的应用

★ 廖春玲 吴燕红 许妍（.江西省医药学校/江西省医药技师学院 南昌 33000；.江西省药品检验检测研究院 南昌 33009）

抗宫炎片收载于《中国药典》2015年版一部，是一个具备广泛作用且疗效显著的药物，具有清热、祛湿、化瘀、止带之功效。用于湿热下注所致的带下病，症见赤白带下、量多臭味、宫颈糜烂。处方由广东紫珠、乌药及益母草三味药干浸膏组成，将三种干浸膏粉碎成细粉，加辅料适量，混匀、制粒、干燥、压制成片，包糖衣或薄膜衣制得。三种干浸膏分别由广东紫珠、乌药、益母草药材加水煎煮，滤过，浓缩至稠膏状，干燥制得［1］。中药药效是多成分、多靶点整体作用的结果，中药指纹图谱克服了仅仅依赖一种或几种指标成分的物理化学性质鉴别中药质量的局限性，从整体层面全面、准确地体现中药质量［2］。本实验运用抗宫炎片指纹图谱，相对完整地反映出全方的化学成分，根据指纹图谱提供的信息，以抗宫炎片浸膏中各特征峰与对应药材折算后的相对峰面积为指标，比较有效成分群在制剂工艺步骤中的变化，并对企业实际生产中使用的三种干燥方式进行工艺优选。

1 仪器与试药

1.1 仪器Agilent1100高效液相色谱仪，四元低压梯度泵，DAD检测器，Chemstation化学工作站；Sartorius BSA124S-CW电子天平；真空干燥机GKT_1000型（浙江省瑞安凯迪药化机械有限公司）;热风循环烘箱RH_27_C型（江苏省江阴万福机械有限公司）;微波真空干燥机BDMD_M_V_30型（河南勃达微波设备有限责任公司）。

1.2 试药对照品连翘酯苷B、金石蚕苷、毛蕊花糖苷（批号111530-201309）、去甲异波尔定、盐酸益母草碱，均购自中国食品药品检定研究院；对照品异毛蕊花糖苷、波尔定碱、牛新果碱由我院科研室提供。乙腈为色谱纯，水为Milli-Q制备的纯化水，磷酸为分析纯。

2 抗宫炎片指纹图谱特征峰的归属

2.1 供试品溶液的制备取抗宫炎片10片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，即得。

2.2 干浸膏溶液的制备根据供试品取样量，按药典抗宫炎片项下规定的处方比例及各药材得膏率（广东紫珠33%、乌药18%、益母草14%），分别取广东紫珠干膏约0.67g、乌药干膏约0.16g和益母草干膏约0.18g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，同2.1供试品溶液的制备，即得。

2.3 药材溶液的制备分别取与三种干浸膏相对应的广东紫珠药材约22.11g、乌药药材约2.88g和益母草药材约2.52g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，同2.1供试品溶液的制备，即得。

2.4 对照品溶液的制备精密称取连翘酯苷B、金石蚕苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、去甲异波尔定、波尔定碱、牛新果碱、盐酸益母草碱对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含连翘酯苷B 0.15mg、金石蚕苷0.15mg、毛蕊花糖苷0.15mg、异毛蕊花糖苷0.15mg、去甲异波尔定25 µg、波尔定碱0.15mg、牛新果碱0.25mg及盐酸益母草碱30μg的溶液，即得。2.5 通过对照品和对照药材比对，13个特征峰中7个使用对照品归属，5个采用对照药材归属。见图1-2。

图1 抗宫炎片指纹图谱与各对照品色谱图的比较

图2 抗宫炎片指纹图谱与对照药材的色谱比较图

3 有效成分群在工艺步骤中的变化

3.1 样品测定由两家企业提供的三味药材、生产对应的干浸膏（广东紫珠、乌药、益母草药材和干浸膏）及抗宫炎片各一批，按“2.2”方法制备，“2.1”项下色谱条件测定，计算3个不同工艺步骤特征峰的相对峰面积，比较抗宫炎片从原料到制粒到压片过程有效成分群的变化。相对峰面积（%）=抗宫炎片（或三种干浸膏）特征峰折算后的峰面积/对应药材折算后的峰面积；折算后峰面积=抗宫炎片（三种干浸膏或药材）中各特征峰的峰面积/实际取样量×理论取样量；理论取样量根据供试品取样量，按照处方比例及各药材得膏率计算各药材和干浸膏的取样量。如表1所示。

3.2 数据分析通过各工艺步骤特征峰的相对峰面积的计算，得出抗宫炎片的各特征峰的峰面积在每一步工艺过程都有较大损失，从药材至干浸膏，各特征峰峰面积损失一半以上，从干浸膏到制粒过程，除2号峰和8号峰外，其余特征峰相对峰面积均损失过半，制粒后压片的过程损失相对小。整个工艺1号峰去甲异波尔定剩余不到5%，3号峰盐酸益母草碱剩余不到2%，2号峰和8号峰异毛蕊花糖苷仅剩30%左右，其余各特征峰剩余约10%，含量低的12号峰波尔定碱和13号峰牛心果碱在压片后完全损失。

表1 各工艺步骤色谱峰相对峰面积比较

表2 不同干燥方法所得干浸膏色谱峰相对峰面积比较

4 三味干浸膏干燥方式的优选

因处方中三味干浸膏均为水提工艺，浓缩后干燥时间直接影响生产效率，考查生产工艺过程中干燥方法对干浸膏中各成份的影响并进行优选。

4.1 干浸膏溶液的制备取广东紫珠、乌药、益母草药材按工艺规程方法分别进行提取、浓缩，然后三味药的稠膏各分成三份，分别用方法1： 真空减压干燥设备干燥；方法2：微波真空干燥设备干燥；方法3：先用热风循环干燥再用真空减压干燥三种干燥方法共制得干浸膏9份。

4.2 样品测定取组方等比例生药量样品，按“2.2”方法制备，“2.1”色谱条件进行测定，以相应的药材色谱图为基准，计算三种干燥方法所得9份干浸膏中各特征峰的相对峰面积，如表2所示。

4.3 数据分析通过不同干燥方法所得干浸膏中各特征峰的相对峰面积的比较，得出广东紫珠干浸膏采用方法2各特征峰的相对峰面积大于方法1和方法3；乌药干浸膏方法1和方法3各特征峰的相对峰面积差异不大，且均大于方法2；益母草稠膏方法1各特征峰的相对峰面积最大，尤其是盐酸益母草碱相对峰面积明显大于其它两种干燥方法。

5 讨论

5.1 抗宫炎片各组份分析抗宫炎片是由广东紫珠、乌药、益母草三味药材分别加水煎煮制膏后成型而得。方中广东紫珠具有止血、镇痛、抑菌、抗炎的作用［2］，其主要药效成分为苯乙醇苷类化合物。乌药主要含有挥发油、异喹啉生物碱及呋喃倍半萜及内酯等化学成分，其中生物碱类成分是乌药的主要活性成分，现代药理学研究表明其具有广泛的抗炎和抗关节损坏等药理活性［3］。益母草具活血调经，利尿消肿，清热解毒的功效。研究表明［4］：益母草兴奋子宫的有效成分为水苏碱和益母草碱。

5.2 抗宫炎片指纹图谱在制剂工艺生产过程中的应用

5.2.1 指纹图谱中有效成分群在制剂工艺中的变化利用建立的指纹图谱对归属的13种有效成分群在制剂工艺步骤中的变化进行研究，结果发现：各有效成分群从药材到干浸膏再到制粒、压片每一步都损失严重，尤其对于乌药中含量低的生物碱类（如波尔定碱、牛心果碱）到成品中完全缺失，益母草中含量较高的生物碱类（如盐酸益母草碱）到干浸膏完全缺失。

5.2.2 减少指纹图谱中有效成分群在制剂生产过程中缺失的方法通过指纹图谱对三味干浸膏中三种干燥方法的优选结果发现：广东紫珠稠膏采用微波减压干燥最优，广东紫珠干浸膏为方中君药，占处方比例的66.8%，使用微波减压干燥不但能较好的保留有效成分群，并且大大节约生产时间，提高生产效率，降低生产成本。乌药和益母草稠膏用真空减压干燥更能保留有效成分群。

6 结语

药品的质量是生产出来的而不是检验出来的，在大量实践的基础上通过确定的生产工艺流程和测试方法得到的指纹图谱，不仅仅限于评价最终产品质量和判别真伪这一目的，而且可用于控制生产过程，根据各生产环节指纹图谱的变化，考察操作条件对产品质量影响的程度和因素，从而确定工艺参数的合理范围及重要工段［5-6］。