联合检测Annexin A3和EZH2蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

卢玉元，王新

（佳木斯大学，黑龙江 佳木斯 154007）

联合检测Annexin A3和EZH2蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

卢玉元，王新*

（佳木斯大学，黑龙江 佳木斯 154007）

目的：联合检测乳腺癌组织中Annexin A3和EZH2蛋白的表达情况并探讨其临床意义。方法：采用免疫组化Max Vision法检测Annexin A3和EZH2蛋白在各50例乳腺正常组织、乳腺浸润性小叶癌（ILC）、乳腺浸润性导管癌（IDC）组织中的表达情况及二者的相关性。结果：Annexin A3和EZH2蛋白在ILC与IDC组织中的表达差异均无统计学意义（P＞0.05），但在乳腺正常组织中的表达低于在ILC与IDC组织中的表达（P＜0.05）。Annexin A3和EZH2蛋白的表达与患者年龄、绝经状态、组织学类型、pTNM分期等临床病理特征均无关（P＞0.05），而与肿瘤直径、淋巴结转移、分子亚型等有关（P＜0.05）。Annexin A3和EZH2蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关（r=0.2，P＜0.05）。结论：Annexin A3和EZH2蛋白在ILC及IDC组织中的表达升高，二者表达呈正相关。Annexin A3、EZH2有望成为乳腺癌的肿瘤标记物，对乳腺癌的早期诊断、治疗和判断乳腺癌患者的预后具有重要的提示作用。

乳腺癌；乳腺浸润性小叶癌；乳腺浸润性导管癌；Annexin A3；EZH2

有数据显示，全球女性癌症患者中，乳腺癌占其中20%以上，在发达国家发生率升高至近30%，每年约有459 000人因乳腺癌去世［1］。乳腺癌会因地区的不同呈现出不同的发生率，在欧洲、北美洲、澳洲等地的富人中，在75岁以下妇女中有6%的妇女患有乳腺癌，而在东南亚及一些非洲不发达地区，其发生率仅是发达国家的1/3［2］。EZH2是一种在胚胎早期发育中普遍存在的转录抑制因子，参与基因沉默，在细胞周期中具有重要调控作用，是目前候选癌基因中一种属于PcG基因家族的重要的原癌基因［3］。膜联蛋白（Annexin）是一种与多种肿瘤的演进或侵袭、转移均有关联的蛋白，参与细胞分化、增殖与凋亡、细胞信号转导等一系列生理过程，Annexin A3是Annexin家族中在多种恶性肿瘤中都出现表达失调的一种蛋白，肿瘤的发生发展和预后与其表达失调有着密切的关联［4］。本实验采用免疫组化Max Vision法检测Annexin A3、EZH2蛋白在乳腺正常组织、乳腺浸润性小叶癌（ILC）及乳腺浸润性导管癌（IDC）组织中的表达情况，并分析二者与乳腺癌临床病理特征的关系以及二者的相关性。

1 材料与方法

1.3 结果判断 EZH2主要以高倍镜视野下细胞核被染成黄色或棕黄色为阳性，每张切片随机取8个高倍视野。采用半定量评分方法，不染色被判为阴性。（1）按染色强度计分0、1、2、3分，分别为未着色、淡黄色、棕黄色、棕褐色；（2）按阳性细胞百分比计分0、1、2、3、4分，分别为无阳性细胞数及阳性细胞数小于25%、25%～50%、50%～75%、大于 75%。（1）×（2）分值＞3分判定为阳性。Annexin A3以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性，每张切片随机取8个高倍视野，阳性细胞比例小于10%为阴性（-），10%～50%为弱阳性（+），50%～75%为阳性（++），大于75%为强阳性（+++）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 16.0软件进行统计学分析，Annexin A3和EZH2在乳腺癌和乳腺正常组织的表达采用χ2检验，二者的相关性采用Spearman等级相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Annexin A3和EZH2蛋白在乳腺正常组织、ILC及IDC组织中的表达 Annexin A3和EZH2在ILC与IDC组织中的表达差异无统计学意义（P＞0.05），二者在乳腺正常组织中的表达低于在ILC与IDC组织中的表达（P＜0.05），见表1。

表1 EZH2和Annexin A3在乳腺正常组织、ILC、IDC组织中的表达

2.2 Annexin A3和EZH2表达与乳腺癌临床病理特征的关系 EZH2与Annexin A3表达与患者年龄、组织学类型、绝经状态、pTNM分期均不相关（P＞0.05），与肿瘤直径、淋巴结转移、分子亚型有关（P＜0.05），见表2。

表2 Annexin A3和EZH2表达与乳腺癌临床病理特征的关系

续表2 Annexin A3和EZH2表达与乳腺癌临床病理特征的关系

2.3 Annexin A3和EZH2蛋白在乳腺癌组织中表达的相关性 EZH2蛋白与Annexin A3蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关（r=0.2，P＜0.05），见表3。

表3 Annexin A3和EZH2蛋白表达之间的关系

3 讨论

Annexin A3是Annexins家族成员之一，由323个氨基酸残基组成，位于人染色体4q13-q22。在多种类型的肿瘤中均出现了表达失调的情况，Liu等［5］研究指出Annexin A3蛋白在肺癌组织中的表达会随着淋巴结转移的情况而显著升高，与本研究Annexin A3蛋白在乳腺癌组织中的表达情况也会随着淋巴结的转移而升高的结果相符合。然而，Kollermann等［6］在对1 589例前列腺癌组织的研究显示，Annexin A3蛋白在前列腺癌组织中的表达情况比在良性前列腺组织及高级别上皮内瘤变中的表达情况要低很多，这与本研究结果相驳斥，其原因可能是因为肿瘤来源不同，也可能与样本量大小相关。这提示我们在不同的组织Annexin A3所起的作用可能并不相同［7］。

EZH2是一种在肺癌、胰腺导管腺癌、膀胱癌、前列腺癌均高表达的PCG基因家族中的一员，其高表达被认为是预后差的重要原因。EZH2的异常表达可使转录机制失调，其在多种恶性肿瘤组织中高表达，提示了其有可能成为一种新的肿瘤标志物，进一步揭示其潜在的临床价值成为了当前的研究热点［8-10］。EZH2蛋白在乳腺癌组织中的表达与是否伴有淋巴结转移相关，其高表达的病例术后无癌症复发间歇期短，生存率低，病死率高［11］。

本研究通过免疫组化Max Vision法来检测Annexin A3和EZH2蛋白在ILC、IDC及乳腺正常组织中的表达情况，Annexin A3和EZH2蛋白在ILC、IDC组织中的表达均高于乳腺正常组织，差异均有统计学意义；Annexin A3和EZH2蛋白在ILC、IDC组织中的表达差异无统计学意义。说明Annexin A3和EZH2均有望作为乳腺良恶性鉴别的客观指标，但均不能作为ILC和IDC特异性的指标。Annexin A3和EZH2表达与患者年龄、绝经状态、组织学类型、pTNM 分期均无关（P＞0.05）。Annexin A3与肿瘤直径、淋巴结转移、分子亚型有关（P＜0.05），提示AnnexinA3在乳腺上皮的恶性转变过程中表达上调，其与淋巴结转移有一定的关系，可能促进了淋巴结的转移，在促进乳腺癌的发生、发展及转移过程中有一定的作用。EZH2的表达与乳腺癌肿瘤直径、淋巴结转移及分子亚型相关（P＜0.05），说明EZH2蛋白过表达可能会促进乳腺癌的侵袭转移，其表达水平的高低可在一定程度上决定乳腺癌的发展和转归。研究显示EZH2在乳腺癌组织中的表达情况与临床分期不相关，这与Collett等［12］报道相驳，这可能是本研究样本量小有关。本研究中EZH2与Annexin A3二者在乳腺癌组织中的表达呈正相关（r＝0.2，P＜0.05），提示EZH2蛋白在肿瘤中的表达可能受Annexin A3蛋白的调控。今后EZH2与Annexin A3可能为乳腺癌的治疗提供新的靶点，在乳腺癌的诊断和治疗上，二者有望为其寻求新的路径。

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Expression of Annexin A3 and EZH2 Proteins in Breast Cancer Tissue and Their Clinical Significance

LU Yuyuan，WANG Xin*
（Jiamusi University，Jiamusi 154007，China）

Objective：To detect the expression of Annexin A3 and EZH2 proteins in the breast cancer tissue and explore their clinical significance.Methods：Immunohistochemical Max Vision method was used to detect the expression of Annexin A3 and EZH2 proteins in normal breast tissue，breast invasive lobular carcinoma（ILC），breast infiltrating ductal carcinoma（IDC）tissues（each of 50 cases）and the correlation between them was analyzed.Results：In ILC and IDC tissues， the expression of Annexin A3 and EZH2 had no statistical significance（P ＞ 0.05），but the expression level in normal breast tissue was lower than that in ILC and IDC tissues （P＜0.05）.The expression of Annexin A3 and EZH2 had no correlation with patients′age， menopausal status，histology， pTNM staging （P＞0.05）， but with tumor size， lymph node metastasis， and molecular subtypes （P＜0.05）.The expression of Annexin A3 and EZH2 proteins in breast cancer tissue was positively correlated （r=0.2，P＜0.05）.Conclusions：The expression of Annexin A3 and EZH2 proteins significantly increases in the ILC and IDC tissues and has a positive correlation.Annexin A3 and EZH2 can be tumor markers for early diagnosis，treatment and prognosis of breast cancer.

breast cancer；invasive lobular carcinoma；infiltrating ductal carcinoma；Annexin A3；EZH2

R737.9

A

1008-2344（2017）04-0310-03

10.16753/j.cnki.1008-2344.2017.04.003

王新（1963—），男（汉），主任医师，教授，硕士研究生导师.研究方向：肿瘤学.E-mail：278389575@qq.com

2016-12-23

（文敏编辑）