VEGF、IL-6表达水平在糖尿病性视网膜病变患者中的差异性分析

严鸣光,殷卫兵,解传奇

(河南省商丘市第一人民医院,河南 商丘476000)

VEGF、IL-6表达水平在糖尿病性视网膜病变患者中的差异性分析

严鸣光,殷卫兵,解传奇

(河南省商丘市第一人民医院,河南 商丘476000)

目的探究不同程度糖尿病性视网膜病变患者血清及房水中的VEGF、IL-6水平差异。方法研究对象选取2015.1-2015.12我院收治的90例糖尿病患者，根据视网膜病变程度进行分组，包括无糖尿病性视网膜病变组32例(A组)，非增殖期糖尿病视网膜病变27例(B组)，增殖期糖尿病视网膜病变31例(C组)，并选取同期收治的30例老年性白内障患者作为对照组，采用ELISA法对4组患者的血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平进行测定并分析其差异性。结果无论在血清还是眼房水中，VEGF、IL-6表达程度均为C组>B组>A组>对照组，且两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05)，从同组表达水平来看，四组患者血清中的VEGF、IL-6的表达水平显著低于眼房水中的VEGF、IL-6的表达水平，差异均具有统计学意义(P<0.05)；从相关性分析来看，A、B、C三组患者血清中的VEGF、IL-6的表达水平均与眼房水中的表达水平呈正相关。结论VEGF、IL-6水平随着糖尿病病变程度的加深表达水平存在差异性，提示两者可能在视网膜病变的发生发展中有着重要的作用，血清及眼房水中的VEGF、IL-6表达具有一致性。

视网膜病变；糖尿病；病变程度；血管内皮生长因子；白细胞介素-6

(ChinJLabDiagn,2017,21:2119)

糖尿病是常见的内分泌疾病，可能引发多种并发症，其中糖尿病性视网膜病变是糖尿病患者最常见也最严重的并发症之一，如果长期未能得到有效控制甚至可能致盲[1]。随着近年来生活习惯和饮食结构的改变，我国糖尿病患者人数逐渐增多，糖尿病性视网膜病变也成为了影响患者健康及生存质量的一大重要问题。随着分子生物学的发展，临床发现多种细胞因子可能是引起血-视网膜屏障破坏的重要因素[2]，也是引发视网膜病变的主要原因，主要包括肿瘤坏死因子(TNF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-β)、胰岛素样生长因子(IGF)等，其中VEGF被认为是导致多种新生血管性视网膜病变的主要作用因子[3,4]。此外也有学者认为糖尿病性视网膜病变患者的发病与自身免疫机能有关[5,6]，被激活的免疫细胞产生的细胞因子在促胰岛β细胞损伤中有着重要的意义。因此本文就不同程度的糖尿病性视网膜病变患者血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平差异性及相关性进行了研究分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料研究对象选取为2015.1-2015.12我院收治的90例糖尿病患者，根据视网膜病变程度进行分组，包括无糖尿病性视网膜病变32例(A组)，非增殖期糖尿病性视网膜病变27例(B组)，增殖期糖尿病视网膜病变31例(C组)，并选取同期收治的30例老年性白内障患者作为对照组。A组患者包括男性18例，女性14例，年龄52-76岁，平均63.5±5.7岁，病程3-16年，平均9.9±3.2年；B组患者包括男性15例，女性12例，年龄54-78岁，平均64.1±6.0岁，病程5-15年，平均10.3±4.0年；C组患者包括男性18例，女性13例，年龄51-79岁，平均63.9±5.6岁，病程6-18年，平均10.8±3.8年；对照组患者包括男性17例，女性13例，年龄55-79岁，平均64.4±6.9岁。4组患者在年龄、性别等一般资料对比上无显著差异(P>0.05)。

1.2方法采用ELISA法对4组患者的血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平进行测定。患者抽取空腹静脉血3 ml，注入无菌离心管混匀，3 000 r/min下离心10分钟，去血清保存于-20℃环境下备用；患者行白内障手术前打开前房，用无菌1 ml注射器在角膜缘内1 mm进行穿刺，从中央瞳孔区抽取房水0.2 ml，注意操作时避免触及晶状体或虹膜，将标本置入0.5 ml的Eppendorf管保存于-80℃环境下备用。检验仪器为日本日立公司7170型全自动生化分析仪，VEGF检验试剂盒由北京晶美生物工程有限公司提供，IL-6检验试剂盒由北京百奥莱博科技有限公司提供，操作过程严格按照说明书进行。

1.3观察指标对比各组患者血清及眼房水中的VEGF、IL-6水平，对比并分析血清与眼房水中VEGF、IL-6水平的相关性。

2 结果

2.1血清VEGF、IL-6水平对比各组患者血清中VEGF、IL-6表达程度为C组>B组>A组>对照组，两两比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组患者血清VEGF、IL-6表达水平统计对比

注：*表示与对照组相比P<0.05；#表示与A组相比P<0.05；&表示与B组相比P<0.05

2.2眼房水VEGF、IL-6水平对比 各组患者血清中VEGF、IL-6表达程度为C组>B组>A组>对照组，两两组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 各组患者眼房水VEGF、IL-6表达水平统计对比

注：*表示与对照组相比P<0.05；#表示与A组相比P<0.05；&表示与B组相比P<0.05

2.3血清及眼房水中VEGF、IL-6水平表达差异及相关性从表1、表2数据对比来看，四组患者血清中的VEGF、IL-6的表达水平显著低于眼房水中的VEGF、IL-6的表达水平，差异均具有统计学意义(P<0.05)。从相关性分析来看，A、B、C三组患者血清中的VEGF、IL-6的表达水平均与眼房水中的表达水平呈正相关(P<0.05)。

3 讨论

糖尿病性视网膜病变是世界范围内最常见的后天致盲性眼病，其中增殖性视网膜病变占总数的10%左右，超过50%的患者会在5年内发展成盲[7]，虽然目前玻璃体切除和激光光凝技术已十分成熟，但此类患者发展成盲的风险性仍远远高于其他患者。目前糖尿病性视网膜病变的发病机制临床尚未阐明，以往主要认为是长期高血糖导致血栓形成，白细胞淤积所致，近年来随着生物分子学的进展，临床发现多种生长因子表达增加和细胞因子的活化也可能是导致此类疾病发生的重要原因[8]。

糖尿病性视网膜病变的病理基础是血-视网膜屏障的破坏和新生血管的形成，因此VEGF在此类疾病中的作用逐渐被重视。VEGF属于一种促内皮生长糖蛋白，具有诱导血管生成、促进血管内皮细胞增殖的生理功能，在正常人体内同样存在，具有维持血管正常生理活动的意义，但正常情况下VEGF的表达较低[9]。研究发现视网膜血管内皮细胞具有多种VEGF受体，VEGF能够选择性的与这些受体结合，导致血管通透性增加，促进血管内皮细胞增殖，诱导新生血管形成，进而导致血-视网膜屏障的破坏[10]。Kurihara T等人[11]的研究显示视网膜缺血性疾病患者的视网膜中含有大量的VEGF，且一些其他的血管渗透性因子也能够通过VEGF间接发挥作用。一项研究采用原位杂交技术对新生血管性青光眼失明患者的摘除眼球进行了分析，结果显示视网膜是唯一存在VEGFmiRNA表达的组织，VEGF广泛存在于视网膜的内核层[12]。从本次研究数据来看，无论在血清还是眼房水中，VEGF的表达均为C组>B组>A组>对照组，这说明VEGF的表达与视网膜病变程度有密切相关。有研究指出VEGF与糖尿病视网膜病变患者的病程有密切相关[13]，但本文各组病例间病程对比并无显著差异，这说在排除病程因素的情况下，VEGF的表达仍与视网膜病变程度密切相关。从血清和眼房水中VEGF的相关性分析来看，两者呈正相关性，这提示视网膜病变患者血清的VEGF含量会一定程度上影响眼房水中的VEGF含量，这不单体现在糖尿病患者中，还同样体现在非糖尿病性视网膜病变患者中。

关于糖尿病视网膜病变的病理机制，也有学者认为与自身免疫有关，认为细胞因子接到的炎症反应在视网膜病变中有着重要的作用[14]。IL-6属于炎前细胞因子，能够调节免疫，提高B细胞免疫活性，促进巨噬细胞成熟，在机体的多种生理病理过程中均有参与，也是外伤刺激和感染反应的主要诱导分子[15]。IL-6作为一个重要的炎症指标直接参与了血管病变的病理过程，大量循证医学研究证实长期的慢性炎症会导致局部平滑肌细胞损害，增加血小板对内皮细胞的粘附，进而产生血栓前状态[16,17]。Matsuyama K等人[18]的研究证实糖刺激能够促进IL-6的分泌，这说明糖尿病患者体内的IL-6水平普遍高于健康人群，因此可认为IL-6的高表达可能是引发糖尿病多种并发症的重要因素。Ohno Matsui K等人[19]的研究发现糖尿病视网膜病变患者玻璃体中的IL-6水平上升，与非糖尿病视网膜病变患者对比存在显著差异，认为IL-6与糖尿病视网膜病变的发生发展有密切相关。从本次研究数据来看，虽然B组和C组患者血清和眼房水中的IL-6表达水平显著高于A组，但A组血清和眼房水中的IL-6表达水平同样显著高于对照组，这说明IL-6在糖尿病患者体内确实存在高表达的现象，但视网膜病变本身也是引起IL-6上升的一个重要因素。考虑原因是由于IL-6属于一种多功能细胞因子，在组织缺氧状况下IL-6能够诱导眼内新生血管生成[20]。从血清和眼房水中的相关性分析来看，IL-6与VEGF保持一致，两者之间呈正相关性，且同样与患者的病变程度密切相关。

综上所述，VEGF、IL-6水平随着糖尿病病变程度的加深表达水平存在差异性，提示两者可能在视网膜病变的发生发展中有着重要的作用，血清及眼房水中的VEGF、IL-6表达具有一致性。

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AnalysisofVEGFandIL-6levelsinserumandaqueoushumorofpatientswithdiabeticRetinopathy

YANMing-guang，YINWei-bing，XIEChuan-qi.

(TheFirstPeople’sHospitalofShangQiu,ShangQiu476000,China)

ObjectiveTo explore the differences of VEGF and IL-6 in serum and aqueous humor of patients with different causes of retinopathy.MethodsNinety patients with retinopathy were enrolled in our hospital from 2015.1 to 2015.12.According to their etiology,32 retinopathy patients (group A),27 patients with simple retinopathy (group B) (Group C),30 senile cataract patients were selected as the control group.All the patients were monocular.The levels of VEGF in the serum and aqueous humor of the four groups were measured by ELISA.IL-6 levels were measured and analyzed the difference.ResultsThe results of VEGF and IL-6 showed that the expression of VEGF and IL-6 in the serum and in the ocular aqueous humor was significantly higher than that in the control group(P<0.05),and the difference was statistically significant (P<0.05).And in all groups,the expression of VEGF and IL-6 in the serum was significantly lower than that in the aqueous humor (P<0.05).From the correlation analysis,the levels of A,B,The expression levels of VEGF and IL-6 in the sera of three groups were positively correlated with the expression levels in the aqueous humor.ConclusionThe expression of VEGF and IL-6 in diabetic retinopathy may be related to the development of diabetic retinopathy.The expression of VEGF and IL-6 in serum and ocular aqueous humor has a significant difference consistency.

Retinopathy;Diabetes mellitus;Degree of lesion;Vascular endothelial growth factor;Interleukin-6

1007-4287(2017)12-2119-04

R587.1

A

严鸣光,男，36岁，硕士，主管技师，检验医师，主要研究方向：自身免疫和感染免疫。

2016-12-11)