杨志元 , 白胜伟 , 闻晓波 , 冉旭华
(黑龙江八一农垦大学动物科技学院 , 黑龙江 大庆 163319)
1例蓝狐饲料中毒并继发产气荚膜梭菌病的诊治
杨志元 , 白胜伟 , 闻晓波 , 冉旭华
(黑龙江八一农垦大学动物科技学院 , 黑龙江 大庆 163319)
蓝狐属于食肉目犬科动物,又称为北极狐,是白狐的一种变异品种,主要生长在高纬度地区,如北冰洋、北美洲、西伯利亚和欧亚大陆[1]。蓝狐是珍贵的毛皮动物之一,其毛皮是高档饰品和高档裘皮服饰的生产原料,在国际皮毛市场广泛畅销[2],其毛色美观,轻便柔软,保暖性强,被称为“软黄金”,是世界上重要的裘皮支柱。蓝狐是我国由国外引入饲养的毛皮动物中的一种,我国毛皮动物养殖业起始于上个世纪中叶。近年来,狐的养殖在我国快速发展,但都以蓝狐为主,银狐和彩狐的养殖相对较少[3]。
该养殖场的病死蓝狐出现精神沉郁、肛门脱出、鼻孔流出无色液体、胃肠胀气,黏膜溃疡脱落,气体恶臭,肺出血性坏死,心内膜、肾和肝都有出血斑,脾出血,脾质脆易碎,肌肉有淡黄色液体渗出,胃内容物稀薄为液态,肠内容物黏稠,肠壁内有脓包等症状,本研究通过临床诊断和实验室诊断技术,确诊该蓝狐场发病的原因是蓝狐食入霉变的饲料造成黄曲霉毒素中毒并继发感染产气荚膜梭菌。
1.1 试验材料 2016年9月19日大庆某蓝狐场送来的病死蓝狐。
1.2 试验方法
1.2.1 临床诊断与剖检 采用临床常规诊断方法对病死蓝狐进行诊断,包括问诊、视诊和剖检,即询问病死蓝狐的生活史、既往史和现病史等;观察病死蓝狐的整体状况、表皮情况等;最后对病死蓝狐进行剖检,并无菌采取病料。
1.2.2 实验室诊断
1.2.2.1 涂片、革兰染色和镜检 采集病死蓝狐的大肠内容物、心、脾脏、肺脏、肝脏和肾进行无菌操作涂片,染色和镜检[5]。
1.2.2.2 分离纯化培养 取大肠内容物、心、脾脏、肺脏、肝脏和肾分别接种于普通营养肉汤培养基和厌氧肉肝汤培养基上进行增菌培养,待细菌增长适宜时,挑取厌氧肉肝汤培养基中菌落接种到血琼脂平板上划线纯分,37 ℃厌氧培养24 h,观察培养特性,将纯化后的细菌进行革兰染色镜检。
1.2.2.3 药敏试验 挑取血琼脂平板上纯化后的菌体,接种在灭菌的厌氧肉肝汤培养基,厌氧、37 ℃培养24 h后取出,用生理盐水稀释到适宜浓度,采用纸片扩散法[6]对该细菌进行药敏试验。根据标准进行判断[7](抑菌环直径大于15 mm为高敏(S);直径在10~15 mm为中度敏感(I);直径小于10 mm为耐药(R)。)。
1.2.2.4 生化试验 分离纯化后得到的细菌分别接种于吲哚、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、水杨苷、H2S、明胶、硝酸盐还原、甲基红试验和脲酶微量生化反应管中进行生化试验,并用标准菌株做参考,对其进行鉴定。
1.2.2.5 动物试验 选取8周龄、体重在20~30 g健康小鼠4只,将其随机分成两组,将提纯的菌液注射到其中2只小鼠体内,进行标记作为试验组,另外2只小鼠不注射菌液只注射无菌生理盐水作为空白对照组。在适宜相同的条件下饲养这两组小鼠并观察两组小鼠的生理变化。
1.3 饲料检验试验 将养殖场喂养病死蓝狐的饲料送实验室检测。
2.1 临床诊断结果 (1)病死蓝狐是突发性胀气死亡,在病例出现的1个月期间,养殖场中1 000只蓝狐中有20只蓝狐持续性死亡,都出现胀气现象,并且死亡的蓝狐体积都相对较大。通过视诊观察到病死的蓝狐全身胀气,肛门脱出,轻按鼻孔流出无色液体等;(2)病死蓝狐发病期间养殖场采用酵母粉拌料(山楂酵母粉)对其进行治疗;(3)病死蓝狐养殖场中采用的饲料为吉林农科膨化全价饲料(狐狸专用)、膨化玉米(储存1个月),海鱼(储存1个月)和羊肝(储存半年)。
2.2 剖检结果 将病死蓝狐进行剖检,可观察到病死蓝狐胃肠胀气,黏膜溃疡、脱落,有恶臭气体排出,肺出血性坏死,心内膜、肾和肝有出血斑,脾出血、脾质脆易碎,肌肉有淡黄色液体渗出,胃内容物稀薄为液态,肠内容物黏稠,肠壁内有脓包等病变。
通过对病死蓝狐进行临床诊断与剖检可初步诊断病死蓝狐是由饲料中毒和继发感染产气荚膜梭菌引起患病和死亡。
2.3 实验室检验结果
2.3.1 细菌的纯培养和镜检结果 该细菌在普通营养肉汤培养基上基本不生长,但厌氧肉肝汤培养中生长良好,经37 ℃恒温厌氧培养6 h后,厌氧肉肝汤培养基变浑浊,并有大量气体产生;在血琼脂平板上生长呈灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐的圆形菌落,直径约1~4 mm,菌落有双层溶血环,外环呈α溶血环,内环呈β溶血环。革兰染色镜检可见该菌为革兰阳性粗大杆菌,呈蓝紫色,有荚膜,菌体两端钝圆,多单个存在或成对排列,偶见芽孢等。
2.3.2 药敏试验结果 该菌的药敏试验结果表明,该菌对卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星高度敏感;对泰乐菌素、青霉素、庆大霉素和强力霉素中度敏感;对新霉素、链霉素、氨苄西林和环丙沙星耐药。
表1 药敏试验结果
2.3.3 生化试验结果 该菌的生化试验的结果与产气荚膜梭菌的生化试验结果一样,可判断该菌为产气荚膜梭菌。
表2 生化试验结果
+:阳性,-:阴性
2.3.4 动物回归试验结果 通过试验可观察到未注射菌液的小鼠健康,无死亡。注射菌液的小鼠,发生突然死亡。根据实验室诊断的结果,可判断造成蓝狐患病和死亡的细菌是产气荚膜梭菌。
2.3.5 饲料检查结果 饲料检查显示,长时间储存的饲料中为含有大量的黄曲霉毒素。综合临床诊断和实验室诊断的结果,可知病死蓝狐是由饲料中黄曲霉毒素中毒并继发感染产气荚膜梭菌导致患病和死亡。
患病蓝狐可肌肉注射卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星,进行抗菌治疗,同时更换长期存放的饲料,包括鱼类、玉米和羊肝等;对饲喂的饲料配比进行调整,动物性的饲料配比适量增加,植物性的饲料减少;饲喂混合饲料时添加保肝护肝的保健药品,同时要多加水,将食物调的稀软易消化等方法对蓝狐进行治疗。通过回访得知,根据治疗方案对蓝狐进行治疗,蓝狐不再出现死亡,饮食等各方面的情况趋于正常。
产气荚膜梭菌主要存在于动物的肠道中,只有在动物抵抗力降低的情况下,才能引起产气荚膜梭菌大量繁殖,导致蓝狐患病和死亡。养殖场蓝狐因为长期饲喂变质的饲料造成黄曲霉毒素中毒,使蓝狐抵抗力变低,产气荚膜梭菌大量繁殖,从而引起机体患病和死亡。死亡的蓝狐主要是体型相对较大的个体。主要是因为体型较大的个体摄入较多的变质饲料,对肝脏的损害较大,从而较先发病死亡,这是中毒的一个重要发病特征。药敏试验结果表明,产气荚膜梭菌对卡那霉素、阿莫西林和氧氟沙星高度敏感;而对其他的一些抗生素不太敏感甚至是产生耐药性。在饲喂蓝狐时,不能饲喂长时间储存的饲料,长时间储存的饲料容易变质产生毒素,对动物产生毒害作用,给养殖场带来重大经济损失,并且易影响动物食品安全和造成抗生素的乱用。在饲养蓝狐时一定要做好疾病的防治工作,减少不必要的损失。
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S865.2+3
B
0529-6005(2017)0068-02
2017-03-15
杨志元(1992-),女,硕士生,研究方向为预防兽医学,E-mail:wenxiaobo1977@163.com
冉旭华,E-mail;ranxahua@163.com